解脲支原体和HR-HPV感染与宫颈病变的相关性研究

钟汇 徐两蒲 邱华红 毛晓丹 孙蓬明

解脲支原体和HR-HPV感染与宫颈病变的相关性研究

钟汇1徐两蒲1邱华红1毛晓丹2孙蓬明2

目的了解宫颈上皮内瘤变（CIN）和宫颈癌患者宫颈分泌物解脲支原体（UU）感染情况，探讨UU、HR-HPV与宫颈病变的相关性。方法选取2012年1月—2016年1月福建省妇幼保健院因宫颈癌或CIN住院的患者400例设为病例组，随即抽取同期年龄匹配因良性疾病住院患者458例为对照组，采用液体培养法检测UU感染情况以及PCR-反向点杂交技术进行HPV基因分型。结果HR-HPV在病例组和对照组中感染率分别为88．5%和19．9%，病例组HR-HPV感染率高于对照组，差异有统计学意义（P＜0．05）；UU在病例组和对照组中感染率分别为29．0%和9．2%，病例组UU感染率高于对照组，差异有统计学意义（P＜0．05）；以HR-HPV不同的感染状态进行分组，在HR-HPV阳性组中，病例组中UU感染率与对照组比较差异有统计学意义（P＜0．05）；HR-HPV阴性组中，病例组中UU感染率与对照组比较差异无统计学意义（P＞0．05）。结论UU对HR-HPV导致的宫颈病变存在协同作用。

高危型人乳头瘤病毒；解脲支原体；宫颈病变

宫颈癌是危害世界妇女健康和生命的生殖道恶性肿瘤之一，据报道，每年全球新增病例达47万多人，其中我国占28.7%[1]，从宫颈上皮内瘤变（CIN）开始到宫颈癌过程经过几年甚至十几年，现已明确高危型人乳头状病毒（HR-HPV）的感染是宫颈癌发生的主要危险因素，大部分女性在感染病毒数月后能够自行清除，仅有小部分妇女感染HR-HPV进而导致宫颈病变[2]，这可能因其中存在其他病原体感染提高HPV易感性使其持续反复感染，进而发生癌变。

解脲支原体是寄生于女性泌尿生殖道较为常见的一种条件致病性微生物，是引起女性非淋菌性尿道炎、盆腔炎的主要病原体。有研究表明[3]，支原体感染可能与CIN的发生有关，但UU是HR-HPV导致CIN/宫颈癌的辅助因素还是一个独立因素，需要进一步探讨，故本文将我院住院收治的经病理确诊的400例宫颈癌/CIN患者设为病例组，另挑选458例年龄匹配良性疾病患者为对照组，对其HR-HPV和UU的感染情况进行回顾性分析和探讨，结果如下。

1 资料和方法

1.1 研究对象

选取我院2012年1月—2016年1月入院收治经病理确诊的400例CIN/宫颈癌患者为病例组，年龄22～68岁，平均年龄（46.5±10.8）岁，将其分为宫颈癌（180例）、CINIII（90例）、CINII（70例）、CINI（60例）四个亚组；另选同期458例与病例组年龄匹配的妇科良性疾病患者为对照组，年龄24～65岁，平均（45.5±12.5）岁。所有患者详细登记临床资料，白带常规检查排除滴虫、念珠菌、细菌性阴道病及淋球菌，取标本前3天未进行任何阴道灌药清洗等，1周未用过抗生素。

1.2 研究方法与试剂

1.2.1 标本采集 由专业妇科医生用窥阴器暴露宫颈，用干棉球擦去阴道或宫颈口过多分泌物，用无菌长棉拭子插入宫颈管内，缓慢旋转3圈采集宫颈分泌物后取出，用于UU培养；另再用宫颈细胞收集专用宫颈刷插入宫颈口，顺时针旋转3～5圈，收集宫颈脱落上皮细胞，放入专用试管中保存用于HRHPV检测。

1.2.2 UU检测 采用培养基试剂盒，选择性液体肉汤培养法，通过肉汤颜色变化判读结果，以＞1 000颜色变化单位（CCU）/ml表示阳性。所用试剂来自法国梅里埃公司。

1.2.3 HPV基因分型检测 采用深圳亚能生物技术有限公司提供的HPV PCR-反向点杂交基因分型检测试剂盒，经过HPV提取、PCR扩增、杂交、洗膜、显色等过程。

1.3 统计学方法

采用SPSS 16.0统计软件进行分析，计数资料采用χ2检验，P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 病例组和对照组HR-HPV、UU的感染率

病例组HR-HPV的感染率为88.5%，对照组HR-HPV的感染率为19.9%，病例组HR-HPV感染率高于对照组，差异有统计学意义（χ2=402.850，P=0.000）。其中病例组分为宫颈癌、CINIII、CINII、CINI组四个亚组，感染率分别为97.2%、90.0%、81.4%、68.3%，均高于对照组，差异均有统计 学 意 义（χ2=318.047，P=0.000；χ2=171.788，P=0.000；χ2=114.063，P=0.000；χ2=65.619，P=0.000），HR-HPV的感染率随着宫颈病变级别的增加而升高（P＜0.001），见表1。

病例组UU的感染率为29.0%，高于对照组的9.2%，差异有统计学意义（χ2=55.884，P=0.000）。其中病例组分为宫颈癌、CINIII、CINII、CINI组四个亚组、UU感染率分别为30.6%、31.1%、28.6%、21.7%，均高于对照组，差异有统计学意义（χ2=45.837，P=0.000；χ2=32.499，P=0.000；χ2=22.053，P=0.000；χ2=8.729，P=0.006），而四个亚组组间UU感染率差异无统计学意义（χ2=1.980，P＞0.05），见表1。

2.2 UU感染在不同HR-HPV感染情况中与宫颈病变发生的关系

以HR-HPV感染状态的不同进行分层，HR-HPV阳性组中，病例组UU感染率与对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；HR-HPV阴性组中，病例组UU感染率与对照组比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表2。

3 讨论

宫颈癌是女性生殖道发病率最高的恶性肿瘤，随着流行病学的深入研究，人们认识到从CIN到宫颈癌的发生进展是漫长、多因素共同作用的结果。而HR-HPV感染是宫颈癌发生的主要原因，而本文结果提示，病例组HR-HPV的感染率为88.5%，高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。且HR-HPV的感染率随着宫颈病变级别的增加而逐渐升高（P＜0.001），再次证明了HR-HPV感染与宫颈病变的关系。然而HPV感染很普遍，但只有5%～10%感染者演变为HR-HPV的持续感染状态进而导致CIN/宫颈癌，这其中可能有其他原因参与其中，比如个人的免疫状态以及其他感染因素为宫颈病变的共刺激因子。

支原体是大小介于细菌和病毒之间，能够通过除菌滤器，无细胞壁的原核细胞生物。支原体属中最常见为UU，在40%～80%正常性成熟女性生殖道中均可分离出UU[4]，其生物合成能力差，大多数寄生在女性宫颈上皮细胞内。Lukic[5]等研究发现238例CIN患者中UU感染率随着宫颈病变级别增加而增高。也有学者持反对意见，陈曦曦[6]研究发现310例CIN患者及274例正常女性的UU感染率差异无统计学意义，且CINI、CINII、CINIII各组与对照组相比，差异也均无统计学意义（P＞0.05）。而本文中病例组UU的感染率为29.0%，对照组UU的感染率为9.2%，病例组UU感染率高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.001），病例组包括宫颈癌、CINIII、CINII、CINI四个亚组，UU感染率分别为30.6%、31.1%、28.6%、21.7%，均高于对照组，差异有统计学意义，提示UU感染可能与宫颈病变有关，与陈曦曦[6]结果不一致，而病例组四组组间UU感染率差异无统计学意义，结果提示UU感染与宫颈病变级别的进展程度无关，这些差异可能原因为：（1）标本差异，病例组亚组组成例数不同；（2）方法不同，本文采用常规培养法。

表1 病例组与对照组HR-HPV和UU感染率对比

表2 不同HR-HPV感染情况中UU与宫颈病变的关系

目前有研究报道支原体能够引起机体慢性炎症并促进肿瘤发生[7]，UU能侵入细胞表面，黏附于宫颈上皮细胞的表面受体，这种黏附特性容易造成持续感染，感染后不容易被清除，进而激活人体免疫系统产生炎症介质等致病。是由于UU感染引起宫颈慢性炎症直接诱发宫颈病变还是UU与HR-HPV相互作用提高宫颈病变风险，本文进一步以不同的HR-HPV感染情况进行分层，在HR-HPV阳性组中，病例组UU感染率与对照组比较，差异有统计学意义（P＜0.05），而HR-HPV阴性组中，病例组与对照组UU感染率比较，差异无统计学意义（P＞0.05），结果提示UU感染在HR-HPV阴性并不能增加宫颈癌变的风险，由此可以推断UU感染在HR-HPV导致宫颈癌变过程中有协同作用，推测原因可能为[8-9]：UU会特异性寄生于妇女宫颈柱状上皮细胞，能够躲避机体的免疫防御，造成慢性持续感染，产生各种炎症因子，提高HR-HPV的易感性，易造成HR-HPV的重复持续感染，导致细胞发生周期失控，进而发生一系列改变。而具体机制有待进一步研究。

总之，HR-HPV感染是宫颈病变的发生进展主要原因，但并不是单一原因，UU可辅助HR-HPV导致宫颈癌变发生。因此临床在早癌筛查中，检测HR-HPV的同时，应该注意UU的常规检测，早发现、早治疗。

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Study on the Correlation Between Ureaplasma Urealyticum and HRHPV in Cervical Lesion

ZHONG Hui1XU Liangpu1QIU Huahong1MAO Xiaodan2SUN Pengming21 Laboratory Department, Health Center for Women and Children of Fujian Province, Fuzhou Fujian 350001, China; 2 Gynecology Tumour Laboratory

ObjectiveTo explore the infection of UU in patients with CIN and cervical cancer, also the relationship of infection of UU, HRHPV genotype and cervical lesion.MethodsFour hundreds patients in Fujian Maternal and Children Hospital with CIN or cervical cancer were selected to be case group from January 2011 to January 2016.Control group was matched for age, including 458 cases of patients with gynecological benign diseases treatment. All cases were taken cervical exfoliated cells for HPV genotyping detection by means of PCR-reverse dot hybridization technique and also UU detection by means of liquid culture method.ResultsCompared infection rates of HR-HPV and UU between case and control group, the infection rates of case group (88.5%, 29.0%) were higher than the control group(19.9%, 9.2%), the difference had statistical significance (P＜ 0.05).When HR-HPV was positive, the infection rate of UU was significant different between the case group and the control group(P＜ 0.05). When HR-HPV was negative, the infection rate of UU had no statistically significant difference between the case group and the control group(P＞ 0.05).ConclusionThere may be interaction between UU and infection of HR-HPV to cause cervical lesion.

high-risk human papillomavirus; ureaplasma urealyticum;cervical lesion

R446

A

1674-9316（2017）20-0122-03

10．3969/j．issn．1674-9316．2017．20．064

1 福建省妇幼保健院检验科，福建 福州350001；2 妇科肿瘤实验室

孙蓬明