低增殖活性胃肠神经内分泌肿瘤组织中IMP3的表达及意义

尓丽绵，吴明利，李 勇，谭碧波，高 扬，王顺平，丁 妍，杨会钗

低增殖活性胃肠神经内分泌肿瘤组织中IMP3的表达及意义

尓丽绵1，吴明利1，李 勇2，谭碧波2，高 扬1，王顺平1，丁 妍3，杨会钗3

目的 探讨胰岛素样生长因子Ⅱ mRNA结合蛋白3(insulin-like growth factor ⅡmRNA binding protein 3, IMP3)在低增殖活性胃肠神经内分泌肿瘤(gastrointestinal neuroendocrine tumor, GI-NET)组织中的表达及意义。方法 采用免疫组化法检测IMP3在GI-NET中的表达，并复习相关文献。结果 IMP3在GI-NET细胞质中的表达，阳性率为67.5%(81/120)，增殖分级G1及G2中阳性率分别为61.9%、80.5%，两组相比差异有统计学意义(P=0.046)；IMP3过表达与肿瘤大小及微创治疗预后相关(P<0.05)，肿瘤浸润至黏膜下层以下组中IMP3表达亦高于局限于黏膜层组，但差异无统计学意义(P>0.05)。结论 IMP3可能在GI-NET的增殖生长中起重要作用。IMP3蛋白可能成为GI-NET的内镜诊疗效果及预后评价的指标。

胃肿瘤；胃肠神经内分泌肿瘤；IMP3；内镜

胰岛素样生长因子Ⅱ mRNA结合蛋白3(insulin-like growth factor Ⅱ mRNA binding protein 3, IMP3)是一种具有高度保守性的mRNA结合蛋白，在正常成人体内通常检测不到，但在胚胎期水平较高，对胚胎的发育有一定的促进作用。病理状态下，IMP3表达与多种恶性肿瘤相关[1]，其与胃肠神经内分泌肿瘤(gastrointestinal neuroendocrine tumor, GI-NET)的关系尚未见报道。为探讨IMP3在分化良好的低增殖活性GI-NET中的表达，本实验采用免疫组化法检测经内镜切除或活检GI-NET组织中IMP3的表达，并进一步结合内镜下形态及术后病理分析在预后良好的GI-NET中IMP3的预警作用，进一步分析IMP3与GI-NET生物学特性的相关性。

1 材料与方法

1.1 材料 收集2006年1月～2014年12月河北医科大学第四医院收治的资料完整、诊断明确的GI-NET患者120例，男性59例，女性61例，年龄19～79岁，平均(52±12.5)岁，108例接受内镜微创切除术，9例手术，3例姑息治疗。纳入及排除标准：所选病例均为病理免疫组化证实为GI-NET，且依据WHO胃肠胰神经内分泌肿瘤的诊断及分级标准[3]符合病理增殖分级G1、G2。排除并发其他肿瘤及接受过放、化疗的患者。排除内镜切除切缘阳性患者。记录所有患者的年龄、性别、肿瘤的功能状态、发生部位、分级(G1、G2级)、转移情况及治疗方法等。本实验通过医院伦理委员会审核，所有入选患者及健康体检者均签署知情同意书。

1.2 免疫组化 标本均经10%中性福尔马林固定，常规石蜡包埋，4 μm厚切片，HE染色，光镜观察，免疫组化采用SP两步法。石蜡标本常规切片，脱蜡至水后，于抗体修复液中微波修复，详细步骤按试剂说明书进行。染色设已知阳性对照，阴性对照用PBS替代，DAB显色，苏木精对比染色。免疫组化抗体IMP3稀释比为1 ∶100，购自美国Immuway公司，IMP3阳性为细胞质呈棕黄色。将阳性染色细胞数>30%记为阳性。

2 结果

2.1 临床及内镜下病理特征 120例GI-NET中男性59例，女性61例，年龄19～79岁，平均年龄(52±12.5)岁，增殖分级G1期84例，G2期36例。GI-NET多位于胃及直肠(113/120)，肿瘤直径多<2 cm(111/120)，内镜下形态多表现为黏膜下肿物(89/120)，其次为息肉型及平坦充血型。120例均有完整随访资料，随访时间截至2015年6月，中位随访时间40个月(7～99个月)。

2.2 IMP3在GI-NET中的表达 IMP3主要表达于细胞质，在部分细胞胞核中也有表达(图1)。GI-NET中IMP3的阳性率为67.5%%(81/120)，其中G1期为61.9%，G2期为80.5%，两组相比差异有统计学意义(P=0.046)。

图1 GI-NET中IMP3呈胞质弥漫强阳性，SP两步法

2.3 IMP3表达与GI-NET临床及内镜下病理特征之间的关系 IMP3表达与患者性别、年龄及浸润深度无明显相关(P=0.647、0.237、0.064)，而与肿瘤的增殖分级、肿瘤大小及内镜微创治疗预后存在相关关系：即IMP3阳性率随肿瘤分级的增高而增高(P=0.046)。瘤体直径>2 cm的IMP3表达高于瘤体直径≤2 cm组，内镜微创治疗复发组中IMP3表达明显增高(表1)。

3 讨论

神经内分泌肿瘤(neuroendocrine neoplasm, NEN)是一组来源神经内分泌细胞的少见肿瘤，这些肿瘤在神经内分泌标志物的表达和生长形式上有一些共同特点，他们可以分泌多肽从而引起激素分泌综合征[2-3]。可发生于全身许多器官和组织，其中以胃肠胰NEN最为常见。在WHO(2010)分类[4]中NEN根据组织学和增殖活性分为神经内分泌瘤(neuroendocrine tumors, NET)、神经内分泌癌(neuroendocrine carcinoma, NEC)和混合型神经内分泌腺癌。G1级和G2级归为NET范畴。GI-NET即上述分级中的NET G1及G2，是一类发生于胃肠道、Ki-67增殖活性较低(<20%)的NEN。多为无功能性，呈惰性生长。GI-NET起源于胃肠黏膜Lieberkuhn隐窝深部肠嗜铬样细胞(Kulchitsky)，该细胞来源于胚胎神经嵴，是胃肠道中分布最广、数量最多的神经内分泌细胞，可以分泌5-羟色胺、组胺、缓激肽、激肽释放酶和前列腺素等20余种物质，引起皮肤潮红、腹泻、腹痛、呼吸困难、心血管异常等临床综合征，即类癌综合征。文献报道[5]GI-NET类癌综合征发生率不足10%。本组120例患者均未出现类癌综合征症状；GI-NET生长缓慢，临床上主要表现为非特异的消化系统症状，早期不易发现并诊断。

表1 IMP3表达与胃肠神经内分泌肿瘤临床病理特征的关系

*Fisher检验

GI-NET术前超声内镜检查可以确定肿瘤大小、浸润深度、周围邻近脏器有无侵犯以及周围有无肿大的淋巴结，对于肿瘤术前分期、临床选择治疗方式可以提供很好的指导作用[6-7]，可明确病变浸润层次更为安全有效的指导内镜下切除，如黏膜下层完整，病灶直径均<2 cm，可采用EMR术，省时且减少并发症，如黏膜下层受侵者则采取ESD术，以确保病变被完整切除。本组120例患者均经超声内镜检查明确病变深度，其中108例接受镜下切除治疗，近年来通过Ki-67阳性指数及核分裂象数进行对肿瘤增殖活性的评估。国外学者对NET的生物学行为研究发现肿瘤直径<1 cm且分化良好者转移率为2%，>1 cm者转移率达3%～8%[8]。既往研究大多提示直径<2 cm且未见淋巴结转移的GI-NET胃镜治疗安全有效[9]，这与我们的研究结果一致，本组中3例转移患者肿瘤直径均>2 cm。108例接受内镜下切除术患者随访7～99个月，23例患者再次追加镜下治疗。

IMP3是一种癌胚蛋白，可表达于人类多种肿瘤的细胞质，而在癌旁正常组织中几乎不表达，是肿瘤细胞增殖以及转移的关键因素之一[10-11]。IMP3可间接调控IGF-Ⅱ基因表达，而IGF-Ⅱ通过激活和结合IGFI受体使酪氨酸激酶氧化磷酸化，氧化磷酸化的IGFI受体再将促有丝分裂的信号传到细胞内，促进肿瘤细胞有丝分裂、抑制凋亡[12]。近年来文献报道[13-14]显示，IMP3表达与原发性消化道肿瘤、肺癌、肾癌、恶性间皮瘤等相关，并且提示远处癌转移的可能性和不良的预后。Del Gobbo等[15]对76例肺NEN进行观察，发现IMP3与肺NEN预后相关，并与Ki-67增殖指数分级相关，>4%的非典型NEN复发及转移率较高。

综上表明，IMP3可能在肿瘤浸润和转移中发挥重要作用。对本组内镜切除或活检的NET组织，通过免疫组化检测肿瘤组织中IMP3表达，发现IMP3在G2期GI-NET中IMP3阳性率高于G1期GI-NET，进一步结合内镜下形态及术后病理分析发现GI-NET组织内IMP3的表达与肿瘤大小相关，肿瘤浸润至黏膜下层组中IMP3表达也呈升高趋势，由此推测IMP3蛋白可能在NET的增殖及侵袭中起着某种至关重要的作用。且在内镜微创随访中发现微创治疗复发再次治疗组中IMP3阳性率高于随访无明显变化组。由此推测IMP3或许可能成为GI-NET的内镜诊疗效果及预后评价的指标，这有待于大样本临床内镜治疗病例的积累及长期的临床观察。

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河北省医学科学研究重点课题(20160620、ZL2014 0022)

河北医科大学第四医院1内镜科、2外三科、3病理科，石家庄 050010

尔丽绵，女，博士，副主任医师。E-mail: hbsyelm@163.com 李 勇，男，博士，主任医师，通讯作者。E-mail: li_yong_hbth@126.com

时间：2017-8-20 15:27 网络出版地址：http://kns.cnki.net/kcms/detail/34.1073.R.20170820.1527.018.html

R 735.2

A

1001-7399(2017)08-0910-03

10.13315/j.cnki.cjcep.2017.08.018

接受日期：2017-03-28