母犬发情周期各阶段阴道上皮细胞的种类和形态

卢志凌 福建省龙海市港尾畜牧兽医站 福建龙海 363100

母犬发情周期各阶段阴道上皮细胞的种类和形态

卢志凌 福建省龙海市港尾畜牧兽医站 福建龙海 363100

在母犬发情周期的四个阶段分别采集其阴道分泌物，涂片、染色、镜检，观察母犬每个阶段阴道上皮细胞的种类和形态特征，为阴道涂片法的应用提供有效的试验依据。

母犬 上皮细胞 配种时机

Abstractvaginal discharge of female dog in the four stages of estrus cycle collected respectively,than smear,stain,microscopic examination.Observe species and morphology characteristic of vaginal epithelial cells in each stages,to provide effective experimental basis for the application of vaginal smear method.

Key wordsFemale dog The epithelial cells Breeding time

母犬发情周期平均为6个月，排卵时间变化范围较大，难以确定其准确的配种时间。阴道涂片法是鉴定母犬发情的一种有效方法。母犬的发情周期分为发情前期、发情期、发情后期及间情期[1]。在发情周期里，由于生殖激素的作用，阴道上皮细胞的种类和形态逐渐发生改变。通过镜检发情前期、发情期、发情后期和间情期四个不同时期阴道上皮细胞的种类和形态，确定当阴道上皮细胞呈现何种形态特征时，选择最佳配种时机。

1 试验动物

选取体格状况良好、24月龄成年贵宾母犬。

2 方 法

先通过观察母犬阴道出血、阴道形态以及公犬试情的方法，初步划分其发情前期、发情期、发情后期及间情期，划分情况见表1。每个时期采集母犬阴道上皮细胞，涂片，经瑞氏染色，镜检。

3 结 果

通过观察，当母犬阴道开始出现血样分泌物，且不接受交配，此时母犬进入发情前期，该期涂片特征见图1-图2。一般可看到大量的红细胞分布；有些犬不表现很明显的发情出血，涂片上则看不到大量红细胞。在发情前期的初期，涂片上的上皮细胞主要是副基细胞和小中间细胞，随后副基细胞和小中间细胞逐渐减少，大中间细胞及角化上皮细胞的比例逐渐增加，偶见白细胞。

表1 母犬发情周期各阶段情况

当母犬愿意接受公犬交配时，母犬进入发情期，该期涂片特征见图3-图4。发情期涂片上观察到的主要细胞为角化上皮细胞，根据角化程度的不同，有些角化上皮细胞还含有固缩的核，而另一些角化上皮细胞的细胞核则完全消失。红细胞的数量由于犬的个体差异也各有不同，有些犬的发情期阴道涂片上看不到红细胞，而有些则仍可观察到一定数量的红细胞，甚至红细胞一直持续到发情后期的早期还存在。在发情期的末期，角化上皮细胞呈团块状或片状聚集，除角化上皮细胞外，一般看不到其他细胞。

图1 发情前期涂片（瑞氏染色，×1 000）

图2 发情前期涂片（瑞氏染色，×1 000）

图3 发情期涂片（瑞氏染色，×1 000）

图4 发情期涂片（瑞氏染色，×1 000）

用公犬试情，母犬开始拒绝公犬交配时，母犬进入发情后期，该期涂片特征见图5-图6。发情后期阴道涂片的主要特征为可观察到大量白细胞。在发情后期的早期，可看到小中间细胞及大中间细胞[2]。而发情后期的晚期，白细胞的数量减少，副基细胞的数量增加，且有时还可观察到细胞碎片。

图5 发情后期涂片（瑞氏染色，×1 000）

图6 发情后期涂片（瑞氏染色，×1 000）

由于间情期的开始没有比较明显的行为特征，所以，按照母犬发情后期持续的时间推断间情期何时开始。发情后期持续10周，所以，从发情后期开始的时间算起，大致10周以后，母犬进入间情期，该期涂片特征见图7。乏情期阴道涂片上主要是小中间细胞及副基细胞，白细胞几乎不可见。

图7 乏情期涂片（瑞氏染色，×1 000）

4 讨 论

应用阴道涂片法时，正确的采样才能准确判断最佳配种时机[3]。通常，应当在阴道的深部进行取样，因为阴道深部上皮细胞的角化程度受雌激素的影响较大。如果母犬站立保定，取样时，棉签水平深入阴道，然后往斜上方深入阴道深部取样。同时，取样时还应避免棉签插入阴蒂窝或只停留在前庭，因为这些部位的上皮中通常含有角质化细胞，这些细胞将影响镜检结果。

染色时间掌控得好，染色效果越好。起初，瑞氏染液甲液浸润50 s后，冲洗；再加乙液5 min后清洗。后来发现这样染色颜色过深，改进为甲液浸润40 s，乙液处理5 min 30 s。在染色的最后一步均用流水充分冲洗玻片，以尽量除去玻片上的染色颗粒，以免其对玻片观察造成干扰。

5 结 论

运用阴道涂片法，当染色涂片中观察到的主要是角化上皮细胞，且出现核固缩和无细胞核的角化上皮细胞时，是母犬的最佳配种时机，此时对母犬进行配种，受孕率最高。

[1]马大君,隋吉仁.母犬发情周期及注意事项[J].中国工业犬业,2005(6):19-20.

[2]张洪京.肉犬何时配种好[J].农家参谋,2010(5):26.

[3]王欢,赵献锋.家养母犬的最佳配种时机[J].当代畜禽养殖业,2009(6):59.

Species and morphology of vaginal epithelial cells in each stages of female dog estrus cycle

Lu Zhiling
（Gangwei county animal husbandry and veterinary medicine station,Fujian Longhai 363100）

A

1003-4331（2017）05-0003-03