不规则抗体检验在临床输血中的检验效果及对患者治疗预后的影响研究

河南省南阳市中心血站（473000）靖春旭

在现代医疗中，临床输血已成为挽救人们生命安全的必要手段，一旦出现差错，可能会危及生命，因此除了慎重应对其操作外，必须选择更为妥善的技术方法，保证其准确性和及时性，保障受血者的生命健康。在临床输血中，血型免疫抗体的检出率维持在为0.30%～2.00%，进行输血前的筛查可以排除不同血型的免疫抗体，对于保障受血者生命安全有着积极意义。现代医疗技术的进步已经能够将ABO血型鉴定[1]误差的发生率控制在一个很低的水平，然而对于因输血、妊娠导入不规则抗体所引起的溶血性不良反应还难以避免。众所周知，人体血型抗体分为规则抗体和不规则抗体，前者由ABO血型中的抗-A、抗-B[2]和抗-AB等规则抗体组成，后者来自于ABO血型以外的免疫抗体，如IgG抗体、IGM抗体等。临床输血不良反应的主要原因即是不规则抗体的筛查，输血前如不能合理选择血型，将加大溶血性不良反应的发生率。本文分析大样本临床资料，旨在探讨输血前不规则抗体筛查的临床价值。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取我院2013年5月～2015年8月入治的1600名受血者的临床资料，男性971人，女性529人，年龄在15～65岁之间，平均年龄为(35.4±2.5)岁。所有患者均为符合临床输血适应证的患者。

纳入标准：①经临床确诊，具有输血指征；②临床资料完整；③年龄不超过85岁，具备稳定的生命体征[3]；④主动配合治疗。另有排除标准如下：①有急性感染、各种心肌炎、心肌病者，须通过CT、MRI等头部检查来证实排除；②患者存在心肝肾功能不全；③近期服用糖皮质激素或免疫抑制剂；④凝血功能障碍者；⑤临床资料不完整者；⑥病例有感染性心内膜炎[4]、风湿性心脏病。⑦没有取得患者及其家属的同意和签署知情同意书。

1.2 方法 对受血者的操作须遵照《全国临床检验操作规程》。采集其静脉血3～5mL，需注意取血前3d空腹，进行10分钟的3000r/min离心操作，分离出血清标本。做好临床常规操作指导，并详细记录其个人信息，筛选标记红细胞并制作抗人球蛋白凝胶卡。采用低浓度溶液调整红细胞或谱细胞至0.7%左右，实验微管注意制作标记，继续加检者血清入微管，37℃温度下孵育试剂15分钟进行离心操作，本次研究使用BYL型血型离心机，观测结果。受血者的血液中存在不规则抗体是导致其出现迟发性免疫反应和溶血性输血反应的重要原因。在筛选不规则抗体的操作中，先在待测管中滴入受血者血清和红细胞悬液，对照1-H号谱细胞进行鉴定，筛查阳性细胞抗体使用抗人球蛋白凝胶卡辅助盐水试管法来鉴定抗体，继而完成抗体类型的坚定。

1.3 结果判定标准 阳性(+)判定标准：凝胶柱上部或中部出现红细胞凝集、悬浮[5]。阴性(-)判定标准：红细胞的沉降发生在凝胶柱底部，显示为阳性的游离筛检抗体与谱细胞进行对照，相符者可判断为抗体阳性。

1.4 统计数据 本次使用的统计软件为SPSS19.0，以计量资料t来代表计算临床数据并检验分析，以x2来进行单因素分析的检验，视P<0.05为差异有效，具备统计学意义。

2 结果

2.1 不规则抗体筛查结果 在1600例患者中，共筛出不规则抗体阳性者6例，男4例，女2例，阳性检出率为0.37%。6例不规则抗体阳性患者均存在妊娠史[6]或输血史，而其中4人患血液系统疾病，占比66.67%，其他疾病患者2例，占33.33%，二者比较差异有统计学意义(P<0.05)。见附表1。

2.2 不规则抗体特异性鉴定 本次研究中的不规则抗体阳性患者有4例Rh系统抗体阳性(66.67%)，其中抗-D抗体、抗-DC抗体各1例，分别占16.67%，抗-E抗体[7]阳性2例(33.33%)。另检出MNS系统抗-M抗体阳性2例，占33.33%。见附表2。

3 讨论

输血患者在入院后需输注血液以展开治疗，而输血安全检验是临床输血的前提。现代血型鉴定技术快速发展，由血型鉴定而引发的输血事故已几乎杜绝，但是由于血型系统本身的不规则抗体导致的不良反却仍难以控制。近10年来的数据统计，临床输血中不规则抗体的检出率维持在为0.30%～2.00%，然而一旦出现未被筛查出的情况，多会导致迟发性输血反应，情况严重时甚至危及受血者生命安全。血型免疫抗体是引发输血不良反应（如溶血反应）的关键原因，所以必须确认患者体内存在不规则抗体[8]的可能性，这对于输血安全来说至关重要。

附表1 患者不规则抗体筛查结果[n(%)]

附表2 不规则抗体特异性鉴定结果[n(%)]

为提高配血的准确性，受血者多会在提前一天筛查体内的特异性不规则抗体。抗人球蛋白介质法和酶介质法是使用最多的两种配血方法，前者主要用于检测有输血史或流产史患者的血型抗体。而检测患者体内的Rh系统免疫性抗体则主要通过酶介质法，一般适用于有输血史和妊娠史的患者。在快速配血、排除血浆特异性蛋白干扰方面，抗人球蛋白介质法有着更大优势[9]。检测患者不规则抗体可以强化抗体特异性的发现，帮助患者匹配血型，有效降低输血后发生溶血反应的可能，提高了输血的安全性。

输血和妊娠是产生ABO血型系统以外的不规则抗体的主要原因，共有特点是引发溶血和红细胞致敏，导致血细胞在盐水介质不能中发生凝集。Rh系统的抗-E抗体，抗-DC抗体，抗-D抗体和抗-e抗体是ABO血型系统以外最主要的不规则抗体，包括MNS系统的抗-M抗体。在Rh抗原中，D抗原、DC抗原、e抗原的阳性率都高于E抗原[10]，所以抗-E抗体的检出率高于其他抗体。在低离子介质进入后，能够较好地实现介质离子强度的降低，促进抗体和红细胞发生相关反应[10][11][12]。作为阳离子聚合物，溶解后带有大量的正电荷，能够使得红细胞表面的负电荷得到中和，缓解唾液酸的作用，同时减少非特异性的凝集。酌情加入重悬液，红细胞会出现散开的景象，而假阳性发生率的减少正得益于非特异性凝集的缘故，使得假阳性的误检率大卫减少甚至避免[13]。输血后一周左右是免疫性抗体的效价高峰，也是发生溶血反应的高峰期，因抗体效价和溶血反应强度存在正相关关系，所以应对其加强临床重视。部分较少见的抗体，如抗-Lea抗体也能导致输血后溶血反应，所以输血前的检查力度不能松懈[14][15][16]。

总的来说，ABO血型系统以外的不规则抗体多出现在Rh系统和MNS系统中，输血或妊娠是其产生的重要诱发因素。不规则抗体检测在临床输血中检验效果是影响患者的重要因素，降低甚至避免发生溶血性输血反应的可能性，还可以帮助患者匹配血型，提高患者输血的安全性，可以进行临床推广。