肾病综合征患者外周血T细胞亚群及血清脂联素水平与患者激素治疗效果的关系

朱 磊， 解德琼， 张臣丽， 吴娅琳

(四川省宜宾市第二人民医院肾内科， 四川 宜宾 644000)

肾病综合征患者外周血T细胞亚群及血清脂联素水平与患者激素治疗效果的关系

朱 磊， 解德琼， 张臣丽， 吴娅琳

(四川省宜宾市第二人民医院肾内科， 四川 宜宾644000)

目的探讨原发性肾病综合征患者外周血中T细胞亚群(Treg)及血清脂联素(APN)水平与患者激素治疗效果的关系。方法选择2014年5月至2016年5月期间在我院诊断为原发性肾病综合征的80例患者作为研究对象，并以35例健康志愿者作为对照组,所有患者均检测Treg及APN水平，所有患者均采用激素标准方案治疗，探讨血清中T细胞亚群及血清中脂联合素水平与患者激素治疗效果及预后的关系。结果观察组外周血中Treg细胞百分比为4.25±1.32，低于对照组，APN、T辅助细胞17(Th17)、Th17/Treg细胞含量分别为33.6±12.5、1.63±0.26、0.51±0.07，高于对照组患者，差异具有统计学意义(P<0.05)；以Treg细胞百分比中位数分为低水平组和高水平组，结果低水平组患者38例、高水平组患者42例，低和高水平组患者激素治疗敏感分别为19例(50%)和26例(61.90%)；以血清中APN中位数分为低水平组和高水平组，结果低水平组患者39例，高水平组患者41例，低和高水平组患者激素治疗敏感分别为19例(48.7%)和26例(63.41%)，这两组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论肾病综合征患者血清中Treg细胞含量和脂联素水平与激素治疗效果密切相关。

肾病综合征； Treg； 脂联素； 激 素； 效 果

原发性肾病综合征是原发性肾小球疾病最常见的临床综合征之一，临床表现为大量蛋白尿、高度水肿、高血脂、低白蛋白血症[1,2]。原发性肾病综合征的初治以激素为主，但是不同患者对激素的敏感性不一，导致激素敏感性不同的原因与患者炎症状态和免疫功能状态密切相关[3,4]。T细胞亚群是反应机体免疫功能状态的主要临床指标之一，脂联素是反应机体炎症指标的重要指针[5]。本研究通过分析我院80例原发性肾病综合征患者的临床资料，探讨原发性肾病综合征患者血清中T细胞亚群和脂联素与患者治疗敏感性，现报道如下：

1 资料与方法

1.1一般资料:选择2014年5月至2016年5月期间在我院诊断为原发性肾病综合征的80例患者作为研究对象，纳入标准：①所有患者均经肾脏病理活检证实为原发性肾病综合征，排除继发性肾病综合征；②依从性好，同意进行本研究的。排除标准：①存在糖尿病、甲状腺疾病疾病、免疫系统疾病；②精神异常患者；③合并过敏性紫癜、系统性红斑狼疮、病毒性肝炎等可能诱发继发性肾病综合征的患者；④在肾穿刺活检前1个月内接受了激素或免疫抑制剂治疗的患者。以同期35例健康体检人群为对照组，并且对照组所有被检人群均签署知情同意书。观察组患者男38例、女42例，平均年龄(28.6±6.5)岁，BMI(22.8±3.2)；对照组患者，男18例，女17例，平均年龄(29.8±5.9)岁，BMI(22.8±3.3)，两组患者人口学资料对比差异无统计学意义，具有可比性。本研究经我院伦理委员会批准。

1.2治疗方法

1.2.1治疗方法:所有患者均根据王海燕第七版《肾脏病学》中激素的使用方法，給予1mg/kg泼尼松龙，給予足疗程使用。

1.2.2外周血中T细胞亚群和脂联素水平检测：收集患者空腹外周静脉血，用active motif公司的试剂盒按说明书提取外周血单个核细胞(PBMCs)，得到PBMCs后PBS重悬细胞，取20ul细胞悬液，调节细胞浓度，按照流式细胞检测说明书加入相流式细胞仪抗体后，按照说明书进行相关操作，流式细胞仪上检测细胞Treg细胞和Th17细胞含量，Treg细胞采用Foxp3 Alexa Fluor488/CD25PE/CD4 PerCP，Th17细胞采用抗人IL-17Alexa Fluor647/CD3 FITC/CD4PE，两种抗体均购于上海百赛生物科技有限公司；血清脂联素水平检测：收集患者的外周静脉血10mL，离心得到血清后按照酶联免疫吸附试剂盒的说明书进行，在美国biotek酶标仪上点样、抗体孵育以及吸光值检测，绘制吸光值-标准品浓度的曲线后，将待测样本的吸光值代入曲线并计算APN。APN试剂盒均购于欣博盛生物科技有限公司，检测方法严格参照试剂盒说明书进行。

1.2.3临床疗效评价:根据王海燕第7版《肾脏病学》中规定的激素治疗效果分为激素敏感、激素依赖、激素抵抗。

2 结 果

2.1两组血清中脂联素和外周血T细胞亚群结构比较:观察组外周血中Treg细胞含量低于对照组，APN、Th17、Th17/Treg细胞高于对照组患者，差异具有统计学意义(P<0.05)。见表1

表1 两组血清中脂联素和T细胞亚群结构比较

2.2血清中T细胞亚群与患者激素治疗效果的关系：以Treg细胞百分比中位数分为低水平组和高水平组，结果低水平组患者38例、高水平组患者42例，低水平组患者激素治疗敏感为19例，占50.00%，而高水平组患者26例，占61.90%，差异不具有统计学意义(χ2=1.149，P>0.05)。见表2

表2 血清中T细胞亚群与患者激素治疗效果的关系

2.3血清中脂联素水平与患者激素治疗效果的关系：以血清中APN中位数分为低水平组和高水平组，结果低水平组患者39例、高水平组患者41例，低水平组患者激素治疗敏感为19例，占48.72%，高水平组患者激素治疗敏感为26例，占63.41%，差异不具有统计学意义(χ2=1.60，P>0.05)。见表3

表3 血清中脂联素水平与患者激素治疗效果的关系

3 讨 论

原发性肾病综合症是肾脏病常见的临床表现形式，原发性肾病综合征的病理形式多种，可以是微小病变型肾病、系膜增生性肾小球肾炎、膜性肾病等，虽然不同病理类型对激素治疗的敏感性不同，但是同一种病理类型对激素敏感性也不同，导致肾病综合征患者对激素治疗效果不同的原因非常复杂。血清中免疫细胞含量及炎症状态是影响患者激素效果的主要原因之一。本研究中纳入的80例患者作为研究对象，本研究结果提示，80例患者最终激素敏感45例，激素依赖22例，激素抵抗各13例，激素敏感率为56.25%。

T细胞亚群结构是反应机体免疫机能的重要指标之一[6,7]。本研究探讨了肾病综合征患者血清中Treg细胞含量变化与激素敏感性的关系，结果现示肾病综合征患者Treg细胞含量明显低于健康对照组患者。相关研究结果提示肾病综合征患者Treg细胞含量变化与患者病情之间存在潜在联系，免疫炎症活化是肾病综合征的主要病理生理机制，而Treg细胞具有负向调控免疫炎症反应的作用，有助于抑制免疫炎症反应的形成，而且Treg细胞可以抑制Th17细胞，而Th17细胞在炎症损伤中有促进炎症因子活化，诱导炎症瀑布形成的作用[8]。但我们根据肾病综合征患者Treg细胞含量中位数分为高水平组和低水平组，结果发现Treg细胞高水平组患者激素敏感性与低水平组患者之间比较，差异不具有统计学意义。

脂联素(APN)是脂肪组织特异性分泌的一种激素，参与糖类和脂肪的代谢，近年来APN被证实参与胰岛素抵抗的病理过程，具有强大的抗炎作用，能抑制炎症反应程度，而且血清中APN参与肾病综合征患者高脂血症的病理生理过程[9]。我们对比肾病综合征患者血清中APN与健康患者APN的量，发现肾病综合征患者血清中APN高于健康患者，进一步根据APN中位数分为高水平组和低水平组探讨激素敏感性发现，高水平组APN患者激素敏感性与低水平组比较差异不具有统计学意义，这可能由于高水平的APN反应机体对炎症刺激反应敏感，机体参与炎症刺激更明显。

综上所述，我们研究结果提示，肾病综合征是肾小球肾炎常见的临床综合征，肾病综合征初治多采用激素，即使相同病理类型的患者可能对激素的敏感性也不同，肾病综合征患者外周血中Treg细胞含量低于正常人群，而APN水平高于健康人群，本研究结果发现外周血中Treg细胞含量和脂联素水平与激素治疗效果密切相关，值得临床关注。

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TheRelationshipbetweenPeripheralBloodTLymphocyteSubsetsSerumAdiponectinLevelsandtheEffectofHormoneTherapyinPatientswithNephroticSyndrome

ZHULei,XIEDeqiong,ZHANGChengli,etal

(TheSecondPeople'sHospitalofYibin,SichuanYibin644000,China)

Objective:To investigate the relationship between peripheral blood T lymphocyte subsets(Treg), serum adiponectin (APN) levels and the effect of hormone therapy in patients with nephrotic syndrome.Methods80 cases of primary nephrotic syndrome patients were selected during May 2014 to May 2016 in our hospital.35 healthy volunteers as control group, all patients were detected in the serum adiponectin level in patients with T cell subsets and serum in all patients using standard hormone treatment, serum T cell subsets and serum lipid in the association between hormone levels and treatment effect and prognosis of patients with hormone.ResultsThe levels of peripheral blood Treg cells in patients of the observation group was 4.25±1.32,which significantly lower than that in patients of the control group; The levels of APN, T helper cell 17 (Th17) and the ratio of Th17/Treg cells were 33.6±12.5 mg/L, 1.63± 0.26, 0.51 ± 0.07, which significantly higher than that in the control group (P<0.05). Patients were divided into low and high levels of hormone-sensitive therapy based on the numbers of Treg cells, and the results showed 38 cases of patients in the low-level group and 42 cases in high level group. Of them, 19 cases (50%) and 26 cases (61.90%) in the low-level and high-level groups respectively, were sensitive to hormone therapy. Patients were divided into low-level and high-level groups based on the median of serum APN and the results showed 39 and 41 cases of patients that sensitive to hormone therapy. Of them, 19 cases (48.70%) and 26 cases (63.41%) in the low-level and high-level groups respectively, were sensitive to hormone therapy. The difference was not statistically significant, P>0.05.ConclusionThe number of Treg cells and serum adiponectin levels were closely related to the effect of hormone therapy.

Nephrotic syndrome; Treg; Adiponectin; Hormone; Effect

A

10.3969/j.issn.1006-6233.2017.10.018

1006-6233(2017)10-1646-04

四川省卫生厅基金资助项目,(编号：SC081920)