仙客来种子的无菌培养试验

李方华

（酒泉职业技术学院生物工程系，甘肃酒泉 735000）

仙客来种子的无菌培养试验

李方华

（酒泉职业技术学院生物工程系，甘肃酒泉 735000）

本文以仙客来种子为外植体进行无菌培养，研究了硫酸处理、不同温度的水处理、赤霉素处理对仙客来种子无菌萌发的影响。试验结果表明，用1moL/L硫酸处理仙客来种子40min和用40℃温水浸种处理，仙客来种子无菌萌发效果相对较好。

仙客来；种子；组织培养

仙客来（Cyclamen persicum）为报春花科仙客来属半耐寒多年生球茎类草本植物，花色艳丽，花期约6个月，深受人们喜爱，具有较高的观赏价值和经济价值。采用植物组织培养的方法对仙客来进行繁殖能够保持其优良性状并具有较高繁殖率［1］，但在组培过程中，种子无菌培养阶段存在种子萌发率低的问题，严重制约组培快繁。本试验通过研究不同处理方法对仙客来种子无菌培养的效果，以期寻找较好的解决方法。

1 材料与方法

1.1 试验材料

仙客来种子由兰州昶荣园林有限公司提供。

1.2 试验方法

A组：用1moL/L硫酸溶液分别浸泡仙客来种子10min、20min、30min、40min、50min、60min，然后捞出种子，用蒸馏水浸种24h；B组：分别用30℃、40℃、50℃、60℃蒸馏水浸种5h，待水温自然降至室温后再浸种24h；C组：分别用20mg/kg、50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg、300mg/kg、400mg/kg赤霉素溶液浸种24h，然后用蒸馏水清洗数次，再用蒸馏水浸种24h。将各组处理的种子分别用70%酒精浸泡1min，用无菌水冲洗3次，然后用0.1%升汞溶液浸泡并震荡8min，用无菌水冲洗6次。将处理过的种子用无菌滤纸吸干水分，无菌接种于MS培养基（3%蔗糖、0.5%琼脂，pH值5.6～5.8）上。每瓶培养基接种3粒种子，培养温度15～20℃，观察种子萌发情况。

2 结果与分析

2.1 1moL/L硫酸溶液浸种不同时间对仙客来种子萌发的影响（A组）

由表1可知，用1moL/L硫酸溶液浸泡仙客来种子，处理时间不同，种子的发芽率有所不同，处理40min，仙客来种子发芽率较高，这可能是硫酸处理后仙客来种子增强了透性。

表1 1moL/L硫酸溶液浸种不同时间仙客来种子的发芽率

2.2 不同温度浸种对仙客来种子萌发的影响（B组）

由表2可知，不同温度浸种对仙客来种子的萌发影响不同，用40℃温水浸种效果最好，萌发率达70%，随着温度的升高，种子萌发率下降，可能是温度过高损伤了种胚。

表2 不同温度浸种仙客来种子的发芽率

2.3 不同浓度赤霉素溶液对仙客来种子萌发的影响（C组）

由表3可知，不同浓度的赤霉素溶液处理对仙客来种子萌发的影响不同，浓度为100mg/kg时，种子萌发效果相对较好，为23%，随着浓度的升高，种子的萌发率并没有提高。

表3 不同浓度赤霉素溶液浸种仙客来种子的发芽率

3 小结

仙客来种子种皮较厚，胚根不易突破种皮，在发芽过程中会产生休眠［2］。试验结果表明，采用一定浓度的硫酸溶液处理和温水浸种可提高仙客来种子的萌发率，原因可能是处理后消减了种皮对萌发的阻碍；用100mg/kg赤霉素溶液处理也可提高仙客来种子的萌发率，但是效果不够理想。仙客来种子无菌萌发率不高可能是多方面综合影响的结果，还需要进一步开展相关试验进行分析和研究。

［1］余会宁.仙客来的离体无性试管繁殖研究［J］.氨基酸和生物资源，2001，23（3）：21～23。

［2］王娟.仙客来种子萌发的研究［J］.山东农业科技，2007（3）：21.