蔬菜中氨基甲酸酯农药的检测方法

摘要：液相色谱仪广泛应用在生物化学、食品、医药、环境分析等各种领域。适用于蒸发温度低、易挥发的氨基甲酸酯。农药升温测定如吡虫啉、除虫脲、灭幼脲等，检测效果较好。

关键词：蔬菜；农药；检测方法

中图分类号：S132 文献标识码： A DOI编号： 10.14025/j.cnki.jlny.2017.21.047

1液相色谱仪的原理

基本原理使通过目标物分子的有机相和水相混合溶液中表现的极性不同从而使不同的农药组份分开。

2液相色谱仪在蔬菜农药残留检测中的应用（氨基甲酸酯类农药的检测）

2.1检测的范围

检测水果蔬菜中氨基甲酸酯类农药包括吡虫啉、多菌灵、除虫脲、灭幼脲、阿维菌素、涕灭威亚砜、涕灭威砜、涕灭威、三羟基克百威、克百威、甲萘威；12种氨基甲酸酯农药方法检出限为0.01～0.03毫克/公斤。

2.2实验仪器

实验仪器华光P600液相色谱仪、脱气机，荷兰进口自动进样器，配有安捷伦C-18柱子，日本岛津的紫外（型号Essentia SOD-16）和岛津荧光（型号RF-20A）检测器。

2.3液相华光P600型设备原理

样品经前处理后通过自动进样样品，注入20毫克试样，通过C-18的色谱柱时，吸附在柱的填料中；通过高压输液泵调节有机相和水相的比例。使C-18柱中的目标混合物，将先后顺序进入检测器，行程图谱。

2.4耗材

实验用的一级纯净水、乙腈、二氯甲烷、甲醇、农药标准溶液配制。

2.5农药标准溶液的配制

2.5.1单一药的标准溶液 取某种农药标准物，用甲醇溶剂制成1000毫克/升的农药储备液置于冰箱冷冻室内，使用时放置于室内达到常温后，吸收用甲醇稀释制成标准上机单一的农药标准溶液。

2.5.2混合农药标准溶液的配制 取多种农药标准物分别准确称量一定量，用甲醇溶解制成1000毫克/升的农药储备液置于冰箱冷冻室内，使用时放置于室内达到常混合，再稀释后制成上机用的标准混合溶液。

2.6使用的仪器

液相色谱仪带有紫外检测器和荧光检测器，C-18液相色谱柱；分析试验室常用仪器设备；食品料理机；氮吹仪；漩涡混合器；匀浆机。

2.7实验步骤

2.7.1实验样品制备 按GB/T789的方法抽样，采用对角线缩分法把使用部分3公斤浓缩到500克左右，打浆裝入样品盒中，置于-20℃冰箱冷冻室内保存。

2.7.2农药提取 将样品解冻置于室温称量25.0克样品，加入50.0毫升乙腈后匀浆3分钟，再用滤纸过滤收集到1000毫升具塞量筒中，加入5～7克Nacl盖上塞子震荡1分钟，静止45分钟，使之分层备用。吸取10毫升上清液放入50毫升的烧杯中然后放入70℃水浴锅中蒸至净干，向烧杯中加入2毫升的99∶1（二氯甲烷加甲醇）备用，向氨基柱中加入4.0毫升（二氯甲烷加甲醇）溶液，待溶液面到达吸附层表面时立即加入待净化溶液，用10毫升刻度离心管接收洗脱液，然后向烧杯中分3次加入共6毫升的混合液，涮洗后注入氨基柱中回收8毫升洗脱液，将刻度离心管放入40℃水浴锅中氮吹至近干后用2.5毫升的甲醇溶液定溶转移到上机小瓶中待测。

2.7.3农药残留测定 使用碳十八液相色谱柱，使色谱柱保持在38℃；用紫外检测器检测吡虫啉、多菌灵、灭幼脲、阿维菌素、除虫脲等农药；起始的流动相比例为水相55%有机相45%，经过6分钟水相变为55%有机相45%，运行到30分钟时水相变为20%有机相为80%，到40分钟时水相变为10%有机相变为90%，到50分钟时水相变为55%有机相变为45%。

使用荧光检测器检测涕灭威、灭多威、甲萘威、克百威等农药，时间梯度为起始的流动相比例为：水相70%，有机相30%，经过6分钟水相变为70%，有机相30%。运行到19分钟时水相变为30%，有机相为70%。到24分钟时水相变为25%，有机相变为75%。到35分钟时水相变为70%，有机相变为30%。

2.8液相色谱分析

由自动进样器吸取20微升待测溶液注入系统中，通过碳十八柱子分离出待测组分，经过检测器形成色谱图，以各组分的出峰时间定性；以出峰面积定量。

2.9分析定性

2.9.1结果分析 采用色谱图各农药出峰时间给农药定性；用外标法根据峰面积给农药定量。

2.9.2定量结果计算 式样中被测农药残留量以质量分数ω计，单位以毫克每公斤（毫克/公斤）表示，按公式：

ω=ρ×V3÷V2×V1÷m

ρ——标准溶液中农药的质量浓度，单位为毫升每升。

V1——提取以毫升为单位的溶剂体积。

V2——吸取以毫升为单位用于检测溶液体积。

V3——以毫升为单位定容样品溶液体积。

m——以克为单位的式样质量。

计算结果保留两位有效数字，当结果大于1毫克/公斤时保留三位有效数字。

2.10精密度

实验精密度按照GB/T6379.2规定，获得重复性和再现性的值以95%的可信度来计算。

作者简介：孔德志，大专学历，中级农艺师，研究方向：蔬菜农药残留检测。endprint