轮状病毒性肠炎患儿体内免疫功能的变化及临床意义

宋恩杰

轮状病毒性肠炎患儿体内免疫功能的变化及临床意义

宋恩杰

目的 观察轮状病毒性肠炎患儿体内免疫功能的变化。方法 收集小儿轮状病毒腹泻患儿130例作为感染组，采集同期健康儿童血液标本30例作为对照组，采用放射免疫方法检测各组患儿血液中IgA、IgM及IgG的水平；采用流式细胞仪检测CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+比例的情况。结果 感染组患儿血清中的IgA及IgG水平明显低于健康对照组，结果差异具有统计学意义，IgM的水平则差异无统计学意义；感染组患儿外周血中CD3+、CD4+明显低于健康对照组，其中CD4+/CD8+比例倒置，与对照组相比差异有统计学意义；CD8+水平明显升高，与对照组相比差异有统计学意义。结论 轮状病毒性肠炎可以导致婴幼儿免疫功能紊乱，其中B细胞介导的体液免疫和T细胞介导的细胞免疫都参与机体免疫反应中。

轮状病毒性肠炎；B细胞；T细胞

轮状病毒性肠炎是儿科的常见病，其病原体为A组轮状病毒，多发于秋季故名婴儿秋季腹泻[1]。轮状病毒性肠炎发病的潜伏期较短，起病急，排便以黄色的水样便为主，呈蛋花样改变，无腥臭味，由于腹泻可导致大量体液流失，患儿常常出现脱水症状。轮状病毒性肠炎属于自限性疾病，即当疾病发展到一定阶段后可以逐渐好转，但也有累及到肠外器官如心脏、肝脏和肺脏而引起患儿死亡的报道[2-3]。由于轮状病毒性肠炎属病毒感染所致，因此淋巴细胞亚型分类的变化对于临床诊疗有着重要的作用。本研究在此基础上，通过观察淋巴细胞亚群在患儿体内变化特点，为临床诊断轮状病毒性肠炎和判断病情提供实验室诊断依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 观察2016-09—2017-01在辽阳市第三人民医院收治的腹泻患儿130例，经过A群轮状病毒检测试剂盒明确诊断为小儿轮状病毒肠炎。男79例，女51例，年龄为6～24个月，且所有患儿均为初次确诊为小儿轮状病毒腹泻。各组患儿的平均年龄、发热情况、呕吐次数、大便次数以及发病时间，差异均无统计学意义。排除由于呼吸道感染、消化不良性腹泻、急性肠炎、胃肠型感冒等可以引起发热、恶心、呕吐和腹泻等类似症状的其他疾病。采集我院同期健康儿童血液标本30例作为对照组。本研究经我院伦理学委员会批准，选择研究纳入群体均获得其儿童监护人的同意并签署知情同意书。

1.2 检测方法 早晨采集患儿的血液标本2 mL，经过EDTA抗凝处理后，离心后抽取白膜，使用破膜固定液将白细胞分离后，使用PBS将白细胞密度调整为5×106/mL细胞悬液，取出195 μL，并加入 5 μL FITC-CD3+、APC-CD4+、FITC-CD8+流 式 抗体，避光保存20 min后，采用流式细胞仪检测。同时取0.5 mL血液通过放射免疫法检测血清中的IgA、IgM及IgG的水平。

1.3 统计学分析 数据分析使用SPSS 19.0软件完成，符合正态分布的定量资料用均数±标准差表示，计量资料t检验。P＜0.05认为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患儿体内血清免疫球蛋白水平比较轮状病毒肠炎感染组患儿血清中的IgA及IgG水平明显低于健康对照组，差异具有统计学意义；IgM的水平则差异无统计学意义(表1)。

表1 两组患儿体内血清免疫球蛋白水平比较(±s)单位：g/L

表1 两组患儿体内血清免疫球蛋白水平比较(±s)单位：g/L

注：与对照组比较，*P＜0.05。

组别 例数 IgM IgA IgG感染组 130 1.91±0.34 9.16±0.67* 0.83±0.37*对照组 30 1.89±0.56 12.11±0.45 1.41±0.35

2.2 两组患儿外周血液T淋巴细胞亚群比较 轮状病毒肠炎感染组患儿外周血中CD3+、CD4+明显低于健康对照组，其中CD4+/CD8+比例倒置，与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05)；CD8+水平明显升高，与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05，表2)。

表2 两组患儿外周血液T淋巴细胞亚群比较(±s) 单位：%

表2 两组患儿外周血液T淋巴细胞亚群比较(±s) 单位：%

注：与对照组比较，*P＜0.05。

组别 例数 CD3+ CD4+ CD8+ CD4+/CD8+感染组 130 0.671±0.082* 0.235±0.056* 0.562±0.043* 0.66±0.12*对照组 30 0.783±0.059 0.492±0.054 0.315±0.073 1.73±0.32

作者单位：111010 辽阳市第三人民医院

3 讨论

婴幼儿由于免疫力低下容易诱发丙肝病毒、柯萨奇B病毒、风疹病毒、流行性腮腺炎病毒、轮状病毒和CMV等病毒感染[4]。在小儿的消化系统疾病中，以轮状病毒性肠炎最为常见。由于小儿的肠道黏膜和免疫系统功能尚未发育完全，轮状病毒可以直接附着在小肠的黏膜表面，其代谢产物直接影响到小肠的绒毛功能，葡萄糖无法有效的吸收，这样肠道黏膜上皮的渗透压发生改变，导致腹泻[5]。此外，严重的病例也可以累及到一些肠道以外的器官并引起相关疾病如病毒性心肌炎和病毒性肺炎、肝炎等，如未及时得到救治可引起患儿死亡[6]。目前对于小儿轮状病毒肠炎的诊断主要依靠A群轮状病毒检测试剂盒进行，该方法可以明确诊断疾病，但是对于评估患儿病情缺乏指导价值。因此，如何判断轮状病毒性肠炎患儿的病情，对判断病情的进展和临床制定治疗方案具有重要的价值。

机体的免疫系统在抵抗感染中起到重要作用，婴幼儿在4～6岁以前以淋巴细胞免疫为主，观察婴幼儿在感染过程中B细胞和T细胞的变化对于判断病情和指导治疗具有重要意义。B细胞介导的体液免疫是人体免疫系统的重要组成部分之一，IgA主要由黏膜上皮细胞分泌的免疫球蛋白组成，可以在黏膜上皮表面起到抗病毒的作用；IgG则是血清中含量最多的免疫球蛋白，主要参与机体的免疫反应[7]。从本研究中可以看出，IgA及IgG水平明显低于健康对照组，这说明轮状病毒在感染初期以细胞黏膜损伤为主，患儿体内的IgA分泌明显减少，同时大量的IgG也参与到机体免疫反应中，致使IgA及IgG明显下降。同时本研究观察了轮状病毒肠炎患儿体内的CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+比例的情况。其中CD3+CD4+和CD3+CD8+是两群重要的T淋巴细胞，一般的病毒感染将不同程度上将引起CD3+CD4+淋巴细胞数量降低，当出现全身性感染时CD3+CD4+亚群的这种变化幅度最为明显；当病情得到有效控制后，可以观察到CD3+CD4+细胞数量上的增加以并实现CD4+/CD8+的比值逐渐恢复[8-9]。CD8+的T淋巴细胞则在病毒感染过程中明显升高，这与其发挥细胞的杀伤作用有关。本研究显示在轮状病毒感染初期患儿外周血中CD3+、CD4+明显低于健康对照组，其中CD4+/CD8+比例倒置，且CD8+比例增高，轮状病毒性肠炎可以导致婴幼儿的免疫功能紊乱[10]。

综上所述，观察婴幼儿的淋巴细胞免疫的变化可以反映出机体的免疫功能，判断患儿的病情有诊断价值。如果在轮状病毒性腹泻治疗后淋巴细胞亚群的分类没有及时恢复，说明病情有可能加重，并可能进一步累及其他器官，因此需要临床密切观察，以减少发生潜在并发症的风险。

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2017-05-11)

1005-619X(2017)10-1089-02

10.13517/j.cnki.ccm.2017.10.035