食品中环己基氨基磺酸钠检测方法

刘娜，扎木则仁,吴腾,常建军

（内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司质量安全管理系统中心实验室，呼和浩特011517）

食品中环己基氨基磺酸钠检测方法

刘娜，扎木则仁,吴腾,常建军

（内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司质量安全管理系统中心实验室，呼和浩特011517）

使用毛细管色谱柱-气相色谱仪检测食品中环己基氨基磺酸钠的质量浓度。将样品称取后放置在冰水浴中先加氯化钠摇匀，再加入三氯乙酸溶液轻轻摇匀,然后加入亚硝酸钠溶液冰浴衍生，用正己烷提取后，用气相色谱仪氢火焰离子化检测器检测。该方法检测环己基氨基磺酸钠回收率范围在86.07%～109.33%之间，相对标准偏差在3.16%～7.38%之间。该方法检测结果准确可靠、重复性好，可进行食品中环己基氨基磺酸钠质量浓度的检测。

环己基氨基磺酸钠；三氯乙酸；气相色谱仪；毛细管色谱柱

0 引 言

环己基氨基磺酸钠的商品名称为甜蜜素（Sodi⁃um Cyclamate），是一种人工合成的食品添加剂[1]。是一种高甜度、无热值、安全卫生，并能代替蔗糖的新型食品添加剂，是不被人体吸收的低热能甜味剂[2]，但长期食用过量的甜蜜素会加重肝脏负担,并对肾脏有一定的毒副作用[3];近年来研究发现,甜蜜素因在胃肠道内转化为环己胺,可能具有潜在的致癌性,能诱发膀胱癌[4]。因此我国国家标准GB2760《食品添加剂使用卫生标准》严格规定了甜蜜素的使用范围及用量。

目前环己基氨基磺酸钠气相检测方法的前处理主要用亚硝酸钠溶液和硫酸溶液在冰水中进行衍生化反应产物环己醇亚硝酸酯进行检测，方法的稳定性差、准确度低等不足的地方较多。本方法在国标方法的基础上，使用三氯乙酸溶液代替硫酸溶液提供酸性条件比较安全，提高方法的准确度、精密度以及稳定性。另一目的是通过前处理方法衍生化过程中先加入氯化钠，然后先加三氯乙酸溶液后加亚硝酸钠溶液的方式提高方法的稳定性以及准确度。

1 实验

1.1 材料与试剂

本研究所使用的样品均为市场上购买；环己基氨基磺酸钠标准品：DR.Ehrenstorfer纯度99.0%、正己烷色谱纯，其他药品均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

三氯乙酸溶液质量浓度10%（10 g三氯乙酸溶于100 mL水中），亚硝酸钠水溶液质量浓度50 g/L

1.2 仪器与设备

气相色谱仪:VARIAN GC-450,氢火焰离子化检测器。

气相毛细管色谱柱:VF-1ms（30m×0.32mm×0.25 μm）。

IKATM MS 3 basic旋涡混和器，Heal Toledo离心机，MettlerToldeo XP205万分之一电子天平。

1.3 测定方法

样品称取后放置在冰水浴中先加氯化钠摇匀，再加入三氯乙酸溶液轻轻摇匀,然后加入亚硝酸钠溶液冰浴衍生，用正己烷提取样品中的环己基氨基磺酸钠；气相毛细管色谱柱分析，外标法定量[5]。

1.4 方法

1.4.1 标准溶液配制

标准储备液：称取环己基氨基磺酸钠标准品0.25 g（精确至0.0001 g），25.00 mL容量瓶中用水溶解定容至刻度。2～8℃冰箱内保存2个月。

标准工作液：使用前从标准储备液中取0.1，0.2，0.4，0.8，1.6 mL至50 mL离心管中再加10 mL水，准确配置环己基氨基磺酸钠的质量浓度分别为0.1，0.2，0.4，0.8 g/L和1.0 g/L的待测液，其他按照样品预处理步骤进行操作，分别测定待测液中环己基氨基磺酸钠，并绘制浓度-峰面积标准曲线。

1.4.2 样品预处理、衍生及提取

主要称取的样品放置在冰水浴中先加1.0 g氯化钠摇匀放置5.0 min，然后加入5 mL 10%三氯乙酸溶液轻轻摇匀，再加入5 mL质量浓度为50 g/L亚硝酸钠溶液,摇匀。在冰浴中放置40 min,并经常摇动,再准确加入10 mL正己烷及5 g氯化钠,摇匀后置旋涡混合器上振动1 min或摇80次充分提取衍生物,有乳化现象的样品进行5 000 r/min离心5 min,待静止分层后吸出正己烷层待上机。取上清液及时上机；环己基氨基磺酸钠衍生物易挥发不太稳定[6]。

1.4.3 结果计算

外标法定量，按下式进行计算：

式中：X为待测样品环已基氨基磺酸钠的质量分数（g/kg）；A为样品测定液中环已基氨基磺酸钠的质量浓度（g/L）；V为样品定容体积（mL）；f为样液的稀释因子；m为样品称量质量（g）。

1.5 仪器参考条件

色谱柱：VF-1（30m ×0.32mm ×0.25μm）毛细管色谱柱或相等性能的毛细管色谱柱；检测器温度300℃，气化温度260℃,柱温50℃,保持0 min,10℃/min升温到120℃,保持2 min；载气(N2)2.0 mL/min,氢气流量30 mL/min,空气流量300 mL/min,分流比20:1,尾吹流量(N2)25 mL/min。

2 结果与讨论

2.1氯化钠对比实验

（1）称取5.0 g含有环己基氨基磺酸钠的蜜饯肉加10.0 mL纯水，在加入不同称量的氯化钠对检测结果的影响实验，结果如图1所示。

图1 加入不同称量的氯化钠对检测结果的影响实验

由图1可以看出：其他条件相同的情况下对蜜饯质控样品中加入不同量NaCl固体，加入量1.20 g时检测结果最大，因考虑实际操作故选择1.00 g左右时最佳。

（2）含有环己基氨基磺酸钠的蜜饯肉质控样品中添加NaCl和不添加NaCl对比实验，结果如表1所示。

表1 NaCl添加和不添加对比实验 g/kg

2.2 本方法对不同基质精密度和准确度实验

表2 对不同基质精密度和准确度实验（n=6）

在不同样品中加入不同浓度水平的环己基氨基磺酸钠进行加标回收率试验，回收率范围在86.07%～109.33%之间，RSD在3.16%～7.38%之间。

3 结论

本文在国标的基础上建立了测定食品中环已基氨基磺酸钠的检测，先加入1.0 g氯化钠能够保持试样的温度较低，衍生化反应过程中容易产热，并且充分释放试样中溶进物，（如：蜜饯中的添加剂环己基氨基磺酸钠，腌制脱水原理）提高准确度。三氯乙酸的添加不仅能够为衍生化反应提供酸性条件，而且基于三氯乙酸能够在不同pH值条件下都能够沉淀蛋白质的特性[7]，利用三氯乙酸能够较充分地沉淀蛋白质，容易释放目标物。本方法的回收率范围在82.37%～109.15%之间、RSD范围在2.43%～5.02%之间方法的精密度和准确度比较好，此方法可以快速、高效、准确检测食品中的环已基氨基磺酸钠。

[1]汪铁军,陈国烽．毛细管柱气相色谱法测定果冻中甜蜜素[J].科技创新导报.2010（3）208-210.

[2]张霞，王锡宁，张萍.毛细管气相色谱法测定含奶油类冰淇淋等样品中甜蜜素[J].预防学论坛2010（16）:248-250.

[3]邓永利,周光明,罗振亚,等.离子色谱法直接测定牛奶中的甜蜜素[J].西南大学学报(自然科学版),2007,29(7):79.

[4]王敏,郭德华,韩丽,等.HPLC法快速分离和检测食品中微量甜蜜素含量[J].中国卫生检验杂志,2007,17(8):1421·

[5]曹祥英.气相色谱法测蛋白饮料中甜蜜素的试样前处理方法探讨[J].科技资讯，2007（4）:35-36.

[6]GB/T5009.97-2003食品中环己基氨基磺酸钠检测方法[S].

[7]CHEUNG C K,MAK Y T,SWAMINATHAN R.Automated tri⁃chloroacetic acid precipitation method for urine total protein[J].Ann Clin Biochem.,1987,24:140-144.

Research of cyclamate detection method in food product

LIU Na，Zhamuzeren,WU Teng,CHANG Jianjun

(Inner Mongolia Mengniu Dairy Industrial Co.Ltd.,Hohhot 011517,China)

The paper established a method to detect cyclamate in food using capillary column-gas chromatograph.Sample of the said after taking place in the ice water bath,firstly adding sodium chloride and shaking,and the supernatant solution was added aqueous solution of tri⁃chloroacetic acid and aqueous sodium nitrite solution in ice bath,finally the target substance was extracted with n-hexane and detected by gas chromatography.The recoveries of the method was between 86.07%～109.33%,relative standard deviations between 3.16%～7.38%.The test results of this method are accurate and reliable.

cyclamate;trichloroacetic acid;gas chromatograph;capillary column

TS252.7

A

1001-2230（2017）08-0051-02

2016-12-13

刘娜（1986-），女，硕士研究生，从事乳品检测方面的研究。