原发性肝癌患者血清骨桥蛋白和血管内皮生长因子表达水平的研究

任 霖，徐 鉴

·经验交流·

原发性肝癌患者血清骨桥蛋白和血管内皮生长因子表达水平的研究

任 霖，徐 鉴

目的探讨血清骨桥蛋白和血管内皮生长因子在原发性肝癌患者中的表达。方法依据研究对象的纳排标准，选择84例原发性肝癌患者作为观察组(HCC组)，同期选择30例健康体检者作为正常对照组，采集114例研究对象清晨空腹8 h肘静脉血，应用ELISA方法测定血清AFP、VEGF、OPN水平。结果对HCC组与正常对照组患者血清AFP、OPN、VEGF水平进行比较，HCC组血清AFP、OPN、VEGF水平均明显高于正常对照组(P<0.05)。依据巴塞罗那肝癌分期标准，将84例原发性肝癌患者分为A期18例、B期27例、C期25例、D期14例，比较4期血清AFP、OPN、VEGF水平，血清AFP、OPN、VEGF水平均呈逐渐升高趋势，但血清OPN、VEGF水平升高明显(P<0.05)。结论血清VEGF、OPN在原发性肝癌患者中明显升高，且随病情进展逐渐升高，可能参与肝癌病情发展过程中的癌细胞异常增生、血管生成、肿瘤转移等。

原发性肝癌；骨桥蛋白；血管内皮生长因子

肝细胞性肝癌(HCC)是最常见的恶性肿瘤之一，每年约有500 000人死于肝癌，占我国肿瘤死因的第2位，恶性程度高、发展速度快而且预后差[1]，临床症状隐匿，多数患者发现时已属肝癌晚期。目前研究提示，骨桥蛋白(OPN)广泛分布于消化系统，经检测证实有OPN分布与表达的消化器官和组织有：胃、肝内胆管、胆囊上皮、肝脏的巨噬细胞。研究证实，OPN具有显著的促进肿瘤恶化的倾向，被看作是恶性肿瘤生长浸润的一种血清标记物。OPN及血管内皮生长因子(VEGF)在肝癌的发病、复发及转移机制中发挥着不同程度的促进作用[2-3]。本研究通过检测原发性肝癌患者血清中OPN及VEGF水平，探讨其在原发性肝癌发病过程中的作用。

1 资料与方法

1.1 临床资料：2012年1月-2016年6月期间，在银川市第一人民医院感染疾病科门诊及住院治疗患者及肝胆外科、消化内科住院治疗患者中，收集明确诊断为乙肝相关性原发性肝癌患者84例作为研究对象。另选择30名同期健康体检者为对照组，其各项肝炎病毒学检测指标均为阴性，肝功能血清检查在正常范围之内，其中男性17例，女性13例，平均年龄(40.6±8.4)岁。84例乙肝相关性原发性肝细胞癌的患者，诊断符合原发性肝癌诊疗规范(2011年版)[2]的临床诊断标准，其中男性52例，女性32例，平均年龄(46.5±7.9)岁。2组研究对象的性别、年龄等差异无统计学意义。

1.2 血清OPN、VEGF水平的检测：采集30例正常对照组及84例入组肝癌患者空腹8 h以上肘静脉血5 mL，采集后3 000转离心8 min，血清置-70 ℃冰箱保存备用，应用ELISA测定血清AFP、OPN、VEGF水平。

2 结果

2.1 HCC组与正常对照组患者血清AFP、OPN、VEGF水平的比较：HCC组血清AFP、OPN、VEGF水平均明显高于正常对照组，具有统计学差异(P<0.05)，见表1。

表1 HCC组与正常对照组患者血清AFP、OPN、VEGF水平的比较

2.2 84例HCC患者巴塞罗那分期后血清AFP、OPN、VEGF水平的比较：依据巴塞罗那肝癌分期标准，将84例原发性肝癌患者进行分组：A期18例，B期27例，C期25例，D期14例，比较4期血清AFP、OPN、VEGF水平发现，血清AFP、OPN、VEGF水平随肝癌病情进展而呈逐渐升高趋势，其中血清OPN、VEGF水平升高明显，具有统计学差异(P<0.05)，见表2。

表2 84例HCC患者巴塞罗那分期后血清AFP、OPN、VEGF水平的比较

3 讨论

原发性肝癌(HCC)是一种恶性程度极高的肿瘤，其病因以病毒性肝炎感染为主，在我国仍呈现较高的发病趋势，其高恶度、易转移已经成为肝癌治疗领域的一大难题。多数患者首次就诊发现时已属肿瘤晚期，部分患者即使确诊及时并行根治性手术切除治疗，但其远期预后仍较差。复发、侵袭和转移是影响肝癌预后的重要因素。有研究表明，肝癌的转移和侵袭涉及多个基因和多个因子，如甲胎蛋白(AFP)、结缔组织生长因子(CTGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、骨桥蛋白(OPN)等，而甲胎蛋白主要由肝脏实质细胞和卵黄囊细胞在胚胎期合成，当非妊娠状态的成人肝细胞受损后，肝脏干细胞可进一步分化为肝细胞和胆管细胞，其中肝细胞的子代有合成、分泌AFP的能力，也有发生变异进展为肿瘤细胞的可能性[3]，AFP的异常升高常被应用于慢性肝病相关性HCC的普查和诊断，是一种较为特异的血清标志物。本研究也证实原发性肝癌患者血清AFP水平比健康体检者显著升高，提示肝癌肿瘤细胞异常合成、分泌AFP，AFP在临床上广泛应用于HCC的普查和诊断。

各界专家研究认为，肿瘤的生长、转移主要是肿瘤血管的不断再生，这是其进展的重要步骤。肿瘤血管生成是一个多种因子、多种基因介入的历程，肿瘤细胞可分泌多种加快肿瘤进展、促进肿瘤血管形成的细胞因子[4-5]。原发性肝癌主要与肝细胞癌变有关，其恶性程度高、易转移、病情进展快，主要原因之一为肝脏肿瘤局部具有丰富的血供，可分泌、释放多种细胞因子，这些细胞因子可加快肿瘤的进展、促进肿瘤血管的形成，其中血管内皮生长因子(VEGF)、骨桥蛋白(OPN)是目前临床研究较为热门的促肿瘤血管生成细胞因子。研究显示，肝癌患者血清VEGF的主要作用为：①对血管内皮细胞有促进增殖的作用；②可明显增加血管的通透性；③促进血管再生所需的支持物如细胞因子等不断生成；④抑制肿瘤细胞的凋亡过程[6]。骨桥蛋白(OPN)在肝癌中有不同程度的表达，在肝癌的发生、发展和预后中扮演重要角色，在肝癌中的意义日益受到研究者的关注。肝癌组织中OPN不同程度的表达与肝癌包膜完整性有显著相关性，提示OPN可能有促进肝癌细胞发生肝内转移及浸润的作用[7]。

本研究结果显示，HCC组血清VEGF、OPN水平较正常对照组明显升高(P<0.05)，与目前研究结果一致，提示肿瘤细胞异常增生，肝癌细胞合成、分泌释放大量VEGF、OPN，且随原发性肝癌病情的进展呈进行性升高趋势，差异具有统计学意义(P<0.05)，提示VEGF、OPN可能参与肝癌病情发展过程中的细胞增生、血管生成、肿瘤转移等[8-9]，与目前研究结果一致。肝癌实体瘤的生物学特点决定了它对丰富血管的依赖性，多项研究表明在肝癌组织中OPN、VEGF表达水平明显增高，OPN、VEGF的表达与肝癌组织分化程度密切相关，肝癌患者血清中VEGF含量与其TNM 分期呈正相关[10]。VEGF在肝脏肿瘤组织中的分泌表达较肝硬化和正常肝组织中均明显增高，其对肝脏肿瘤组织的作用主要是促进肿瘤血管形成、促使肿瘤细胞的血液供应进一步丰富、促进肿瘤细胞的逐渐浸润与转移。肝癌恶性度高和预后差，与OPN、VEGF等细胞因子的高表达进而促进血管的生成、浸润和远处转移有关。血清高水平OPN、VEGF是肝癌患者不良预后因素，也可作为评估肝癌患者术后复发的独立预测指标，可作为判断肝癌侵袭能力、转移和预后的指标[11]。

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10.13621/j.1001-5949.2017.09.0824

宁夏银川市第一人民医院，宁夏 银川 750001

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2017-03-14责任编辑王凯荣