开封地区儿童急性呼吸道感染病原体检测结果分析

翟凯齐 张丽娜 李茉莉 乔克

开封地区儿童急性呼吸道感染病原体检测结果分析

翟凯齐1张丽娜2李茉莉3乔克4

目的回顾性分析开封地区儿童呼吸道病毒感染常见病原学数据，为临床诊疗提供实验室依据。方法收集2016年1-12月开封市儿童医院12755例急性呼吸道感染患儿血清标本，采用免疫斑点试验检测患儿血清中6种常见呼吸道病原体早期特异性抗体IgM：肺炎衣原体(CP)、肺炎支原体(MP)、呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、流感病毒(IV)、副流感病毒(PIV)。对病例阳性标本进行统计分析，比较不同年龄组、性别、季节、等感染情况的差异。结果12755例患儿标本中有3636例阳性，阳性率为28.51%。6种呼吸道病原体的阳性率依次为：MP 15.03%、ADV 11.13%、IV 7.76%、RSV 3.03%、CP 1.24%、PIV 0.4%;呼吸道病原体检出率春、夏季节相对较高； 4-6岁组阳性率最高，<1岁组感染率最低。结论该地区儿童呼吸道感染常见病原体以MP及ADV为主，其次是IV，其感染有季节、性别、年龄差异性；病毒混合感染中以MP混合感染为主。

呼吸道感染； 病毒； 检测； 临床分析

急性呼吸道感染(ARI)是儿科常见疾病，其病原谱中病毒感染占较大的比重。为了解开封地区病毒所致的儿童ARI的病原学分布情况，采用免疫斑点试验对开封市儿童医院12755例住院患儿6种常见呼吸道病毒早期特异性抗体IgM检测，分析6种常见呼吸道病毒病原学构成及性别、季节、年龄组分布差异性。

资料与方法

一、 一般资料

选择2016年1-12月开封市儿童医院12755例ARI的患儿血清标本为研究对象，入组患儿诊断符合《诸福堂实用儿科学》第7版ARI标准。其中男8005例，女4750例；年龄0-12岁，其中<1岁5242例、1-3岁5244例、4-6岁1526例、>6岁743例；春季3140例、夏季2894例、秋季2572例、冬季4149例。

二、方法

1 标本采集：所有患儿均于入院后次日清晨空腹采集静脉血1-2 mL，送检至检验科，3 000转/min离心15min分离患儿血清待测。

2 检测方法：取出芯片和试剂， 置室温(25±1℃)下放置30分钟后，平衡置室温待用；根据样本量，取洁净小管按照10：1配置足量底物混合液；取待测血清100μL,加稀释液200μL充分混匀；取洗涤液4滴加于检测窗口膜面上，均匀润湿膜面；取处理后的待测血清混合液200μL，加于检测窗口膜面上；待血清样本渗透后，取洗涤液6滴，加于检测窗口膜面上，取酶结合物4滴，加于检测窗口膜面上；待酶结合物渗入后，取洗涤液6滴，加于检测窗口膜面上；取配制好的底物混合液300μL，加于检测窗口膜面上，芯片在25分钟后放入XK2100生物芯片阅读仪进行分析，整个过程在室温(25±1℃)环境中进行，2小时完成检测分析。

3 结果判读：样本检测值<0.95倍临界值，则该抗体检测结果为阴性；样本检测值>1.05倍临界值时，则该项结果为阳性；检测值介于0.95-1.05倍临界值，该结果为可疑，需结合临床症状分析判定。芯室质控点显色时实验有效。以上设备及试剂均购自中国江苏泰州欣康基因数码科技有限公司。

三、统计学处理

患儿检测结果使用2007版Microsoft Office Excel软件收集整理，应用SPSS20.0软件进行统计学分析，计数资料以率表示，组间比较采用χ2检验，取P<0.05 有统计学差异。

结 果

一、12755例患儿血清学标本共3636例阳性，阳性率为28.51%。6种呼吸道病原体的单项阳性率依次为：MP 15.03%、ADV 11.13%、IV 7.76%、RSV 3.03%、CP 1.24%、PIV 0.4%;单项病原学阳性率数据(见表1)；两种及两种以上混合感染1272例，占阳性标本34.98%，混合感染中前三位病原体依次为ADV+IV 390例，MP+ADV 349例，MP+IV 300例。

二、呼吸道病原体感染情况与季节、月份关系

儿童呼吸道病原体在不同季节检出率差异有统计学意义(χ2=297.037，P=0.000)。全年之中春、夏两季为儿童呼吸道病毒高发阶段，病原体检出率最高(62.10%、40.64%)，秋、冬季病原学检出率较低(32.32%，17.69%)。其中MP全年感染率夏季最高，ADV及IV在春季节检出率较高，分别为(23.50%,15.73%),RSV、CP、PIV全年呈现低水平散发趋势；由(表3)可以看出病原体检出多集中于在3-7月，该地区患儿呼吸道病原体以MP、ADV、IV感染为主，其中MP全年各月份检出率较高，ADV、IV感染主要集中于1-6月份。

表1 儿童急性呼吸道感染病原体(单项)阳性率及构成比[n(%)]

注：单项病原学阳性总数含1272例混合感染

表2 儿童急性呼吸道感染病原体分布与季节关系[n(%)]

表3 病原体阳性标本各月份分布情况

三、儿童呼吸道病原体感染情况与性别关系

在8005例男性患儿呼吸道病原体感染的阳性率为37.68%，女性为40.13%，差异有统计学意(χ2=6.965，P=0.008)，女性患儿感染率稍高于男性患儿。(见表4)。

表4 儿童呼吸道病原体感染情况与性别的关系[n(%)]

四、呼吸道病原体感染情况与年龄的关系

患儿<1岁、1-3岁、4-6岁、> 6岁4个年龄组，呼吸道病原体的检出率分别为,15.07、47.67、72.35、71.07 ，差异有统计学意义(χ2=15.368，P=0.002)。4-6岁儿童呼吸道病原体感染率最高，<1岁组感染率最低，(见表5)。

表5 儿童呼吸道病原体感染情况与患儿年龄关系[n(%)]

讨 论

AIR是儿科临床常见疾病，也是儿童最为常见的感染性疾病之一，严重威胁儿童生命健康[1-2]，肺炎衣原体(CP)、肺炎支原体(MP)、呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、流感病毒(IV)、副流感病毒(PIV)为儿童AIR常见感染因素，本研究显示该地区呼吸道病毒总阳性率为28.51%，高于湖北地区13.29%[3]，浙江地区21.75%[4]，与无锡地区感染率相接近31.16[5],低于四川53.3%[6]及广州80.25%[7]，考虑可能与本研究未涵盖地域因素、气候因素、人群易感因素、检测方法学因素有关 ，此外也可能与未覆盖近年研究较多的偏肺病毒(HMPV)、鼻病毒、柯萨奇病毒等各类相关病原有关。不同地区气温、水文、季节性、性别的差异性造成了各地区儿童呼吸道病毒病原谱的多样性，不同感染因素又导致AIR临床症状和特点不同，因此分析AIR该地区常见病原体分布情况有助于临床提高诊疗效果，进一步减少病毒性ARI患儿治疗过程中抗生素滥用问题。

本次研究显示，该地区常见AIR的病毒性感染因素为MP、ADV，这与王生清[8]研究近似，考虑可能与两地区相近的气候条件所致；且AIR混合性感染在儿童阶段并不少见，占所有阳性病例的34.98%，国内文献报道亦印证了该项结论。目前，虽然上呼吸道感染病原体的检测方法较多，有培养分离法、特异性抗原、抗体检测及聚合酶链反应(PCR)等，培养分离方法虽是诊断的金标准，但考虑其操作程序复杂，培养时间长，技术条件要求高，检测成本较高，在临床上推广相对困难，亦不适用于一般实验室的检测要求；免疫斑点试验方法具有准确性高、速度快、特异性强的优点[9]可以为临床初步诊断提供呼吸道病毒检测依据。

ARI病毒性感染一年四季均可发病，本次结果显示不同季节呼吸道病原体检出率有统计学差异。春、夏两季为儿童呼吸道病毒高发阶段，病原体检出率最高，秋、冬季病原学检出率较低，主要病原体中，MP在夏季检出率最高(18.94%)，且一年之中处于较高的检出率(12.09%-18.94%)，说明该地区呼吸道病原体构成中以MP感染为主，与章国平[10]报道一致；ADV及IV 在春季检出率最高(23.50%、15.73%)，夏、秋、冬检出率较低(2.29%-9.99%、1.4%-8.53%)，说明此两项病毒检出存在更为明显的季节差异性；RSV、CP、PIV在一年之中感染率相对较低，呈现一年之中相对低发的表现；因此可以看出，呼吸道病毒感染与季节密切相关，一方面是由于各种病原体所特有的生物学特性不同，另一方面由于各地区环境、气候条件、温湿度等不同，而导致的感染率差异[11]。

本研究中12755例患儿，男性8005例和女性4750例，其呼吸道病毒的检出率分别为37.68%，女性为40.13%，且女性患儿感染率稍高于男性患儿，结果与以往研究不同[12-13],考虑与本次研究中男性患儿多在低年龄组且病毒感染率较低所致；本研究将患儿按年龄为<1岁、1-3岁、4-6岁、>6岁四个组别，各年龄组的病原体检出率分别为15.07%、47.67%、72.35%、71.07%，且统计分析显示病毒病原体分布有统计学差异(P<0.05)。四组之中，4-6岁年龄组感染率最高，<1岁感染率最低，且MP及ADV在4-6岁感染率最高，与相关报道一致[14-15]。

综上所述，本研究结果显示：MP、ADV、IV 是该地区儿童呼吸道感染最为常见病原体；不同年龄组、性别、季节性对于病原体类型的检出存在差异，女性患儿检出率稍高于男性；提示在呼吸道感染高发的春、夏两季应做好疾病的预防工作，可以有效减低儿童呼吸道病毒性感染的发生。最后，临床ARI患儿治疗时，应考虑患儿病原学流行病学差异性，适时调整治疗方案，合理使用治疗药物，缩短治疗周期，保障儿童生命健康。

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AnalysisofpathogendetectionresultsofchildrenwithacuterespiratoryvirusinfectioninKaifengarea

ZHAIKai-qi,ZHANGLi-na,LIMo-li,QIAOKe

KaifengChildren’sHospital,Kaifeng,Henan475000,China

ObjectiveTo retrospectively analyze the common pathogen data of respiratory virus infection in children in Kaifeng area, and to provide laboratory basis for clinical diagnosis and treatment.MethodsA total of 12755 children with acute respiratory tract infection were enrolled in Kaifeng Children's Hospital from January to December in 2016. Immunoassay test was used to detect the early specific antibody IgM: Chlamydia pneumoniae (CP), Mycoplasma pneumoniae (MP), respiratory syncytial virus (RSV), adenovirus (ADV), influenza virus (IV), and parainfluenza virus (PIV). The positive samples were statistically analyzed, and their age, sex, season, and other differences were compared.ResultsOf the 12755 children, 3636 were positive, and the positive rate was 28.51%. The positive rates of six respiratory pathogens were: MP 15.03%, ADV 11.13%, IV 7.76%, RSV 3.03%, CP 1.24% and PIV 0.4% respectively. The detection rate of respiratory pathogens was relatively high in spring and summer. Children younger than 1 year old had the lowest positive rate, and children aging from 4 to 6 had the highest rate.ConclusionThe common pathogens of respiratory tract infection in children in this region are predominantly MP and ADV, followed by IV. The infection is different in different season, sex and age. The mixed infection of the virus is dominated by MP infection.

respiratory tract infection; virus; detection; clinical analysis

2017-03-06]

10.3969/j.issn.1009-6663.2017.11.011

1. 475000 河南 开封，开封市儿童医院检验科 2. 475002 河南 开封，开封市第二人民医院病理科 3. 475000 河南 开封，开封市中心医院检验科 4. 475000 河南 开封，开封市中心医院输血科