一例蛋鸡禽网状内皮组织增殖病和禽白血病混合感染的诊治

张栋 ，杨凯 ，刘波 ，刘娜 ，孔令静

（1.山东省动物疫病预防与控制中心，山东 济南 250022；2.济南市农业局，山东 济南 250022；3.山东汇众兽医技术服务有限公司，山东 济南 250022）

一例蛋鸡禽网状内皮组织增殖病和禽白血病混合感染的诊治

张栋1，杨凯2，刘波3，刘娜3，孔令静3

（1.山东省动物疫病预防与控制中心，山东 济南 250022；2.济南市农业局，山东 济南 250022；3.山东汇众兽医技术服务有限公司，山东 济南 250022）

某蛋鸡场80日龄蛋鸡出现渐进性消瘦和生长发育不良，剖检可见腺胃肿大，乳头挤压出现脓性分泌物。无菌取病死鸡的腺胃进行荧光定量RT-PCR/PCR检测，结果显示该样品禽网状内皮组织增殖病病毒、禽白血病病毒均为阳性。结合临床症状、剖检病变和实验室检测结果，该蛋鸡场发病的原因是由禽网状内皮组织增殖病病毒和禽白血病病毒混合感染而引起的。

禽网状内皮组织增殖病病毒；禽白血病病毒；RT-PCR/PCR

禽网状内皮组织增殖病（RE）和禽白血病(AL)是继马立克病（MD）后发现的两种肿瘤性免疫抑制性疾病，其中RE是由禽网状内皮组织增殖病病毒（REV）引起的，单REV感染禽多不表现出典型的临床症状，主要以病鸡的生长发育不良、渐进性消瘦和因免疫抑制而继发感染其他病原引起的病死率上升为特征[1]；AL是由禽白血病病毒（ALV）引起，发病鸡主要表现为精神沉郁、生长迟缓、鸡群发育不均，感染鸡群出现肿瘤疾病及其所导致的慢性消耗性死亡、生产性能下降和免疫抑制等。这两种疾病均能造成禽类的免疫系统损伤，导致生产性能降低和死亡。近年来，ALV和REV感染有增多趋势，这严重危害了养鸡业的发展并造成了巨大的经济损失[2]。

1 鸡群临床症状

2016年8月，德州某蛋鸡养殖场养殖蛋鸡20000只，80日龄，病鸡食欲下降(采食量一直不达标)，精神沉郁，羽毛蓬乱，鸡冠苍白，贫血，排饲料粪便，消瘦，生长发育不良，发病率约为30%，零星伤亡。

2 剖检变化

病死鸡腺胃肿大（图1、图2），如乒乓球状，腺胃壁显著增厚、变硬，乳头内可挤出乳白色脓样分泌物，个别腺胃粘膜出血脱落（图3）、溃疡；胸腺、脾脏萎缩。个别病鸡盲肠扁桃体肿大、出血。其他器官无明显病变。

图1 外观：腺胃肿大

图2 剖解：腺胃肿大

图3 腺胃粘膜脱落

3 实验室检测

3.1 材料与方法

3.1.1 试剂 禽网状内皮组织增殖病病毒单重荧光PCR检测试剂盒购自北京亿森宝生物科技有限公司，禽白血病病毒实时荧光PCR检测试剂盒购自世纪元亨有限公司，病毒RNA/DNA柱式提取试剂盒购自北京森康生物技术开发有限公司。

3.1.2 方法 无菌采集病死鸡的腺胃，将其剪碎后，研磨并匀浆，反复冻融4次，4℃ 8000r/min离心5min，取上清液分别用病毒RNA/DNA柱式提取试剂盒提取核酸，置于-20℃保存备用。REV的反转录、扩增，ALV的扩增均按试剂盒说明进行操作。

3.2 检测结果

3.2.1 REV的RT-PCR检测结果 REV阳性对照Ct值为12.909，呈 S型特异性曲线，阴性对照 Ct值为 0， 样品 （B、C、D）Ct值分别为 15.772、15.455、16.208，样品均呈扩增曲线，如图4所示，表明样品感染了REV。

图4 REV PCR图

3.2.2 ALV的PCR检测结果 ALV阳性对照Ct值为15.74，呈S型特异性曲线，阴性对照Ct值为0，样品（B、C、D）Ct值分别为 17.33、18.70、19.51，样品均呈扩增曲线，如图5所示，表明样品感染了ALV。

图5 ALV PCR图

4 诊断结果

结合临床症状、剖检变化以及实验室病毒RT-PCR/PCR检测结果，可以明确该蛋鸡场的发病原因是由REV和ALV混合感染所引起的。

5 讨论

5.1 REV和ALV具有垂直传播的特性，因此建议养殖户从正规孵化场引进健康鸡苗，避免从疫区引进种蛋和雏鸡。对引进的种鸡要严格执行先隔离观察，之后再转入生产群的制度。疫苗中两者的污染和传播是引起其感染和流行的重要原因[3]，此外所用疫苗也应从正规厂家引进，避免免疫造成二次污染。

5.2 REV和ALV是引起鸡腺胃炎的重要因素。临床上腺胃炎病鸡的腺胃组织中这两种病原检出率显著升高，可能是由于这两种病原的混合或继发感染所致，因此对两者的有效防控，除净化鸡群外，应防止继发感染或混合感染。

5.3 加强饲养管理，改善鸡舍的饲养环境，保证舍内温度、湿度和合理通风，为其健康创造有利条件。加强生物安全措施，发现病鸡，及早隔离，避免接触传播。定期消毒，尤其是各种生产用具和运输车辆及种蛋的消毒。做好鸡场的卫生管理，垫料的消毒及处理、病死鸡的无害化处理等工作。

[1] 任玉鹏,张焕容,王小楠,等.四川部分鸡场禽网状内皮组织增生症病毒感染情况调查 [J].动物医学进展.2015，36（6）:162-166.

[2] 沈清霞,任冬梅,丁红雷,等.重庆市禽白血病及禽网状内皮组织增生症的血清流行病学调查[J].黑龙江畜牧兽医,2014,11,54-55.

[3] 庄金秋,毕妍丽,梅建国,等.应用PCR法检测禽源生物制品中禽网状内皮组织增生症病毒[J].中国畜牧兽医,2012,39（7）：36-39.

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