降低仙客来组培苗成本的研究初报

伊万伟 李方华 张永久 崔兴林

（酒泉职业技术学院生物工程系，甘肃酒泉 735000）

降低仙客来组培苗成本的研究初报

伊万伟 李方华 张永久 崔兴林

（酒泉职业技术学院生物工程系，甘肃酒泉 735000）

以仙客来种子无菌培养获得的叶片为外植体，研究了培养基成分的廉价替代、培养基成分含量的降低对仙客来组织培养的影响。试验结果表明，用食用白砂糖替代分析纯蔗糖，用自来水替代蒸馏水，培养基大量元素含量降低1/2，其培养效果和常规MS培养基效果基本相似，而成本可大幅降低。

仙客来；组织培养；成本降低

仙客来（Cyclamen persicum）是报春花科仙客来属半耐寒多年生球茎类草本植物，花色艳丽，花期长（约6个月），深受人们喜爱，具有较高的观赏价值和经济价值。目前，用植物组织培养的方法对仙客来进行繁殖能够保持其优良性状并具有较高繁殖率［1］，但是，在仙客来组培快繁过程中，芽的诱导率低、污染率高和培养基成本大等原因，造成组培成本较高，严重制约了仙客来组培苗工厂化生产的发展。本试验从降低仙客来组织培养成本入手，分析培养基成分的廉价替代和成分含量的降低对仙客来继代培养和生根培养的影响，以期降低仙客来组培苗的成本，为仙客来组培苗工厂化生产提供技术支撑。

1 材料与方法

1.1 试验材料

仙客来种子（兰州昶荣园林有限公司提供）用流水冲洗20min，然后在35～40℃无菌水中浸泡12h，取出后用70%酒精浸泡1min，再用无菌水冲洗3次，然后用0.1%升汞溶液浸泡并震荡8min，最后用无菌水冲洗6次。将处理过的种子用无菌滤纸吸干水分，接入MS培养基（3%蔗糖、0.5%琼脂，pH值5.6～5.8）上，每瓶培养基接种3粒种子。培养温度15～20℃，经过45d培养后，90%种子长出白色小根，70d后，植株长大，展开2片叶片，获得无菌苗。

1.2 试验方法

1.2.1 培养基成分的廉价替代

组织培养过程中，分别用食用白糖和自来水代替分析纯蔗糖和蒸馏水来配制继代培养基和生根培养基，以常规配制的MS培养基为对照，研究廉价替代后的培养基对仙客来继代培养和生根培养的影响。

1.2.2 培养基成分量的降低

在继代培养阶段，用1/2MS、1/3MS培养基［2］进行仙客来的增殖培养，观察增殖情况，分析培养基成分量的降低对增殖培养的影响。

2 结果与分析

2.1 培养基成分的廉价替代

由表1可知，在仙客来继代培养阶段，用食用白砂糖代替分析纯蔗糖，芽的增殖倍数为4.1倍，用自来水代替蒸馏水，芽的增殖倍数为4.4倍，而常规MS培养基则为4.6倍。由表2可知，在仙客来生根培养阶段，用食用白砂糖代替分析纯蔗糖，仙客来发根率为79.3%；用自来水代替蒸馏水，发根率为79.0%；常规MS培养基发根率为80.0%。试验结果表明，在仙客来继代培养和生根培养阶段，用食用白砂糖代替分析纯蔗糖和用自来水代替蒸馏水，培养效果基本相似。

表1 培养基成分廉价替代对仙客来继代培养的影响

表2 培养基成分廉价替代对仙客来生根培养的影响

2.2 培养基成分量的降低

由表3可知，在仙客来继代培养过程中，1/2MS培养基芽的增殖倍数为4.4，且芽长势良好，1/3MS培养基芽的增殖倍数为2.5，MS培养基芽的增殖倍数为4.6。试验结果表明，在培养基大量元素降低情况下，1/2MS培养基的继代培养效果和MS培养基基本相同，而1/3MS培养基不论芽增殖倍数还是其生长情况都有所下降。

表3 培养基成分量的降低对仙客来继代培养的影响

3 结论与讨论

试验结果表明，培养基成分的改变和含量的降低可有效降低仙客来组织培养的成本。用食用白砂糖替代分析纯蔗糖，用自来水替代蒸馏水，将培养基大量元素含量降低1/2，仙客来培养的效果和常规MS培养基效果基本相似，而成本可大幅降低。然而，造成仙客来组培成本高的原因还有高污染、低诱导率等，因此，系统的降低组培成本需要在此基础上进一步探寻可能的措施或方法。

［1］余会宁.仙客来的离体无性试管繁殖研究［J］.氨基酸和生物资源，2001，23（3）：21～23。

［2］龚一富.植物组织培养实验指导［M］.北京：科学出版社，2011∶15～36.