钟剑锋+陈喜蓉+欧滨+林芳能+阳记萍+王东江
摘 要:以活化硒矿和亚硒酸钠两种硒源的不同浓度来种植紫芝,研究对紫芝生物富硒能力的影响。结果表明,添加相同浓度的活化硒矿水溶液和亚硒酸钠溶液的情况下,紫芝的硒含量差别很大,尤其是硒溶液浓度同为15mg/kg的时候达到最大值,即以亚硒酸钠溶液为硒源的紫芝硒的含量是以活化硒矿水溶液为硒源的485倍。由此可知,与活化硒矿相比, 以亚硒酸钠为硒源的紫芝富硒效果强。
关键词:硒矿;亚硒酸钠;紫芝;富硒
紫芝为灵芝属真菌, 在我国有悠久的药用历史, 被列为名贵中草药。现代科学研究表明紫芝含有上百种化合物,不仅含有丰富的多糖、蛋白质、维生素及其他活性物质(比如生物碱、多肽、氨基酸等等),还有较强的富硒特性[1-2]。硒是人体内必不可缺少的微量元素之一,缺硒易导致肝癌、胃癌、肾癌等多种重大疾病,缺硒也会降低人体的抵抗力。目前市面上出售最多的是无机硒产品,有机硒更适合人体吸收和储存 [4-5]。利用紫芝富硒性和耐硒性的特点,将紫芝作为生物载体进行硒的生物转化,发掘出有机形态、使得有机硒的开发成本得以降低。本论文以紫芝为载体进行研究,主要以无机硒(亚硒酸钠、活化的硒矿粉)为硒源对紫芝的富硒特性进行对比和观察,比较不同硒源对紫芝生物富硒特性效应的影响。
一、材料与方法
1.材料
(1)试验材料。紫芝菌株由海南省林业科学研究所林副特产研究室筛选、保存;培养基选用:木屑78%、麸皮20%、白糖1%、石膏1%。
(2)试验试剂。实验用水为分析纯水,GB/T6682规定的三级水;氢氧化钠、硝酸、盐酸、高氯酸均为优级纯。消解液为硝酸与高氯酸按9:1 体积混合;盐酸(6 mol/L)、铁氰化钾(100 g/L)、硼氢化钾溶液(10g/L);硒标准液、硒标准应用液。
2.试验方法
(1)硒矿活化。将硒矿石粉碎过筛,细度为40~180目;加入硒矿粉质量体积比3倍体积,浓度为 0.6mol/L的氨水,在室温下搅拌24h后,将溶液加热煮沸并煮至1/3体积,然后自然冷却至室温并补加硒矿粉质量体积比2倍体积、浓度为0.6mol/L的氨水,再次煮沸并煮至1/3体积,冷却至室温后;第三次加硒矿粉质量体积比2倍体积、浓度为0.6mol/L 的氨水并加热煮沸至 1/3 体积待用。
在硒矿水溶液中配制成硒浓度为0 mg/kg、5 mg/kg、10 mg/kg、15 mg/kg、20 mg/kg、30mg/kg,按每100kg干料添加硒溶液120kg,采用代料栽培模式,通过装袋、消毒、接种后放置培养室,待菌丝长满菌包移至棚内出芝。一个浓度接种50包(抽取样本40包),3次重复。
(2)亚硒酸钠溶液配制。将亚硒酸钠配制成硒浓度分别0mg/kg、5mg/kg、10mg/kg、15mg/kg、20mg/kg、30mg/kg,采用代料栽培模式,通过装袋、消毒、接种后放置培养室,待菌丝长满菌包移至大棚内出芝。一个浓度接种50包(抽取样本40包),3次重复。
(3) 测定内容和方法。pH用WS型袖珍数显pH计测量、硒含量使用AFS-230E双道原子荧光光度计测定。
(4)试验数据处理方法。Office 2007软件作图进行数据处理。
二、结果与分析
1.两种硒源培养基质的pH
在基质中添加两种不同浓度的硒源,基质中的pH值始终保持在5.5~6.0之间,这个范围内波动均符合灵芝子实体最适生长pH值5.0~6.0。
2.两种硒源对紫芝富硒效果的影响
(1)活化硒矿水溶液不同添加量对紫芝子实体富硒效果的影响。添加活化的硒矿水溶液,使培养基中硒浓度分别为5mg/kg、10mg/kg、15mg/kg、20mg/kg、30mg/kg。试验结果表明,随着活化硒矿水溶液浓度的增加,子实体对硒的吸收量不断增加,在活化硒矿水溶液浓度达到15mg/kg时,硒含量达到最大值为0.243ug/kg,但当活化硒矿水溶液浓度超过15mg/kg,子实体对硒的吸收量反而减少。
(2)亚硒酸钠不同添加量对紫芝子实体富硒效果的影响。添加亚硒酸钠溶液,使培养基中硒浓度分别为5mg/kg、10mg/kg、15mg/kg、20mg/kg、30mg/kg。试验结果表明,随着活化硒矿水溶液浓度的增加,子实体对硒的吸收量不断的增加,在亚硒酸溶液浓度达到15mg/kg时,硒含量达到最大值为118ug/kg,但当活化硒矿水溶液浓度超过15mg/kg,子实体对硒的吸收量反而减少。
(3)两种硒源对紫芝富硒效果影响的比较。试验结果表明,同浓度的两种硒源对紫芝富硒能力的影响不一致。当活化硒矿水溶液浓度和亚硒酸钠溶液浓度一致的时候,亚硒酸钠溶液对紫芝富硒能力的影响更大。活化硒矿水溶液对紫芝的富硒率在3.2%~6.5%;亚硒酸溶液对紫芝的富硒吸收率高达71%~86%。所以亚硒酸钠对紫芝的吸收率更好,尤其是亚硒酸钠浓度达到15mg/kg时,紫芝富硒能力最强。
三、讨论与结论
利用活化的硒矿和亚硒酸钠作为硒源,两种硒源对于紫芝富硒能力的影响都是在浓度低于15mg/kg时,硒含量随浓度的增加而增加,浓度为15mg/kg时,硒含量达到最大值;浓度高于15mg/kg时,硒含量下降,下降的原因可能是因为过高的SeO42-和SeO32-硒离子进入细胞,引起代谢紊乱,酶促反应失调,出现高硒的毒害作用。亚硒酸钠溶液为硒源培育出的紫芝硒含量高于同浓度的活化硒矿水溶液。在硒溶液浓度为15mg/kg时,添加亚硒酸钠溶液为硒源的紫芝硒含量是以活化硒矿水溶液为硒源的485倍,紫芝中硒含量为118μg/g,符合国家标准规定食品中最佳硒含量95~125μg/g。最终结论是使用15mg/kg浓度的亚硒酸钠溶液对紫芝富硒以及生长影响是最好的。
参考文献:
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