精子库1例B3亚型血捐精志愿者报告及建议

宋晓辉 王 丽

·临床经验·

精子库1例B3亚型血捐精志愿者报告及建议

宋晓辉 王 丽*

山东大学生殖医学研究中心；国家辅助生殖与优生工程技术研究中心；生殖内分泌教育部重点实验室（山东济南 250001）

ABO血型系统是人类血型系统中抗原免疫原性最强的一个血型系统，根据红细胞上是否存在A、B抗原和血清中是否存在抗A抗B抗体，ABO血型表现型分为A、B、O、AB血型。亚型是指属同一血型抗原，但抗原结构或抗原位点数有一定差异，ABO血型系统最常见的亚型出现在含A抗原的人群中，B亚型相对较少。虽然B亚型抗原性较弱，但在临床上也有一定的意义。其中B3亚型通常是由ABO位点上的稀有等位基因所致[1]。B3亚型红细胞最主要的特征是在显微镜下能与相应的抗体出现混合视野外观[2]。血型是人类精子库捐精志愿者体检中的一个项目，它在志愿者档案分类管理、精液标本的发送及临床使用中起到重要的作用。本文对山东人类精子库一例B3亚型血捐精志愿者作一报道，并对精子库的管理提出一些相关建议。

临床资料

患者 男性，31岁大学专科学历，五官端正，到山东人类精子库做捐精志愿者，对该男子进行宣教后双方签订了知情同意书，该男子符合《人类精子库基本标准和技术规范》规定的供精者筛查程序及健康检查标准[3]。人类精子库辅助实验室对其血型进行检测时出现正反定型不一致现象。该志愿者自述无输血史，无疾病史，无家族遗传病史，立即送本院输血科进行复查怀疑为亚型血。后经山东省血液中心检测报告为B3亚型。

结 果

一、人类精子库辅助实验室微柱凝胶法检测

本实验室所用血型检测卡为中山市生科试剂仪器有限公司生产的微柱凝胶正反定型检测卡，离心机为TD-2Y医用多功能离心机。该志愿者红细胞与抗A反应均沉积于凝胶管底部，与抗B反应大部分红细胞沉积于底部，极少量红细胞悬于凝胶上层，呈现混合凝集（mf），与抗D反应红细胞全部悬于上层，Control管红细胞全部沉积于底部；该志愿者血浆与A1细胞反应呈现3+的凝集，与B、O及自身细胞均不凝集，结果见表1。

表1 微柱凝胶凝集法血型初步鉴定

二、本院输血科试管法复查结果

使用试剂为上海血液生物医药有限责任公司生产的抗A、抗B、抗AB、抗A1及抗H试剂，中山市生科试剂仪器有限公司生产的标准A细胞、B细胞、O细胞。分别再4℃、室温及37℃放置30min进行正反定型试验，提示患者红细胞上有弱B抗原存在，结果见表2。

表2 试管法ABO血型复查

三、山东省血液中心检测结果

不规则抗体筛选阴性，直接抗人球蛋白试验阴性。唾液血型物质检测到B、H物质，综合盐水试管法正反定型和吸收放散试验结果，该捐精志愿者符合B3亚型血清学特征。

讨 论

ABO亚型是由于红细胞所携带的A或B抗原数量很少与标准的抗A或抗B血清反应较弱，容易造成血型鉴定错误。本实验室用微柱凝胶法检测血型，因其稳定灵敏度高，能检测到十分微弱的抗原抗体反应和不完全抗体等优点已作为临床血型鉴定常规方法[4]。对该捐精志愿者的血用微柱凝胶法进行检测后发现了正反定型不一致现象，其红细胞与抗B血清混合在微柱凝胶中出现混合视野，该志愿者自述无家族遗传史和疾病史等，所以排除了生理因素和疾病因素造成的正反不一致现象。然后送本院输血科用试管法进行了复查，在4℃、室温及37℃孵育30min后经显微镜观察证实了弱凝集的存在。该志愿者红细胞与抗B血清混合在显微镜下观察可见弱凝集，与抗AB反应也呈弱凝集，其红细胞与抗H反应凝集比O细胞与抗H凝集强度弱，从而说明红细胞上的B抗原很弱，H抗原较强，试管法初步判断该志愿者红细胞有弱B抗原存在。山东省血液中心结合盐水试管法和吸收放散实验最后确定为B3亚型。

B3亚型的红细胞与抗B血清呈弱凝集或混合外观凝集，从而极易误定为O（或A）型血。人类精子库按照捐精志愿者的四种血型对其精液进行分类编号，从而为不育患者提供与男方血型一致的精液。所以血型检测正确性尤为重要。有研究指出[5]由亚型造成血型定型错误占到了16%。建议人类精子库对志愿者的血型检测时严格按照正反定型标准进行，当出现正反定型不一致的情况时及时找出原因，对于不明原因的应向当地血液中心送检。有报道指出[6,7]亚型无论从家系调查分析还是从分子生物学鉴定都具有遗传性，如果后代为B3亚型有输血需求时理论上只能输B3亚型，但实际上很难找到，故只能用洗涤后的O型红细胞配合输注[8]。在血站一般也不接收亚型的献血者，因为临床很难碰到相同亚型的患者，血液保质期一到就报废了。假如亚型血志愿者的精液用于临床，亚型血的这种遗传性不孕夫妇应有完全知情权和标本的选择权，而且只有在知情的前提下才能行使选择权。亚型所产生的问题同时也是个医学伦理问题。目前为止合格捐精者的血型亚型问题人类精子库和临床供精还没有具体的规定和措施，亚型的志愿者能否捐精或捐精后精液能否用于临床是一个需要讨论的问题。

2003年卫生部组织有关专家结合我国实际情况重新修订了《人类辅助生殖技术与人类精子库伦理原则》，伦理原则中包含了有利于供受者、保护后代、保密、社会公益、知情同意等伦理原则，这些原则对于辅助生殖技术的发展发挥了重要作用。虽然人类精子库的出现对男性不孕夫妇带来了福音，但是供精人工授精的广泛使用必然会产生一系列新的伦理和社会的等诸方面的问题。人类精子库之间应加强联系和沟通，对出现的新问题应多组织讨论，争取形成专家共识，以指导实际工作，使精子库和辅助生殖技术朝着逐步完善的方向发展。为患者提供最佳的医疗服务。

小 结

到目前为止我国已经建立了23家人类精子库，但是我国人类精子库初期建立阶段处于一种无序状态，虽然2001年2月和2003年10月我国卫生部先后颁发了2个相关的管理办法及其修订版，精子库运行过程至今仍面临种种问题[9]，尤其在精子库伦理原则上，各人类精子库在运行时仍然不同程度的存在一些伦理问题，且未引起高度重视。所以卫生部主管部门应加强对精子库工作的监督管理，将人类精子库的伦理原则体现在精子库技术的每一环节中，如谨慎的工作态度，对志愿者血型检查时务必坚持做正反定型；充分考虑到供受者的利益，不盲目剥夺供精者供精的权利，也要尊重受精者知情同意的权利。

鉴于此种情况我们对此志愿者按B型血进行分类编号，档案做特殊标记，假如染色体正常我们将对该志愿者供精结束6个月后复查HIV，对其所供精液进行储存，供后期科学研究和临床上特殊用精使用。同时，考虑到该志愿者的精液在临床使用会比较少，所以也控制其捐献的次数。但该志愿者查体后并未前来捐献，40d后染色体核型结果为chi 46,XX[32]/46,XY[68]，即具有XX和XY细胞系的异源嵌合体。我们通知本人并终止其捐献过程，对其档案按异常进行管理。

血型抗原; 精子库; 捐精

1 李勇, 马学严. 实用血液免疫学: 血型理论和实验技术.北京: 科学技术出版社, 2006: 243-245

2 杰夫•丹尼尔. 人类血型. 朱自严, 译. 北京: 科学出版社, 2007: 41-42

3 卫生部科教司. 卫生部关于修订人类辅助生殖技术与人类精子库相关技术规范、基本标准和伦理原则的通知, 2003

4 杨慧敏, 陈钦宏, 谢作听. 微柱凝集法检出B亚型血型及鉴定. 中国卫生检验杂志 2010; 20(12): 3348-3349

5 吴敏慧, 刘毅, 刘洪莉, 等. ABO血型正反定型不符确认试验结查分析. 临床输血与检验 2005; 7(3): 198-199

6 刘启明, 尹新燕, 阎泽君, 等. B3亚型1例及家系调查. 中国误诊学杂志 2008; 8(19): 4785

7 张韦, 栾希英. 1例B3亚型的分子机制及家系调查. 临床输血与检验 2016; 18(4): 319-322

8 王燕菊, 蒋学兵, 李文静, 等. B3亚型1例报告. 北京医学2012; 34(2): 143

9 卢文红, 陈振文. 中、外精子库的发展和管理比较. 生殖与避孕 2014; 34(2): 102-107

（2017-05-27收稿）

10.3969/j.issn.1008-0848.2017.04.012

R 321-33

＊通讯作者，E-mail: wangli_0531@163.com