榛果苞干腐病菌杀菌剂敏感性测定

孙 俊，解 明，王道明

（辽宁省经济林研究所，辽宁大连 116031）

榛果苞干腐病菌杀菌剂敏感性测定

孙 俊，解 明，王道明

（辽宁省经济林研究所，辽宁大连 116031）

榛果苞干腐病主要危害榛子果苞，是近年来发生较重的新病害，为了筛选出合理药剂对病害进行综合防治，采用生长速率法对榛果苞干腐病致病菌Trichothecium roseum进行常用杀菌剂的敏感性测定。试验结果表明：榛果苞干腐病菌对不同供试杀菌剂的敏感性存在一定差异，其中对40%多菌灵SC、40%苯醚甲环唑SC和45%咪鲜胺EA的敏感性最高，EC50值分别为0.533 3、1.284 3和1.544 8µg·mL-1；对75%百菌清WP、46%多抗锰锌WP和70%甲基硫菌灵WP的敏感性次之。

榛果苞干腐病菌；杀菌剂；敏感性

Abstract：By mycelium growth rate methods,the sensitivity of Trichothecium roseum to six kinds of fungicides was tested.The results showed that there were differences in sensitivities of T.roseum to six kinds of fungicides,i.e.T.roseum were more sensitive to 40%Carbendazim SC,40%Difenoconazole SC and 45%Prochloraz EA with EC50values of 0.533 3,1.284 3 and 1.544 8 µg·mL-1respectively,and less sensitive to 75%Chlorothalonil WP,46%Carbendazim mancozeb WP and70%Thiophanate-methyl WP.

KeyWords：Trichothecium roseum;fungicides;sensitivity

榛Corylus heterophylla为榛科榛属木本植物，又名平榛、榛子、棰子等。榛子为坚果，红棕色或金黄褐色，并着彩色条纹[1]，广泛分布于东北、华北及陕西、甘肃等地，有“坚果之王”的美称，坚果营养丰富，用途广泛，经济价值高，是加工各种巧克力、糖果、冰淇淋、榛子粉和榛子乳等高级营养品的重要原料[2]，榛子包含着抗癌化学成分紫杉酚，它是红豆杉醇中的活跃成分，可以治疗卵巢癌和乳腺癌以及其它一些癌症，可延长病人的生命期。中医认为，榛子有补脾胃、益气力、明目健行的功效，并对消渴、盗汗、夜尿多等肺肾不足之症颇有益处。榛子还具有降低胆固醇的作用，避免了肉类中饱和脂肪酸对身体的危害，能够有效地预防心脑血管疾病的发生；其还具有消炎、抗氧化养颜护肤、延年益寿等功效[3]。

榛果苞干腐病病原为聚端孢霉Trichothecium roseum[4]，真菌性病害。病菌寄生性不强，成熟期果实或有微伤口的果实发病重[3]。榛果苞干腐病主要危害榛子果苞，在果苞边缘产生较大的褐腐坏死斑，且病斑逐渐扩大连成片，严重时整个果苞干枯坏死，果壳变黑，严重影响产量。湿度大时，病部可产生粉红色霉层[5]。

本研究采用菌丝生长速率法测定了榛果苞干腐病对不同杀菌剂的敏感性，以期筛选出合理药剂，为病害的综合防治提供理论基础。

1 材料与方法

1.1 供试菌种

从辽宁省抚顺章党基地采集获得榛果苞病害标样，经常规组织分离后，对病原菌进行单孢分离，获得其单孢菌株，并按柯赫氏法则回接榛树果苞，证明获得菌株为榛果苞干腐病病原菌[6]。榛果苞干腐病菌菌株，由辽宁省经济林研究所分离并保存。

培养菌落初为白色，后渐变为粉红色。病菌分生孢子梗直立，不分枝，无色，顶端有时膨大，具0～2个隔膜。分生孢子顶端簇生，单独形成，孢基具一扁乳头状突起[4]。分生孢子倒洋梨形，双细胞，隔膜处略缢缩，初期无色，后期浅粉红色，形成向基序列的孢子链，大小为9.8～19.3 μm×5.6～8.3 μm（图1）。

图1 榛果苞干腐病菌端聚孢霉培养性状及显微图片

1.2 供试药剂

46%多抗锰锌WP（青岛海利尔药业集团生产），75%百菌清WP(福建泰禾集团)，70%甲基硫菌灵WP（江苏龙灯化学有限公司），40%苯醚甲环唑SC（陕西韦尔奇作物保护有限公司），40%多菌灵SC（江苏龙灯化学有限公司），45%咪鲜胺EA(江苏农垦农药有限公司)[7-8]。

1.3 试验方法

1.3.1 含药培养基的配制及敏感性测定

榛果苞干腐病病菌的敏感性测定：利用菌落生长直径法，将上述6种不同药剂的母液与PDA培养基混匀，分别配制成浓度梯度为50、20、10、2、0.4、0.08、0.016、0.0032 µg·mL-1的含药PDA平板，用蒸馏水代替药液作为对照组。将试管保存的菌种转到PDA平板活化10 d，用打孔器在菌落边缘打取直径为5 mm的菌饼，接于含药平板中央，以不含药培养基平板作对照，3次重复，25℃恒温箱中培养，12～14 d后用十字交叉法测量各处理的菌落直径，按公式计算出药剂对菌丝生长的抑制率。

1.3.2 EC50值的概念及计算

采用菌丝生长速率法监测敏感性，敏感性越高，抑制病菌所需药剂浓度越小，两者之间存在一定的对应关系。EC50值是指药剂对菌体的抑制率达到一半时所对应的药剂浓度。EC50值越小，说明达到相同生物效应所需药剂剂量越低，药剂对目标生物的活性就越高。

计算方法：将供试药剂浓度和相对防效的平均值转化为相应的对数几率值，建立剂量反应曲线，计算出毒力回归方程Y=bX+a(X为药剂浓度对数；Y为生长抑制率对应的几率值)，Y=5时X的反对数值即为有效抑制中浓度EC50[4]。

2 结果与分析

2.1 不同杀菌剂对榛果苞干腐病菌的EC50值比较

各供试药剂毒力回归方程、相关系数R和EC50值结果见表1。

表1 6种杀菌剂对榛果苞干腐病菌的敏感性

从表1可以看出：供试药剂按照EC50值基本上可以归为2类：40%多菌灵SC、40%苯醚甲环唑SC和45%咪鲜胺EA，EC50值分别是0.533 3 µg·mL-1、1.284 3 µg·mL-1和1.544 8 µg·mL-1，是供试药剂中EC50值非常小的，说明这3种药剂抑菌效果好；75%百菌清WP、46%多抗锰锌WP和70%甲基硫菌灵WP，EC50值介于4.116 1～4.989 1 µg·mL-1，是供试药剂中EC50值较小的，说明这3种药剂抑菌效果较好。

2.2 榛果苞干腐病菌对不同杀菌剂的敏感性比较

在榛果苞干腐病对药剂的敏感性测定中，通过菌丝生长速率法测得了榛果苞干腐病对6种杀菌剂的敏感性，结果表明：6种杀菌剂的EC50范围为0.533 3～4.989 1 µg·mL-1，榛果苞干腐病对多菌灵最敏感，其EC50值为0.533 3 µg·mL-1；对甲基硫菌灵最不敏感，其EC50值为 4.989 1µg·mL-1，从总体上看6组处理的EC50范围较低，对病原抑制显著，明显低于实际推荐使用剂量，都可用于实际生产。

2.3 榛果苞干腐病对多菌灵的敏感性

由试验所得结果来看，榛果苞干腐病对多菌灵的敏感性最高，EC50的平均值为0.533 3 µg·mL-1。其中，当多菌灵浓度为10µg·mL-1时，菌落直径为5 mm；当多菌灵浓度为0.003 2 µg·mL-1，菌落直径约为75.16 mm（图1）。

图3 榛果苞干腐病菌聚端孢霉对多菌灵敏感性测定

3 结论与讨论

6种杀菌剂的EC50范围为0.533 3～4.989 1µg·mL-1，榛果苞干腐病菌对多菌灵最敏感，其EC50值为0.533 3 µg·mL-1，防效最好；对甲基硫菌灵最不敏感，其EC50值为4.989 1 µg·mL-1，从总体上看6组处理的EC50范围较低，对病原抑制显著，明显低于实际推荐使用剂量，都可用于实际生产。

本研究采用菌丝生长速率法测定了辽宁省榛果苞干腐病菌对不同杀菌剂的敏感性。由于榛果苞干腐病为中国新纪录病害，其病害研究较少，对其生物学等特性不明确，在试验操作过程中，无法准确掌握其生长速率以及推荐使用药剂。同时该试验反映了少数杀菌剂对榛果苞干腐病菌的作用效果，在试验中还有很多不完善之处，还有待进一步的改进。室内的药剂敏感性测定结果为农业生产上防治该病提供了理论依据，但仅仅说明该杀菌剂在离体条件下对致病菌的抑制活性，田间的防治效果受到的影响因素很多，有待于试验进一步证实。

［1］李雪岚.谈榛子的开发与利用[J].林业勘查设计，2011(4):114-115.

［2］孙俊.榛子营养价值及辽宁地区榛子病害研究进展[J].辽宁林业科技，2014(5):51-53.

［3］陈佳.补气明目食榛子[J].国土绿化，2004(1):39.

［4］魏景超.真菌鉴定手册[M].上海：上海科学技术出版社，1979.

［5］孙俊.辽宁省榛新病害—果苞干腐病病原鉴定初报[J].中国果树，2013(6):62-62.

［6］方中达.植病研究方法[M].北京：中国农业出版社，1996.

［7］王勇，王万立，刘春艳，等.保护地番茄红粉病的发生与防治[J].中国蔬菜，2007(12):57.

［8］李利平，张建英，杜自海.黄瓜红粉病的发生为害及防治方法[J].植保技术与推广，2003，23(11):21.

(责任编辑：苑辉)

Sensitivity test of Trichothecium roseum to six kinds of fungicides

SUN Jun,XIE Ming,WANG Daoming
（LiaoningInstituteofEconomicForestry,Dalian116031,China）

S763.1

A

1001-1714（2017）05-0004-04

2017-02-05

国家林业局948项目（2012-4-56）。

孙俊（1983-），女，高级工程师，主要从事经济林树种的病害研究工作。E-mail:sunjun3200@163.com。