间断化学分析仪法测定奶粉中硝酸盐含量

魏桂云

（福建省产品质量检验研究院，福建 福州 350002）

间断化学分析仪法测定奶粉中硝酸盐含量

魏桂云

（福建省产品质量检验研究院，福建 福州 350002）

文章建立了一种快速、批量测定奶粉中硝酸盐含量的检测方法。方法首先对奶粉样品进行沉淀蛋白质、除去脂肪处理，然后采用间断化学分析仪自动进样还原硝酸盐为亚硝酸盐，自动加显色剂进行显色比色测定。文章同时分析了方法的线性、准确性、精密度、加标回收率等参数，结果表明硝酸盐在0～2μg/mL的范围内该方法线性良好，回归方程：y=0.2252x-0.0009，相关系数r=0.9999，相对标准偏差RSD＜5%，加标回收率在89.0%～99.6%。方法简便快速、灵敏度高、准确性、重复性好。

间断化学分析仪法；奶粉检测；硝酸盐

硝酸盐广泛存在于自然界中，在硝酸盐还原酶作用下转化为亚硝酸盐，亚硝酸盐易与仲胺、酰胺反应，生成亚硝胺。 亚硝胺是致癌、致畸、致突变的物质，可严重危害人体健康[1-2]。

在国内，奶粉中硝酸盐的检测方法主要是采用分光光度法。硝酸盐先用镉柱还原成亚硝酸盐，然后测得亚硝酸盐总量，由亚硝酸盐总量减去样品亚硝酸盐含量，从而得到试样中硝酸盐含量[3]。人工操作镉柱还原法不仅需要自主填装镉柱，同时需保证不让空气进入，每次使用前都必须检查镉柱的还原效率，并对镉柱进行再生等操作，这些不但复杂繁琐，而且结果重现性差、还原过程还需专门人员监视。当样品批量大时需对镉柱进行多次的还原再生，耗时长；同时，镉不仅对实验操作人员具有潜在的危害，对环境也容易造成污染。采用间断化学分析仪法测定硝酸盐，可实现仪器自动进样还原硝酸盐，无需人工填装镉柱及经常进行镉柱活化再生，同时仪器自主进行样品还原、显色比色操作，无需人员看护[4-5]。且标准溶液选用硝酸盐，和样品一样进行镉柱还原、显色比色，最终直接得出样品溶液硝酸盐含量，这可很好地减少系统误差，提高检验结果的准确率。相比于国标法测定硝酸盐，本法检测所需溶液量少，可进行多次还原测定，不会出现样品过滤量太少现象；还可以进行大批量样品处理检测，大大提高检验效率。

1 材料与方法

1.1 原理

试样经过沉淀蛋白质、除去脂肪后，用仪器自动将硝酸盐还原成亚硝酸盐后进行显色反应。将所得硝酸盐含量减去样液中所含亚硝酸盐换算成硝酸盐的量，从两者的差值计算出硝酸盐含量。

1.2 仪器

间断化学分析仪，CLEVERCHEN 380，DECHEM-TECH；BT114S德国DeChem-Tech.GmbH；

电子分析天平（d=0.0001g），赛多利斯科学仪器（北京）有限公司。

1.3 试剂

亚铁氰化钾溶液(106g/L)、乙酸锌溶液(220g/L)、饱和硼砂溶液（50g/L）、咪唑缓冲溶液（3g咪唑加入50mL蒸馏水溶解，加水至250mL，加入2%硫酸铜溶液0.025mL，调节pH值至7.70，最后加水至300mL）、对氨基苯磺酸溶液(4g/L)、盐酸萘乙二胺溶液(2g/L)、硝酸根标准使用液(2μg/mL)。

1.4 样品处理

称取10g样品，置于150mL具塞锥形瓶中，加12.5mL50g/L饱和硼砂溶液，加入70℃左右的水约150mL，混匀，于沸水浴中加热15min，取出置冷水浴中冷却，并放置至室温。

定量转移上述提取液至200mL容量瓶中，加入5mL106g/L亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入5mL220g/L乙酸锌溶液，以沉淀蛋白质。加水至刻度，摇匀，放置30min，除去上层脂肪，上清液用滤纸过滤，弃去初滤液30mL，滤液备用，同时做空白试验。

1.5 仪器参数：

滤光片：550nm；

样液及试剂加入量：样液232μL；试剂R1（咪唑缓冲溶液）168μL；试剂R2（对氨基苯磺酸溶液）40μL；试剂R3（盐酸萘乙二胺溶液）20μL。

反应时间：试剂R1和样液混匀36s后加试剂R2，再反应36s后加入试剂R3，最后反应120s。

2 结果与讨论

2.1 样品前处理条件的选择及注意事项

2.1.1 实验过程使用的水最好是超纯水，且使用同一桶水，以避免不同实验用水本底不同造成实验结果偏差。

2.1.2 在入加亚铁氰化钾溶液后，要充分摇匀，稍候再加入乙酸锌溶液，且边加边摇，使蛋白质沉淀完全，否则滤液可能会出现浑浊。

2.1.3 对于蛋白质含量较高的样品可适当加大沉淀剂的用量，以使蛋白质沉淀完全，避免沉淀不完全，导致还原时对镉柱造成堵塞。

2.2 标准曲线及回归方程

2.3 精密度试验

取3份不同样品，每份样品重复测定六次，计算精密度，结果见表2。从表2可以看出，硝酸盐的变异系数小于5%，说明本方法的精密度较好。

表1 标准曲线及回归方程

表2 精密度验证（n=6）

表3 加标回收（n=6）

2.4 回收率试验

同一样品作本底，取高中低3个浓度加标后测定，测定6次，硝酸盐本底值为15.6mg/kg，计算回收率，结果见表3。从表3可以看出，硝酸盐的回收率为89.0%～99.6%。

3 结论

本文建立一种快速、批量测定奶粉中硝酸盐含量的检测方法，通过使用间断化学分析仪自动进样，还原样液、显色比色来进行样品硝酸盐含量分析。方法具有无需人工镉柱还原、可进行批量样品处理、简化试验操作步骤、节约试剂、节省分析时间、提高检验效率的优点，同时实验精密度、回收率均较为满意，可很好的应用于实际检测工作中。

[1]杭学宇,汪怡.镉柱还原法测定奶粉中硝酸盐和亚硝酸盐的含量[J].中国医药指南,2010,8(36)∶43-44.

[2]孙翠霞,张正尧,鹿尘.离子色谱仪法同时测定婴幼儿奶粉中的硝酸盐和亚硝酸盐[J].预防医学论坛,2010(04)∶0345-03.

[3]中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会.食品安全国家标准 食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定∶GB 5009.33-2016 [S].北京∶中国标准出版社,2016∶12.

[4]王智聪,冯炫,余笑波,等.离子色谱一电导检测法测定豆奶粉中的亚硝酸盐和硝酸盐含量[J].安徽农学通报,2015,21(22)∶110-112.

[5]周虹,钮伟民,宗荣芬,等.乳品中硝酸盐的离子色谱测定法[J].职业与健康,2003,19(11)∶47-49.

10.3969/j.issn.1007-550X.2017.09.003

TS252.7

A

1007-550X（2017）09-0043-03

2017-06-17

魏桂云（1986-），男，福建南平人，本科，主要从事食品检验工作。