浸润性肺腺癌组织中促红细胞生成素肝细胞A7和基质金属蛋白酶-2的表达及临床意义

安文静 冯喜英 关 巍 华 毛 久 太 杜发茂 崔金霞 拉周措毛 李玉红 刘洪千 马维秀 时莹庆张 娜

(青海大学附属医院呼吸科，青海 西宁 810001)

浸润性肺腺癌组织中促红细胞生成素肝细胞A7和基质金属蛋白酶-2的表达及临床意义

安文静 冯喜英 关 巍 华 毛 久 太 杜发茂 崔金霞 拉周措毛 李玉红 刘洪千 马维秀 时莹庆张 娜1

(青海大学附属医院呼吸科，青海 西宁 810001)

目的观察促红细胞生成素肝细胞(Eph)A7和基质金属蛋白酶(MMP)-2在浸润性肺腺癌中的表达特征，分析其临床意义及相关性。方法61例浸润性肺腺癌患者临床资料及术后蜡块组织为实验组，正常肺组织36例为对照组，应用免疫组化二步法检测两组EphA7和MMP-2表达。结果EphA7和MMP-2在两组中的表达差异具有统计学意义(P<0.001)。实验组EphA7和MMP-2表达与肿瘤淋巴结转移和肺膜累犯相关，EphA7表达与肿瘤最大径相关，二者均与患者的年龄、性别无相关性。相关分析显示二者不具有相关性。结论浸润性肺腺癌中EphA7和MMP-2表达升高可能对肿瘤进展有一定促进作用，EphA7对促进肿瘤生长有一定作用。

肺腺癌；促红细胞生成素肝细胞(Eph)A7；基质金属蛋白酶-2

肺腺癌形成和进展时常伴随高增殖性的肿瘤细胞生长和转移潜能活跃的细胞〔1〕。促红细胞生成素肝细胞(Eph)A7是酪氨酸蛋白激酶受体家族成员，定位于染色体6q16.1靠近断裂点的位置，研究显示其与肿瘤形成和进展有关〔2，3〕。基质金属蛋白酶(MMP)-2也称明胶酶A，是MMPs家族中对细胞外基质降解有重要作用的成员，在肿瘤性病变时表达升高，可以有效促进肿瘤进展〔4，5〕。本研究检测浸润性肺腺癌中EphA7和MMP-2表达，分析二者在不同临床病理特征中差异及相关性。

1 资料与方法

1.1一般资料 2014年1月至2016年7月青海大学附属医院浸润性肺腺癌61例为实验组，均由术后病理证实，其中男29例，女32例，年龄41～82(平均59.3)岁。排除标准：①合并胸腔积液；②肺癌复发；③合并其他器官恶性肿瘤。上述患者中距肿瘤边缘>3 cm的正常肺组织36例为对照组，其中男18例，女18例，年龄43～80(平均56.9)岁。两组性别、年龄无统计学差异，具有可比性。

1.2EphA7和MMP-2的检测 手术后常规切取肺组织，应用甲醛溶液固定后，脱水、石蜡包埋、切片，EphA7和MMP-2的检测应用免疫组化SP法，二氨基联苯胺(DAB)显色。做好质量控制工作。

1.3EphA7和MMP-2结果的判定 EphA7和MMP-2以肿瘤细胞中的表达为判断标准(间质和背景中的染色不判定)，两种蛋白均定位于细胞质，以细胞质中出现棕黄色颗粒为阳性细胞。选择观察组中肿瘤细胞集中的区域和对照组中肺泡上皮细胞分布的区域进行观察，共观察3个400倍视野，取平均值，以<25%定为阴性，≥25%定为阳性。

1.4统计学方法 采用SPSS13.0统计软件进行χ2检验、线性相关分析。

2 结 果

2.1EphA7和MMP-2在两组表达差异 两组EphA7和MMP-2的差异有统计学意义(P<0.001)。见表1。

表1 两组EphA7和MMP-2阳性表达的比较〔n(%)〕

2.2实验组EphA7和MMP-2阳性表达在不同临床病理特征分组中的比较 实验组中EphA7和MMP-2阳性表达与肿瘤淋巴结转移和肺膜累犯相关；EphA7阳性表达与肿瘤最大径相关，二者均与患者的年龄、性别无相关性。见表2。

表2 实验组EphA7和MMP-2阳性表达在不同临床-病理特征分组中的比较〔n(%)〕

2.3实验组EphA7和MMP-2相关性 EphA7和MMP-2阳性表达无相关性(P=0.234 1)。

3 讨 论

肺腺癌病变进展时与机体中的外源性因素刺激和内在基因表达失调有关〔6〕。EphA7是从成年鼠大脑分离出来的，与Eph家族中的其他成员一样具有相同的主要结构，其胞外部分包括一个富含半胱氨酸的区域和串联的纤维连接蛋白结构域〔7，8〕。EphA7在胚胎组织中广泛表达，尤其是中枢神经系统。EphA7能和其他EphA受体在细胞信号交换中合作〔9〕。EphA7区别于其他受体之处主要是其包含细胞内酪氨酸激酶结构域〔10〕。陈千益等〔11〕通过观察胃癌中EphA7的表达，发现其在肿瘤中的表达明显高于对照组，认为EphA7在胃癌的发生发展及转移中发挥重要作用，同时EphA7蛋白表达水平与胃癌肿瘤分化程度呈负相关性，而与淋巴结转移、血清CA19-9水平呈正相关性。因此EphA7对肿瘤的形成具有促进作用。MMPs是一组锌离子依赖性蛋白水解酶，可以降解细胞外基质中的各种蛋白成分，尤其是对基底膜可以有效降解〔12，13〕。MMP-2、MMP-9属MMPs中的明胶酶类，它们主要降解细胞外基质及基底膜的主要结构蛋白Ⅳ型胶原，MMP-2在Ⅳ型胶原表面聚集，使细胞外基质变得疏松、基底膜缺失，肿瘤细胞进而通过疏松的细胞外基质和缺失的基底膜向周围组织或远处组织扩散和浸润，引起肿瘤侵袭和转移〔14，15〕。

本研究提示EphA7和MMP-2高表达是浸润性肺腺癌区别于正常肺组织的一个重要特征，提示二者高表达与肺泡上皮的恶变有关。EphA7和MMP-2高表达是促进肿瘤淋巴道播散的重要因素，也是肿瘤浸润性生长和破坏肺膜的重要危险因素〔16〕。本文结果提示EphA7高表达时可以促进肿瘤的生长，此时肿瘤细胞增殖活跃，肿瘤细胞生长旺盛，细胞数量明显增多，肿瘤体积增大。但是EphA7对肿瘤作用可能具有多元性。研究认为EphA7在肿瘤间质中的血管内皮细胞可以有一定程度的表达，因此EphA7可能是血管内皮生长的促进因子之一，其对血管生成的促进作用使肿瘤局部的血供丰富，肿瘤细胞的营养成分足够，细胞具备旺盛生长的前提条件〔17〕。本文提示EphA7和MMP-2二者不具有协同作用。张训等〔18〕发现EphA2和MMP-2在胶质瘤中高表达，二者呈正相关，认为EphA2可能通过影响MMP-2而促进肿瘤的侵袭与转移。由于EphA7包含细胞内酪氨酸激酶结构域，因此EphA7对MMP-2的调节作用可能不明显，具体机制有待更多分子生物学实验证实。

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〔2016-09-27修回〕

(编辑 苑云杰)

R73

A

1005-9202(2017)18-4568-03；doi：10.3969/j.issn.1005-9202.2017.18.062

1 青海省人民医院呼吸科

冯喜英(1962-)，女，主任医师，主要从事呼吸病学研究。

安文静(1981-)，女，硕士，主治医师，主要从事呼吸病学研究。