中药注射液干预对SD大鼠全麻心肌损伤的影响分析

黄进荣　朱成才　刘彩颜

【摘要】 目的：分析中药注射液干预对SD大鼠全麻心肌损伤的影响。方法：选择健康的SD大鼠60只，分为丹红组、参附组、参照组3组，每组各20只。丹红组大鼠尾静脉注射丹红注射液，参附组注射参附注射液，参照组大鼠注射0.9%的氯化钠溶液。测定心肌梗死面积、血清以及心肌组织的生化指标、分析心肌超微结构病理。结果：丹红组和参附组的心肌梗死范围明显小于参照组，参附组的MDA、SDN值低于丹红组和参照组，参附组和丹红组心脏超微结构辩护相比参照组病态明显减轻（P<0.05）。结论：参附注射液能够减轻自由基对心肌细胞的损伤，起到保护心肌的作用。

【关键词】 参附注射液； 心肌损伤； MDA； SDN

Analysis the Effect of Traditional Chinese Medicine Injection Intervention on the Myocardial Injury of SD Rats/HUANG Jin-rong，ZHU Cheng-cai，LIU Cai-yan.//Medical Innovation of China，2017，14（22）：143-146

【Abstract】 Objective：To analyze the effect of traditional Chinese medicine injection intervention on the myocardial injury of SD rats.Method：60 rats of healthy SD were selected，they were divided into three groups：Danhong group，Shenfu group and reference group，20 rats in each group.Danhong group was given Danhong injection，Shenfu group was given Shenfu injection，reference group was injected 0.9% of saline.The area of myocardial infarction，serum and the biochemical index of myocardial tissue，and analysis of myocardial microstructural pathology were measured.Result：The myocardial infarction of the Danhong and Shenfu group were significantly less than the reference group；the MDA and SDN values of the Shenfu group were lower than the Danhong group and the reference group；the reference group was significantly reduced compared with the hyper-microstructure of the Danhong group （P<0.05）.Conclusion：The injection can reduce the damage of free radicals to heart muscle cells and protect the heart muscle.

【Key words】 Shenfu Injection； Myocardial injury； MDA； SDN

First-authors address：Maternal and Child Health Care Hospital of Zengcheng District Guangzhou，Guangzhou 511300，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2017.22.043

心肌缺血损伤经常发生于急性心肌梗死后的冠脉内溶栓术、冠脉内球囊扩张血管成形术以及体外循环心内直视手术等过程中[1-5]。其机理复杂，当前医学研究认为与细胞内Ca2+超载、氧自由基大量生成、微血管内皮组织损伤及血管内皮细胞与血小板之间相互作用有关[6]。本文通过比较参附、当红注射液对大鼠全麻心肌损伤的影响，对注射液影响结果进行分析，結果报道如下。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 大鼠 选择健康的SD大鼠60只，重量220～260 g，雌性30只，雄性30只。

1.1.2 试剂 丹红注射液，10 mL/支，红棕色澄明液体，参附注射液，丙二醛（MDA），超氧化物歧化酶（SOD），血清磷酸肌酸激酶（CPK）。

1.1.3 仪器 HX200型动物呼吸机；ECG651型心电图机；BL420E+生物信号记录分析系统；SN-3001酶标仪。

1.2 方法 将60只大鼠分为丹红组、参附组、参照组三组，每组大鼠20只。心肌损伤大鼠模型制作：在大鼠腹腔注射20%乌拉坦 5 mL/kg的麻醉后，将大鼠以仰卧位固定在鼠台上，使用针状电极插入右前肢和左后肢皮下，连续监测导联心电图。颈部正中气管切开术（第3、4气管软骨环间）作气管插管，连接动物呼吸机进行人工通气（潮气量8～10 mL，呼吸频率60～70次/min）。分离右颈总动脉插入硅胶管，导管另一端通过压力传感器连接于MPA心功能分析系统，然后缓慢插入导管至左心室，测定左心室收缩压、左心室舒张末压、左室内压最大上升速率、左室内压最大下降速率，分离颈外静脉并插入导管以备给药。沿胸骨左缘旁0.5 cm切开皮肤，剪断第3、4、5根肋骨，进入胸腔，打开心包暴露心脏，在左心耳根部下缘2 mm处进针，用5-0无损伤缝合针穿过左冠状动脉前降支下方的心机表层，从肺动脉圆锥左缘出针穿线，待心电图恢复稳定10 min后记录正常参数，在LAD表面穿线处置一双折的10号丝线活结结扎LAD，以造成左心室前壁缺血40 min，然后松开活结，恢复左冠状动脉血液灌注30 min和120 min。LAD结扎成功标准：心电图现实ST段抬高、QRS波变高变宽和缺血心肌变为青紫色。LAD再通成功标准：解开结扎线后QRS波振幅逐渐回落，抬高的T段回落和缺血区心肌变红。endprint

1.3 实验操作 对丹红组大鼠尾静脉注射丹红注射液10 mL/kg，2次/d，连续5 d；对参附组大鼠注射参附注射液5 mL/kg，2次/d，连续5 d；对参照组大鼠注射0.9%的氯化钠注射液5 mL/kg。从实验后第4天起，丹红组和参附组均对大鼠腹腔注射异丙肾上腺素注射液1 mg/kg，1次/d，连续2 d。各组大鼠在末次注射异丙肾上腺素注射液5 min后，腹腔注射乌拉坦5 mL/kg麻醉，连接BL-420生物记录仪记录各组大鼠心电图，2 h后取血以及心脏待测。

1.4 观察指标

1.4.1 心肌梗死面积测定 待结扎冠脉24 h后取心脏，-20 ℃下冰冻10 min，在结扎线下平行于冠状沟将左心室横切5片，1%TTC溶液37 ℃染色6 min，染色后吸干水分，测量梗死面积占心室面积的百分比。

1.4.2 血清以及心肌组织的生化指标测定 待结扎冠脉24 h后，腹主动脉取血，进行血清分离，取心肌组织，用0.025 mol/L蔗糖溶液制成匀浆，离心12000 r/min，30 min，取上清液，按照试剂盒要求检测MDA、SOD值。

1.4.3 心肌超微结构病理观察 取出心脏后迅速切取正常心肌和损伤心肌2 mm3大小各一块，置4 ℃ 3%戊二醛中按电镜常规制样，使用JEM-1200型投射电镜观察心肌超微结构改变。

1.5 统计学处理 使用SPSS 22.0统计软件进行分析，计量资料以（x±s）表示，比较采用t检验，计数资料采用 字2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组大鼠心肌梗死面积测定 丹红组和参附组皆能有效缩小心肌梗死范围，与参照组比较差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2.2 各组心肌组织MDA和SOD含量比较 参附组MDA、SDN值低于丹红组和参照组，丹红组MDA、SDN值低于参照组（P<0.05）。见表2。

2.3 各组心肌超微结构观察 参照组心肌超微观察：细胞膜皱缩，部分破裂；细胞核不规则，染色质边集，异染色质增多，线粒体嵴模糊，部分出现消失情况，线粒体间有大量的空泡；肌原纤维排列紊乱，呈斑块状、均质化，肌节模糊，敏感带模糊。参附组：与参照组相比，病态明显减轻，肌原排列比较整齐，线粒体嵴较光滑。丹红组心脏超微结构变化基本同参附组。

3 讨论

心肌损伤时，自由基的产生及其介导的脂质过氧化反应，心肌细胞Ca2+超载是心肌损伤的重要环节之一。因此，尋找有效氧自由基清除剂以及Ca2+拮抗剂，恢复损伤缺血区心肌细胞正常功能，已经成为心肌缺血损伤研究的重要方面[7-11]。

氧自由基形成过多是心肌缺血发生的主要机制之一[12-14]，丙二醛（MDA）含量变化可直接反映出细胞受自由基损伤的程度[15]，超氧化物歧化酶（SOD）能够清除超氧阴离子，保护机体免受氧自由基损伤，其活性高低可间接反应机体清除氧自由基的能力[2]。本次对照实验中，参附注射液和丹红注射液均表现出了良好的保护效果，其主要原理为：注射液注射后，一方面能够扩大冠状动脉，另一方面能够疏通血管，增加血流量；缓解心肌细胞代谢异常，改善心肌线粒体功能，促进心肌细胞ATP生成；抑制Ca2+回流，降低Ca2+浓度，预防Ca2+超载，进而缓解心肌细胞受到的损伤[1-3]。

本文实验中，丹红组和参附组的心肌梗死范围明显小于参照组，说明两种注射液皆能有效缩小心肌梗死范围；参附组的MDA、SDN值低于丹红组和参照组，丹红组的MDA、SDN值低于参照组（P<0.05）。参附注射液的使用相较于丹红注射液、生理盐水注射液能明显的抑制心肌缺血损伤大鼠血、心肌组织MDA含量的升高，提高SOD活性。参附注射液能够通过提高内源性抗氧化酶SOD活性[16-20]，清除自由基引起的脂质过氧化反应，减轻自由基对心肌细胞的损伤[4]，起到保护心肌的作用。

参考文献

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（收稿日期：2017-06-26） （本文编辑：周亚杰）endprint