冠心病患者尿miR-126表达变化

李霞，孙景芝，李祥廷，金鑫

冠心病患者尿miR-126表达变化

李霞1，孙景芝1，李祥廷1，金鑫1

目的分析冠状动脉粥样硬化性心脏病（冠心病）患者尿微小RNA-126（miR-126）表达情况及意义。方法选取2015年8月～2016年8月于济宁医学院附属医院治疗的冠心病患者109例，其中男性70例，女性39例，平均年龄（58.12±10.03）岁。其中急性心肌梗死（AMI）35例，不稳定型心绞痛（UAP）40例和稳定型心绞痛（SAP）34例。同时选取健康志愿者50例作为对照组。检测各组总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、C反应蛋白（CRP）以及尿miR-126水平等。结果AMI组、UAP组和SAP组尿miR-126表达明显低于对照组，差异有统计学意义（P均＜0.05）；AMI组、UAP组和SAP组Gensini评分比较差异无统计学意义（P均＞0.05）。冠心病患者尿miR-126表达水平与Gensini评分呈负相关（r=-0.301，P＜0.05），与HDL-C、CRP、TG、TC等无相关性（P均＞0.05）。结论冠心病患者尿miR-126表达降低，与冠状动脉血管病变情况呈负相关，值得深入研究。

冠心病；微小RNA-126；尿液

冠状动脉粥样硬化性心脏病（冠心病）是临床上较为常见的心血管疾病，相关研究显示急性心肌梗死（AMI）、不稳定型心绞痛（UAP）及稳定型心绞痛（SAP）等心血管疾病的发病率均呈现逐年上升的趋势[1]。临床上主要采用冠状动脉造影评估血管病变程度，但属有创检查、重复性测量难度大。微小RNA-126（miR-126）可通过损伤冠状动脉内皮，促进单核细胞或者巨噬细胞等浸润，进而加速病情的进展[2-4]。本研究探讨了冠心病患者尿液中miR-126的表达情况，分析其与Gensini评分的关系。

1 资料与方法

1.1 研究对象和分组选取2015年8月～2016年8月于济宁医学院附属医院治疗的冠心病患者109例，其中男性70例，女性39例；年龄42～78岁，平均年龄（58.12±10.03）岁；其中AMI 35例，VAP 40例和SAP 34例。同时选取健康志愿者50例作为对照组。纳入标准：①均在我院行冠状动脉造影术；②冠心病诊断参照中华医学会制定的标准[5]；③患者及家属知情同意并签署同意书。排除标准：合并严重肝肾功能衰竭、血液系统疾病、瓣膜性心脏病、恶性肿瘤、免疫系统疾病等；近1个月内有手术史者。

1.2 方法

1.2.1 生化指标检测清晨采集空腹静脉血，-20℃保存待测，检测高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、C反应蛋白（CRP），采用电化学发光全自动免疫分析仪（美国雅培i2000）和配套试剂盒（新大陆生物技术有限公司）检测，流程参照试剂盒说明书。

1.2.2 miR-126表达检测采集患者尿液2 ml，以10000 r/min离心，取上清液体，TRIZOL提取总RNA。逆转录过程：加入逆转录酶5 μl，上游引物0.5 μM、下游引物0.5 μM。RT-PCR反应条件：95℃预变性60 s，94℃变性30 s，56℃ 15 s、74℃15 s，连续反应40个循环，产物扩增长度为134 bp。miR-126正向引物序列：5’-TCGTACC GTGAGTAATAATGCG- 3’，反向引物：5-CGC ATTATTACTCACGGTACGA- 3’。

1.2.3 Gensini评分评价冠状动脉的狭窄程度使用Gensini评分系统[6]：狭窄＜25%记1分；狭窄25%～50%记为2分；狭窄51%～75%记为4分；狭窄76%～90%记为8分；狭窄91%～99%记为16分；狭窄100%记为32分。1.3 统计学处理统计分析采用SPSS 19.0软件，计量资料采用均数±标准差（±s），多组间比较采用方差分析，两两比较采用LSD-t检验；非正态分布采用M（Q1～Q3）表示，组间比较采用秩和检验；计数资料采用例数（构成比）表示，组间比较采用χ2检验。相关性采用Pearson相关分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组一般资料比较各组性别比例、年龄、TC、LDL-C和CRP比较，差异无统计学意义（P均＞0.05）；AMI组、UAP组和SAP组TG明显高于对照组，而HDL-C明显低于对照组，差异有统计学意义（P均＜0.05），表1。

2.2 各组入选者尿miR-126表达及Gensini评分比较AMI组、UAP组和SAP组尿miR-126表达明显低于对照组，差异有统计学意义（P均＜0.05）；AMI组、UAP组和SAP组Gensini评分比较差异无统计学意义（P均＞0.05），表2。

2.3 相关性分析结果冠心病患者尿miR-126表达水平与Gensini评分呈负相关（r=-0.301，P＜0.05），与HDL-C、CRP、TG、TC等无相关性（P均＞0.05）。

3 讨论

高血压、高脂血症及遗传因素等，均可促进AMI、SAP等发生发展，特别在年龄大于45岁的老龄吸烟男性人群中，心肌梗死的发病率较普通人群升高2～3倍[6]。冠状动脉造影检查评估冠状动脉狭窄的灵敏度或特异度虽然可达85%以上[7,8]，但仍存在漏诊或误诊的可能。分析尿液中相关指标，可为临床上患者冠状动脉病变的评估提供辅助参考。micro RNA除了参与肿瘤细胞增殖，还可以诱导冠状动脉内皮细胞凋亡。相关研究在探讨心肌细胞活力与非编码RNA的关系时发现，micro RNA的下降程度与冠状动脉的舒张功能或顺应性相关，提示micro RNA可能参与冠状动脉病变[9,10]。miR-126可通过增加冠状动脉内皮细胞内的钙离子浓度，促进氧化应激损伤，加剧内皮下脂质的沉积或者粥样硬化[11,12]。

表1 各组基本资料比较

表2 各组尿miR-126表达及Gensini评分比较

本研究发现，Gensini评分在各组患者间并无统计学差异，而miR-126在冠心病患者中表达明显下降，低于对照组，提示miR-126可能参与了冠心病的发生发展过程，考虑可能与下列因素有关[13,14]： miR-126的高表达，可以通过影响内皮细胞内的第二信使如三磷酸腺苷或者钙离子的异常，进而促进相关炎症信号通路激活导致冠状动脉及心肌细胞的凋亡。相关分析也发现，miR-126的表达与冠状动脉狭窄评分具有密切的关系，miR-126表达越低，患者的冠状动脉狭窄越为严重，提示miR-126可以作为尿液中评估冠心病患者血管病变的重要辅助参考指标。综上所述，冠心病患者尿miR-126检测有一定的应用价值，与冠状动脉血管病变情况相关。

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本文编辑：姚雪莉

年龄≥80岁的老年高血压患者的临床结局

尽管既往有很多老年高血压患者的随机临床试验，但老年高血压患者最佳血压控制目标值仍存争议。近期一项最新观察性队列研究评估了年龄≥80岁的老年高血压患者治疗后血压水平与临床结局的相关性。

研究入选英国初级保健实践数据库中79 376例至少处方应用1种降压药物、3年间至少3次测量血压、年龄≥80岁的、基线无痴呆症、癌症、冠心病、卒中、心力衰竭（HF）及终末期肾功能衰竭的老年高血压患者，根据治疗后血压水平对受试者进行分组分析（最低组为＜125 mm Hg，最高组为＞185 mmHg，中间以10 mmHg为增量进行分组）。受试患者平均年龄为82.1岁，女性占69.5%。中位随访4.4年发现，治疗后血压水平与全因死亡率之间呈U型曲线关系，以处于135～154 mmHg患者的全因死亡率最低。与之相比，治疗后血压水平＜135 mmHg的患者全因死亡率显著增加（HR=1.25，95%CI：1.19～1.31）；每将13例患者的血压降至＜135 mmHg可额外发生1例死亡事件；进一步校正舒张压及脉压对上述结果无明显影响。

此外，研究发现，治疗后血压水平＞155 mmHg的患者死亡率终点与治疗后血压水平＜135 mmHg者相似。进一步分析显示，心肌梗死（MI）风险随治疗后血压水平增加而进行性增加；卒中风险在治疗后血压水平＞155 mmHg时增加；HF风险在治疗后血压水平＞155 mmHg时逐渐增加，治疗后血压水平＜125 mmHg的患者的HF风险也会增加。但是，治疗后血压水平与脆性骨折并无相关性，无证据表明血压增高可增加骨折风险。

综上可见，在年龄≥80岁的老年高血压患者中，治疗后血压水平＜135 mmHg可增加死亡率，＞155 mmHg可增加死亡、MI、卒中及HF风险。这提示，老年高血压患者的血压并非降得越低越好。未来，有必要进一步研究确定老年患者的理想降压目标，并探寻如何根据治疗目标选择个体化治疗方案。

（转自《国际循环》）

Analysis of the relationship between the expression of miR-126 in urine with the changes of HDL-Cand CRP in coronary heart disease

Li Xia*, Sun Jingzhi, Li Xiangting, Jin Xin.
*Department of Cardiology,Affiliated Hospital of Jining Medical College.

ObjectiveTo investigate the expression and significance of urine miR-126 in patients with coronary heart disease.MethodsFrom August 2015 to August 2016, 109 patients with coronary heart disease were selected, including 35 acute myocardial infarction (AMI) patients, 40 unstable angina pectoris (UAP) patients and 34 stable angina pectoris (SAP) patients. And 50 healthy volunteers were selected as control. The levels of total cholesterol (TC), triacylglycerol (TG), high density lipoprotein cholesterol (HDL-C), low density lipoprotein cholesterol (LDL-C), C reactive protein (CRP) and urinary miR-126 were measured.ResultsThere was no significant difference in gender, age, TC, LDL- C and CRP (P＞0.05). TG in AMI group, UAP group and SAP group were 1.40 (0.41,2.42) mmol/L, 1.38 (0.39,2.33) mmol/L and 1.42 (0.44,2.50) mmol/L, which was significantly lower than that in the control group (P＜0.05). And HDL-C were (1.56±0.32)mmol/L, (1.52±0.35) mmol/L and (1.50± 0.38) mmol/L in AMI group, UAP group and SAP group, which was significantly higher than that in the control group (P＜0.05). The expression of urine miR-126 in AMI group, UAP group and SAP group were (0.18±0.02),(0.19±0.03) and (0.18±0.04), which was significantly lower than that in the control group (P＜0.05). There was no significant difference in Gensini score between AMI group, UAP group and SAP group (P＞0.05). The expression level of urine miR-126 was negatively correlated with Gensini score (r=-0.301, P＜0.05), and was not related with HDL-C, CRP, TG, TC (P＞0.05).ConclusionUrine miR-126 detected in patients with coronary heart disease has a certain application value, and has no correlation with HDL-C and CRP, which is worth for further study.

Coronary heart disease; miR-126; Urine

Li Xia, E-mail: lxxqd_74@163.com

R541.4 【文献标志码】 A 【文献标志码】1674-4055(2017)09-1099-03

1272300 济宁,济宁医学院附属医院心内科

李霞,E-mail:lxxqd_74@163.com

10.3969/j.issn.1674-4055.2017.09.22