参芪扶正注射液联合胸腺五肽对卵巢癌腹腔热化疗大鼠细胞免疫功能的影响

李波 陈晓庆 张晓光 韩丽维

参芪扶正注射液联合胸腺五肽对卵巢癌腹腔热化疗大鼠细胞免疫功能的影响

李波 陈晓庆 张晓光 韩丽维

目的探讨参芪扶正注射液联合胸腺五肽对经腹腔热化疗治疗的卵巢癌大鼠免疫功能的影响。方法42只卵巢癌大鼠成功建模后随机分为对照组和观察组, 每组21只。两组大鼠均进行腹腔热化疗(顺铂)并同时给予胸腺五肽治疗, 在此基础上给予观察组大鼠参芪扶正注射液, 共进行3 周。比较两组大鼠治疗前后细胞免疫功能变化。结果治疗前两组大鼠体重比较差异无统计学意义(P＞0.05)；治疗后两组大鼠体重均明显高于治疗前, 但观察组(153.48±23.54)g低于对照组(166.57±16.54)g, 差异均具有统计学意义(P＜0.05)。两组大鼠治疗前CD3、CD4、CD8、CD4/CD8比较差异无统计学意义(P＞0.05)；两组大鼠治疗后血清CD3、CD4与CD4/CD8有所降低、CD8有所升高, 差异均具有统计学意义(P＜0.05)；治疗后观察组大鼠的血清CD3、CD4、CD4/CD8水平明显高于对照组、CD8明显低于对照组, 差异均具有统计学意义(P＜0.05)。结论卵巢癌大鼠行腹腔热化疗后给予参芪扶正注射液联合胸腺五肽, 对于改善卵巢癌大鼠的细胞免疫功能有一定帮助。

卵巢癌；参芪扶正注射液；胸腺五肽；腹腔热化疗；免疫功能

卵巢癌早期临床症状不明显, 而患者到晚期死亡率很高, 在妇科所有恶性肿瘤之中死亡率居首。往往采取手术结合放化疗等综合治疗来治疗卵巢癌, 但是效果仍然不理想, 因此需要寻找新的方案［1］。腹腔热化疗(intraperitoneal hyperthermic chemotherapy, IPHC)近年来常用于配合手术治疗腹腔恶性肿瘤, 因卵巢癌患者发生腹腔内浸润转移率较高,并且对热化疗敏感［2］, 所以作者选择了腹腔热化疗进行研究,现报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料来源 选用近交系健康雌性Fischer344大鼠42只,周龄8~10 周, 体重120~150 g；NuTu19卵巢癌细胞株(上海纪宁生物科研有限公司)。喂养普通颗粒饲料, 自由取食饮水,人工控温20~26℃, 12 h光照, 12 h黑暗。

1.2 细胞培养方法 在RPMI-1640培养液(含10%小牛血清)中接种NuTu-19细胞, 并置于CO2培养箱中、温度37℃。

1.3 建立Fischer344大鼠上皮性卵巢癌动物模型方法 用胰酶消化所培养出来的对数生长期NuTu-19细胞并调整细胞计数, 将细胞(5×106/只)注射入大鼠腹腔中, 然后再SPF条件饲养, 饲养3周后进行分组治疗处理［3］。本组42只大鼠均建模成功, 随机分为观察组与对照组, 各21只。

1.4 腹腔热化疗治疗方案 根据NuTu-19细胞的生物学特征［3］, 以及体外细胞药敏实验证实对顺铂敏感性高［半抑制浓度(IC50)值=0.83μg/ml］, 因此可将将腹腔顺铂注射液用生理盐水调整为浓度0.83μg/ml。每日给予两组大鼠腹腔注射辅助性的免疫增强剂［胸腺五肽1 mg/(kg·d)］、20 ml 的顺铂(0.83μg/ml )一次性腹腔灌注(每周三进行, 1次/周),灌注液温度维持在43℃, 连续进行以上给药方案3周。观察组在对照组基础上给予参芪扶正注射液［每天腹腔给予注射参芪扶正注射液3 ml/(kg·d)］腹腔注射。

1.5 观察指标 测定细胞免疫指标, 使用流式细胞仪细胞计数仪检测两组治疗前后外周血T细胞亚群(CD3、CD4、CD8)的水平, 并计算CD4/CD8数值；比较两组治疗前后体重水平。

1.6 统计学方法 采用SPSS17.0统计学软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差表示, 采用t检验。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组大鼠治疗前后体重比较治疗前两组大鼠体重比较差异无统计学意义(P＞0.05)；治疗后两组大鼠体重均明显高于治疗前, 但观察组(153.48±23.54)g低于对照组(166.57±16.54)g, 差异均具有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

表1 两组大鼠治疗前后体重比较, g)

表1 两组大鼠治疗前后体重比较, g)

注：与治疗前比较,aP＜0.05；与对照组比较,bP＜0.05

组别 只数 治疗前 治疗后对照组 21 142.32±19.49166.57±16.54a观察组 21 148.57±20.34 153.48±23.54ab

2.2 两组大鼠治疗前后细胞免疫功能比较两组大鼠治疗前CD3、CD4、CD8、CD4/CD8比较差异无统计学意义(P＞0.05)；两组大鼠治疗后血清CD3、CD4与CD4/CD8有所降低、CD8有所升高, 差异均具有统计学意义(P＜0.05)；治疗后观察组大鼠的血清CD3、CD4、CD4/CD8水平明显高于对照组、CD8明显低于对照组, 差异均具有统计学意义(P＜0.05)。见表2。

表2 两组大鼠治疗前后细胞免疫功能比较

表2 两组大鼠治疗前后细胞免疫功能比较

注：与治疗前比较,aP＜0.05；与对照组比较,bP＜0.05

测量指标 组别 只数 治疗前 治疗后CD3(%) 对照组 21 73.27±10.2362.43±9.78a观察组 21 72.92±9.56 67.32±9.43abCD4(%) 对照组 21 44.78±6.5432.47±5.78a观察组 21 45.32±7.76 37.32±4.74abCD8(%) 对照组 21 31.54±4.4334.34±4.48a观察组 21 31.32±3.63 32.48±4.38abCD4/CD8 对照组 21 1.42±0.31 1.03±0.21a观察组 21 1.46±0.21 1.22±0.23ab

3 讨论

约有90%的卵巢恶性肿瘤来源于上皮细胞, 早期临床症状不明显, 发现时已进入晚期, 因此腹腔转移率高, 5年生存率(约30%)较低, 肿瘤的分化程度、病理类型是影响其恶性程度的重要原因［4］。腹腔热化疗适用于Ⅱ期以上卵巢癌的治疗。盆腔种植转移与播散是卵巢癌主要转移途径, 手术困难且创面较大, 因腹腔热化疗在临床上广泛使用, 在治疗术后复发患者中有着较好的临床疗效［5］。顺铂使用历史较悠久,且临床效果较好, 但是该药不良反应(骨髓抑制、胃肠反应为主)较多限制了该药的临床使用［6］。参芪扶正注射液是一类含有抗肿瘤的生物活性物质, 大量研究显示：该物质具有多种抗肿瘤活性, 能诱导肿瘤细胞凋亡与抑制新生血管的生成, 且能增强机体自身免疫功能, 临床广泛使用［7］。胸腺五肽属于人工合成的免疫调节剂, 能通过调节T淋巴细胞亚群的分化比例来调节免疫［8-10］。

T淋巴细胞主要负责细胞免疫反应, 而由于肿瘤细胞浸润与化疗手术的创伤造成恶性肿瘤患者外周血清淋巴细胞与白细胞浓度降低, 恶性肿瘤患者被临床研究证实外周血清T淋巴细胞亚群浓度降低［11,12］。本实验结果显示：两组CD3、CD4与CD4/CD8于治疗后有所降低(P＜0.05), 而CD8于治疗后有所升高(P＜0.05)；观察组治疗后CD3、CD4与CD4/CD8高于对照组(P＜0.05), 而CD8低于对照组(P＜0.05), 说明两组大鼠化疗后的体液免疫与细胞免疫均有所降低, 而在此基础上给予了参芪扶正注射液的观察组, 能够明显的提高大鼠的细胞免疫功能。

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10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2017.18.111

2017-07-17］

121000 武警辽宁省总队锦州市支队卫生队(李波)；锦州医科大学附属第一医院(陈晓庆)；武警辽宁省总队朝阳市支队卫生队(张晓光)；武警辽宁省总队医院医务处(韩丽维)