亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与马来酸依那普利叶酸片疗效分析

夏洪颖，章体玲，王杨，黄帮华，李仲昆，王丽军，梁月琴

亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与马来酸依那普利叶酸片疗效分析

夏洪颖1，章体玲1，王杨1，黄帮华2，李仲昆1，王丽军3，梁月琴1

目的 分析亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）基因多态性与马来酸依那普利叶酸片治疗H型高血压患者疗效的相关性。方法 选取昆明医科大学附属延安医院心内科于2013年10月～2015年9月间收治的H型高血压患者168例，男性84例，女性84例。将患者随机分为观察组（85例）和对照组（83例）。对照组口服依那普利片，观察组口服马来酸依那普利叶酸片，疗程均为4周。治疗前检测所有入选者MTHFR基因型。用药前及用药4周后测定患者血浆同型半胱氨酸（Hcy）和血压。结果 治疗后两组血压和Hcy较治疗前均明显下降，观察组较对照组下降更明显，差异有统计学意义（P均＜0.05）。两组患者MTHFR基因型为CC、CT和TT，基因型频率比较，差异无统计学意义（P均＞0.05）。治疗4周后，观察组CC、CT和TT基因型Hcy水平较对照组均有所下降，差异有统计学意义（P均＜0.05）。观察组CC、CT和TT基因型Hcy水平比较，差异无统计学意义（P均＞0.05）。结论 马来酸依那普利叶酸片可以明显改善H型高血压患者血压及Hcy水平，疗效优于单用依那普利；不同MTHFR基因型H型高血压患者疗效无明显差异。本研究样本量较小，有待大样本研究进一步验证本结论。

甲基四氢叶酸还原酶；基因多态性；马来酸依那普利叶酸；H型高血压；疗效

1 资料与方法

1.1 研究对象和分组 选取昆明医科大学附属延安医院心内科于2013年10月～2015年9月间收治的H型高血压患者168例，其中男性84例，女性84例。所有患者均符合2013版欧洲高血压防治指南诊断标准，且血浆Hcy≥10 μmol/L。将患者随机分为观察组（85例）和对照组（83例）。观察组男性44例，女性41例，年龄（61.7+15.6）岁，体重（56.1±8.7）kg，收缩压（155.7±17.7）mmHg，舒张压（95.1±6.8）mmHg，Hcy（16.7 ±6.5）mmol/L。对照组男性40例，女性43例，年龄（60.3±16.8）岁，体重（54.9±9.1）kg，收缩压（153.4±19.3）mmHg，舒张压（94.0±7.9）mmHg，Hcy（17.0±7.3）mmol/L。两组患者的性别比、年龄、体重、血压和Hcy等临床指标比较，差异无统计学意义（P均＞0.05），具有可比性。排除标准：①继发性高血压；②糖尿病；③严重心、脑、肝、肾疾病；④肿瘤；⑤心肺功能不全；⑥近3个月内服用B族维生素及叶酸。本研究经本院伦理委员会批准且患者知情同意。

1.2 治疗方法 对照组口服依那普利片（江苏扬子江制药有限公司）5 mg/次，1/d；观察组口服马来酸依那普利叶酸片（杭州默沙东制药有限公司）10 mg/次，1/d，疗程均为4周。

1.3 观察指标 ①治疗前采集所有入选者晨起空腹肘静脉血2 ml，加入EDTA抗凝，在l h内4℃离心（3500 r/min）10 min。采用血液基因组DNA提取试剂盒提取基因组DNA，并于-20℃保存。使用亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）基因677C/T检测试剂盒（PCR—RFLP法）进行基因分析。含Hinf I限制性酶切位点片段。引物序列如下：P1：5'-TGAAGGAGAAGGTGTCTGCGGGA-3'，P2：5'-GGACGGTGCGGTGAGAGTG-3'；②Hcy测定：用药前及用药4周后，采集患者10 ml静脉血，乙二胺四乙酸抗凝，离心分离血浆，冷冻保存，成批测定Hcy值；③ 血压测定：用药前及用药4周后，上午8～10时测量血压，每次测定3次，取均值。

1.4 统计学方法 采用SPSS 20.0统计软件对数据进行分析，计量资料采用均数±标准差（x±s）表示，两组间均数的比较采用t检验，计数资料采用例数（构成比）表示，组间比较采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者血压及Hcy变化情况 治疗后两组血压和Hcy较治疗前均明显下降，观察组较对照组下降更明显，差异有统计学意义（P均＜0.05）（表1）。

2.2 两组患者MTHFR基因型频率比较 两组患者MTHFR基因型为CC、CT和TT，基因型频率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）（表2）。

2.3 两组患者不同MTHFR基因型治疗前后Hcy水平比较 与治疗前比较，治疗后观察组和对照组不同基因型Hcy水平均下降，差异有统计学意义（P均＜0.05）。治疗4周后，观察组CC、CT和TT基因型Hcy水平较对照组下降更明显，差异有统计学意义（P均＜0.05）。观察组CC、CT和TT基因型Hcy水平比较，差异无统计学意义（P均＞0.05）（表3）。

表1 两组患者治疗前后血压及Hcy比较

表2 两组患者MTHFR基因型频率比较（n，%）

表3 两组患者不同MTHFR基因型治疗前后Hcy水平比较（μmol/L）

3 讨论

HHcy是心脑血管疾病的危险因素。相关资料显示血浆Hcy水平上升幅度与脑卒中的发生率增加有关，并提示心血管疾病的发病风险[4]。降压及降低Hcy水平对降低脑卒中发生同样重要[5]。研究发现[6,7]，通过补充叶酸可降低患者Hcy水平，进而降低高血压患者脑卒中、冠心病等的发生率。美国一项研究证实[8]，ACEI类药物与叶酸是控制脑卒中双降策略的最佳组合，在已进行叶酸强化的地区，心脑血管事件的风险仍能下降19%。我国研发的马来酸依那普利叶酸片是目前治疗H型高血压的主要药物。研究显示，观察组治疗后血压及Hcy水平较对照组下降明显。

MTHFR是人体内Hcy代谢的限速酶，MTHFR基因突变发生在C677T和A1298C[9,10]。C677T突变可引起MTHFR活性变化，进而影响Hcy代谢。研究显示[10]，血浆Hcy升高与MTHFR基因突变后导致相应酶活性下降密切相关。研究未发现不同基因型间的疗效差异，可能与纳入样本较少有关。

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[3] 王美堂,李强,韩凤来,等. 血浆叶酸、同型半胱氨酸水平及亚甲基四氢叶酸还原酶基因突变与静脉血栓栓塞症[J]. 中华内科杂志,2012,43(8)：591-5.

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本文编辑：姚雪莉

Gene polymorphism of MTHFR and curative effect of Enalapril Maleate-Folate Tablets

Xia Hongying*, Zhang Tiling, Wang Yang, Huang Banghua, Li Zhongkun, Wang Lijun, Liang Yueqin.
*Department of Pharmacy, Yan'an Hospital, Kunming Medical University, Kunming 650000, China.

Liang Yueqin, E-mail: 398872956@qq.com

Objective To analyze the correlation between the gene polymorphism of methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) and curative effect of Enalapril Maleate-Folate Tablets in treatment of H-type hypertension. Methods The patients with H-type hypertension (n=168, male 84 and female 84) were chosen from the Department of Cardiology of Yan’an Hospital affiliated to Kunming Medical University from Oct. 2013 to Sept. 2015. All patients were randomly divided into observation group (n=85) and control group (n=83). The control group was given Enalapril Tablets and observation group was given Enalapril Maleate-Folate Tablets for one therapeutic course (4 weeks). The genotypes of MTHFR were measured in all selectees before treatment, and the levels of plasma homocysteine (Hcy) and blood pressure (BP) were detected before and 4 weeks after treatment. Results The levels of BP and Hcy decreased significantly in 2 groups after treatment, and the decrease was more significant in observation group (all P＜0.05). The genotypes of MTHFR were CC, CT and TT in the patients in 2 groups, and the comparison in genotype frequency showed that the difference had no statistical significance between 2 groups (all P＞0.05). After treatment for 4 weeks, the level of Hcy decreased in patients with genotypes of CC, CT and TT in observation group compared with the patients in control group (all P＜0.05). The comparison in Hcy level among genotypes of CC, CT and TT in patients in observation group showed that the difference had no statistical significance (all P＞0.05). Conclusion Enalapril Maleate-Folate Tablets can obviously improve the levels of BP and Hcy, and its curative effect is better than that of single Enalapril Tablets in patients with H-type hypertension. The curative effect has no significant difference among patients with different genotypes of MTHFR. As the sample size is small in this study, the study with larger sample size is needed to further verify the conclusion.

Methylenetetrahydrofolate reductase; Gene polymorphism; Enalapril Maleate-Folate Tablets; H-type hypertension; Curative effect

R544.1

A

1674-4055(2017)08-0917-03

伴同型半胱氨酸升高（Hcy≥10 μmol/L）的高血压为H型高血压。我国高血压患者中H型高血压比例约75%[1]。高同型半胱氨酸血症（HHcy）是心脑血管疾病的独立危险因素[2]。Hcy是蛋氨酸的中间代谢产物，其代谢过程可由蛋氨酸合酶催化为蛋氨酸，维生素B12是该酶的辅酶，5-甲基四氢叶酸为底物。亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）是Hcy代谢途径中的关键酶[3]，MTHFR编码基因第677位C→T突变（MTHFR C677T）可影响Hcy代

基因项目：云南省应用基础研究计划项目(2013FZ287)

1650000 昆明,昆明医科大学附属延安医院药学部;2650000 昆明,云南省第一人民医院药学部;3650000 昆明,昆明市第一人民医院泌尿外科

梁月琴,E-mail：398872956@qq.com

10.3969/j.issn.1674-4055.2017.08.05谢。本研究分析了MTHFR基因多态性与依那普利叶酸片治疗H型高血压疗效的关系。