宁夏血液中心2014-2016年虹吸法制备冷沉淀质控抽检分析

段彩红，张巧云，柳芳梅，姬秀花

·经验交流·

宁夏血液中心2014-2016年虹吸法制备冷沉淀质控抽检分析

段彩红，张巧云，柳芳梅，姬秀花

目的分析虹吸法制备冷沉淀不合格率及影响因素，为采供血机构制备出高质量的血液制品提供依据。方法回顾性分析对采用虹吸法制备的冷沉淀质量控制数据，计算不合格率，分析不合格原因，找出影响冷沉淀质量制备时的关键环节。结果冷沉淀制品的不合格项主要集中在FⅧ因子的含量上。结论除个体差异及仪器设备缺陷不可控因素外，要从采集、融化、制备及检测过程等各个环节进行质量控制，以达到减少或预防不合格血液制品的出现。

虹吸法；冷沉淀；质量控制；影响因素

冷沉淀不但用于甲型血友病、纤维蛋白原及凝血因子缺乏所致的出血性疾病的治疗，也用于手术后出血、严重外伤及弥漫性血管内凝血(DIC)、深度烧伤、黏膜和皮肤病的替代治疗等[1-2]。而冷沉淀纤维蛋白原和Ⅷ因子(FⅦ)含量是直接影响治疗效果的因素。为了向临床提供高质量的冷沉淀，我们回顾性分析了2014年1月-2016年12月用虹吸法制备冷沉淀质控结果，现分析报告如下。

1 材料与方法

1.1 样本来源：由400 mL新鲜全血在采集后6 h内制备的原料浆，再采用虹吸法制备冷沉淀。

1.2 试剂与仪器:Ⅷ因子活性测定试剂盒(德国Siemens)，纤维蛋白原检测试剂盒(德国Siemens)，全自动凝血分析仪(CA-1500)，大容量离心机(贺利氏6000i)，全血制备分离机 (德国)，数字控制水浴血液融化箱(美国)，血浆速冻机(德国卢森堡)，热合机(韩国森通)。

1.3 方法

1.3.1 冷沉淀制备方法：采用虹吸法制备冷沉淀。具体步骤：往低温融化箱内加水至水箱约四分之三处，打开低温融化箱电源，按泵启动键和制冷启动键开始制冷。当温度恒定到6 ℃时，将准备好的新鲜冰冻血浆放到水槽中，每次不超过30袋，同时按摇摆键，仪器开始工作。待导管变软后，从水槽中取出空袋放在台面上，使两袋之间形成高度落差，打开卡夹，调至虹吸状态。当血浆融化剩余68～78 g白色不融血浆时关闭卡夹，取出融化箱内冷沉淀袋，用毛巾擦干袋体和导管水渍，称重后热合断离冷上清袋和冷沉淀袋，同时粘贴冷沉淀产品码，及时出库交予待检库。特别注意要迅速在-50 ℃以下的速冻机中冻成固体状态，然后保存在-20℃以下的冰箱中[3]。

1.3.2 质控抽检:2014年1月-2016年12月，每月随机抽检4袋冷沉淀，连续36个月，共抽检144袋，每袋产品检测项目包括外观、容量、Ⅷ因子含量、纤维蛋白原含量及无菌试验。Ⅷ因子、纤维蛋白原含量检测按试剂盒操作说明书进行检测。

2 结果

2.1 抽检结果：2014年1月-2016年12月共抽检36批次产品,每次4袋，共计144袋。抽检结果:不合格产品23袋，总不合格率16%，总合格率84%，冷沉淀合格率呈上升趋势，见表1。

表1 2014-2016年冷沉淀指控结果合格情况

2.2 虹吸法制备冷沉淀不合格产品检测结果：不合格产品共计23袋，每袋产品批次不同，均为Ⅷ因子含量低于国家标准，FⅧ(58.63±12.25)IU/袋，(168.23±17.23)Fbgmg/袋，容量(44.78±3.42)mL/袋。其中，《全血及成分血质量要求》GB18469-2012中规定，冷沉淀质量标准：由400 mL全血制备的冷沉淀FⅧ≥ 80 IU,纤维蛋白含量≥150 mg。

3 讨论

从抽检结果来看，不合格原因主要为因子Ⅷ含量不足。冷沉淀中的 FⅧ因子是一种不稳定的凝血因子，易失活，主要因为因子Ⅷ在在体外的半衰期为12～24 h，它的含量会随着制备时间的延长而下降，或在室温停留时间较长，12 h可减少41.17%,24 h可减少42.82%[4-5]。温度和时间贯穿于制备冷沉淀的整个环节。冷沉淀的制备经历了全血、新鲜冰冻血浆、冷沉淀制备三个阶段。因此，血液离体后，影响不稳定凝血因子质量的因素很多，温度、时间、工作人员的操作方式等[6]，任何一个环节的误差均可影响到冷沉淀制品的质量。首先，正常人群中FⅧ因子水平存在明显差异，这是目前制备冷沉淀的不可控因素。其次，质量控制应从采集血液的源头抓起，要求一针见血，如采血不畅、出现凝块、二针采血，这些都要进行标识，不得制备冷沉淀的原料血浆。每袋血采集结束后，要及时进行电脑信息录入，然后将血袋竖直地放置于4～6 ℃储血冰箱。尽快低温分离成分血，控制制备时间、温度这两个关键环节，能够最大限度地减少血浆中FⅧ因子等不稳定成分的损失。制备时需注意 提前开启恒温滤白柜和离心机进行预温，将全血悬挂于恒温滤白柜中滤除白细胞，如滤除白细胞时间过长及滤除不顺利时，及时给予标识，同时不用于制备原料血浆；血液离心后进行分离制备，保持血浆中无红细胞成分，因其在血浆冷冻时可使红细胞破裂，释放促凝血活性物质，可激活凝血系统，影响第Ⅷ因子(FⅧ)的稳定性。第三，融化和制备过程因素。目前，本血液中心采用虹吸法制备冷沉淀，在制备时严格按照冷沉淀制备仪的要求进行操作，严禁超量放置，应安排专人巡查制备冷沉淀。在整个过程中要随时观察，保证虹吸顺畅，但避免将原料血浆从水浴箱中反复拿出进行观察，使之暴露在室温时间过长，导致因子Ⅷ失活。冷沉淀制备好后，及时出库交予待检库，置于-50 ℃速冻机快速冷冻，然后装入相应的纸盒内置于-20 ℃低温冰箱保存待用。装入纸盒为了避免冰冻血浆之间发生碰撞，质控科的人员在检测时，水浴箱的温度应控制在30～37 ℃，融化时间不超过10 min[7]。在整个制备过程中，人员是贯穿于整个冷链环节的重要因素。因此，加强对工作人员的冷链培训，增强冷链意识，每个环节的人员应严格落实执行，冷链才能得到保障。

从连续3年的抽检结果看，我中心通过不断加强从全血到成分血各个环节的质量控制，用虹吸法制备冷沉淀制品的合格率逐年呈上升趋势。这样不但保证患者的疗效，而且可以减少用量，从而在一定程度上缓解了冷沉淀供给的紧张局面。

总之，冷沉淀制品的用量在临床应用日益呈上升趋势，为了向临床提供优质的冷沉淀制品，采供血机构应该重视影响冷沉淀质量的各个环节。除了配备必要的设备外，还需要对工作人员进行强化培训，加强其责任性，提高采血、制备方面的技术。加强各级人员过程控制意识,从各个环节严格控制冷沉淀质量，为临床提供优质、高效的冷沉淀制品。

[1] 卫生部联合国家标准化管理委员会.全血及成分血质量要求(GB18469-2012)[S].2012.

[2] 刘景汉，汪德清，兰烱采.临床输血学[M].北京：人民卫生出版社，2011：40-41.

[3] 单泓，王姣杰.虹吸法制备冷沉淀质控不合格原因分析[J].中国现代医生，2015，2：94-96.

[4] 易中梅，王红苹，李晨晨，等.全血手工制备浓缩血小板后的血浆再制备冷沉淀的质量评价[J].中国输血杂志，2013，26(2)：117-120.

[5] 章泽，邱颖婕，近魏名，等.冷沉淀制备时间对凝血因子的影响[J].临床输血与检验，2013，15(2)：169-170.

[6] 刘军.2010-2012年冷沉淀凝血因子质控结果分析[J].医学检验与临床，2013，24(3)：43-44.

[7] 杨振宇，谭萍，张福，等.浅谈血站冷链的关键控制点[J].临床输血与检验，2014，16(2)：221-223.

10.13621/j.1001-5949.2017.10.0938

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宁夏血液中心，宁夏 银川 750001

2017-04-17责任编辑王凯荣