王保有周双海
(1天津宁河原种猪场,天津宁河 301504;2北京农学院,北京 102206)
两种猪圆环病毒2型疫苗临床免疫效果的比较
王保有1周双海2*
(1天津宁河原种猪场,天津宁河 301504;2北京农学院,北京 102206)
选取国内商业PCV2疫苗A和B,在一个大型猪场进行小型田间试验。将36头母猪随机平均分成3组,每组母猪所产仔猪在14日龄分别接种疫苗A(A组)、疫苗B(B组)、生理盐水 (C组,对照)。采集免疫后不同时间的仔猪血清,检测PCV2抗体,比较各组的发病率、死亡率与增重。结果显示,接种疫苗组与对照组的仔猪发病率与死亡率都低、且无差异;但接种PCV2疫苗的两组都显著 (<0.05)提高了增重,并改善了血清中PCV2抗体变化趋势。另外,A组的临床数据稍优于B组。检测结果表明,仔猪免疫PCV2疫苗的临床效果明显优于未免疫组,PCV2疫苗A的临床免疫效果稍好于疫苗B,为试验猪场今后进行PCV2疫苗免疫提供了实验依据。
PCV2;PCV2疫苗;仔猪;临床免疫效果
猪圆环病毒2型(PCV2)是引起猪的断奶后多系统衰竭综合征(PMWS),繁殖障碍、皮炎与肾炎综合征(PDNS),猪呼吸道病综合征(PRDC)等多种猪圆环病毒病(PCVD)的病原。其中以PMWS的危害最为严重,给世界养猪业造成了巨大经济损失[1,2]。目前,以PMWS为主的PCVD仍在不少国家发生和流行[3],是当前国内养猪生产需要重点注意和防控的一种主要传染病。
疫苗免疫已成为控制PMWS的重要措施。目前国外有5种商业PCV2疫苗投入临床使用,包括2种全病毒灭活疫苗和3种亚单位疫苗,这些疫苗都可用于仔猪免疫,其中1种还可用于母猪免疫[4,5]。临床试验资料显示,这些商业疫苗都显示出较好的免疫保护效力,能够有效地降低免疫仔猪的死亡率与淘汰率、增加平均增重、提高生产性能和经济效益[6-11]。但是,这些国外的商业化PCV2疫苗的价格比较昂贵,难以被中国养猪企业广泛接受。
目前,一些国内疫苗企业也有商业化PCV2疫苗,多是全病毒灭活疫苗,主要有江苏南农高科技股份有限公司和普莱柯生物工程股份有限公司(SH株)及上海海利生物技术股份有限公司和中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(LG株)等。这些疫苗应用于断奶仔猪已经显示出一定临床效果,但仍需进行进一步的试验。因此,本试验旨在基于国内PCV2 LG株和SH株两种毒株来源的商业PCV2灭活疫苗进行小型临床免疫效果的比较试验,以期为一些规模化猪场选用国内商业PCV2疫苗提供试验依据。
1.1 试验用猪
试验猪为长白仔猪。从50头怀孕母猪中选择年龄、胎次、营养状况、抗体水平、饲养条件相近的36头经产母猪,每12头母猪产下的仔猪作为一组,共分成三组。第一组仔猪在14日龄肌肉注射1头份PCV2疫苗A(A组);第二组仔猪在14日龄注射1头份PCV2疫苗B(B组);第三组仔猪在14日龄注射2 mL灭菌生理盐水(C组,作为对照组)。仔猪均于28日龄断奶、30日龄转入保育猪舍,每组占用一个单元猪舍。试验全程对仔猪的饲养管理按照相关规程进行。在试验期间每天观察仔猪的健康状况,并统计死淘情况。在仔猪注射PCV2疫苗或生理盐水后0天、14天、28天、42天、56天,从每组仔猪中随机挑选20头分别从前腔静脉采血5 mL,室温静置6小时,4 000转/分离心6分钟,分离出血清注入1.5 mL的EP锥形管中,做好标记,于-80℃保存,用于ELISA抗体检测。
1.2 抗体检测
对采集分离的怀孕母猪和试验组、对照组待检血清按照试剂盒的说明书进行PCV2抗体检测。在使用前,试剂盒的各个组分都必须恢复到室温,试剂应充分混匀。
分别统计不同处理组数据,用方差分析对相关数据进行统计学分析。
2.1 仔猪的增重
数据显示,A组与B组之间的平均增重没有显著差异(>0.05),但A组与B组的平均增重均显著高于C组( <0.05)。由此可见,接种PCV2疫苗没有对仔猪的生长发育造成不良影响,并且A、B组猪群的增重情况高于C组。
表1 PCV2疫苗接种猪的增重
2.2 猪血清中PCV2抗体变化
图1 仔猪血清中PCV2抗体水平变化
表2 不同时间段仔猪血清中PCV2抗体的OD值及阳性率
抗体检测结果见表2、图1。在14日龄(免疫后0天)时,不同组仔猪血清中PCV2抗体水平接近,抗体阳性率都为100%。A、B两组在14日龄注射PCV2疫苗,到28日龄(免疫后14天)时PCV2抗体水平轻微下降,抗体阳性率也不到100%;C组抗体水平明显下降,显著(<0.05)低于A组与B组,抗体阳性率明显低于100%。之后,三个组的PCV2抗体水平都上升,A组与B组的抗体水平与抗体阳性率都高于C组,其中A组抗体水平显著(<0.05)高于C组;同时,A组抗体水平整体高于B组,其中在42日龄达到显著水平。
2.3 猪的临床变化与死淘情况
在试验期间,个别瘦弱仔猪有腹泻症状,其他仔猪临床表现正常,采食量正常。在试验阶段,A组有3头瘦弱仔猪出现腹泻、气喘后死亡,B组死亡5头,C组死亡5头。总的来看,各组之间仔猪的发病率、死亡率与淘汰率等都小,且无明显差异。
由PCV2引起的猪断奶后多系统衰竭综合征(PMWS)等多种猪圆环病毒病(PCVD)是当前中外养猪业面临的、需要着重防控的一种主要的病毒性疾病,控制该病的一种重要措施就是进行疫苗免疫。目前国外有5种可用于仔猪免疫的商业PCV2疫苗,其临床免疫保护效果虽好,但价格较高。国内疫苗厂商自2010年也陆续推出了国产商业PCV2疫苗,价格相对低廉,但不同厂商PCV2疫苗的选用毒株、生产工艺及佐剂等不尽相同,临床使用效果反映不一,故本研究选取了2种国内厂家生产的商业PCV2疫苗在一家PCV2阳性猪场进行了仔猪的临床免疫比较试验。
临床生产数据显示,疫苗A免疫组135头,死亡5头,死亡率3.7%;疫苗B免疫组131头,死亡5头,死亡率3.8%;对照组128头,死亡5头,死亡率3.9%。各组之间基本接近,说明在本次试验环境下,是否接种PCV2疫苗对仔猪的发病率与死亡、淘汰率没有明显影响。增重数据显示,疫苗A组与疫苗B组之间的平均增重基本接近,两个疫苗免疫组的平均增重均显著高于对照组。很多临床研究报道,进行PCV2疫苗免疫后明显降低了仔猪死亡率、提高了仔猪增重[12],但本研究中仅提高了仔猪增重。出现这种差异的原因很可能主要与猪场的健康状况有关,这些试验研究都是在发生严重PMWS的猪场进行的[13],但本研究的试验猪场在试验期及其前后3个月内的所有疾病的发病率与死亡率都很低,可以说是处于一个相对稳定、健康的状态,因此未能观察到疫苗免疫降低仔猪死亡率的明显效果。由于猪圆环病毒病是一种多因子疾病,单独的PCV2感染很难引起临床疾病,往往需要与猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪肺炎支原体等病原共同感染才能引起明显发病[14-16],这也间接说明该试验猪场在试验期前后一段时间内与PCV2具有协同致病作用的病原的感染数量少或无。另外一个可能原因是本试验的样本数不太大。但即使这样,仍然观察到仔猪增重明显提高的现象,这说明即使在健康状况良好的猪场进行PCV疫苗免疫,仍然可以促进仔猪生长,提高仔猪生产性能,从而增加经济效益。章红兵等[17]的试验研究也有类似报道。
对2种国产商业PCV2疫苗进行了一次小型田间试验,结果显示:2个PCV2疫苗免疫组都显著提高了仔猪增重,明显改善了抗体水平及其整齐度;另外,接种疫苗A的数据稍优于接种疫苗B。田间试验表明,仔猪免疫PCV2疫苗的临床效果优于未免疫组,PCV2疫苗A的临床免疫效果稍好于疫苗B。
[1]Opriessnig T,Meng XJ,Halbur PG.Porcine circoviruses type 2-associated disease:update on current terminology, clinical manifestations,pathogenesis,diagnosis,and intervention strategies[J].J Vet Diagn Investig,2007,19:591-615.
[2]Segalés J,Allan GM,Domingo M.Porcine circovirus diseases[J].Anim Heanth Res Rev,2005,6:119-142.
[3]Ge X,Wang F,Guo X,et al.Porcine circovirus type 2 and its associated diseases in China[J].Virus Res,2012,164(1-2): 100-106.
[4]Beach NM,Meng XJ.Efficacy and future prospects of commercially available and experimentalvaccines against porcine circovirus type 2 (PCV2)[J].Virus Res,2012,164(1-2): 33-42.
[5]Chae C.Commercially porcine circovirus type 2 vaccines: efficacy and clinical application [J].Vet J,2012,194(1-2): 151-157.
[6]Pejsak Z,Podgorska K,Truszczynski M,et al.Efficacy of different protocols of vaccination against porcine circovirus type 2 (PCV2)in a farm affected by postweaning multisystemic wasting syndrome (PMWS)[J].Comp Immunol Microbiol InfectDis,2010,33(6):1-5.
[7]Fachinger V,Bischoff R,Jedidia SB,et al.The effect of vaccination against porcine circovirus type 2 in pigs suffering from porcine respiratory disease complex[J].Vaccine,2008,26 (11):1488-1499.
[8]Lyoo K,Joo H,Caldwell B,et al.Comparative efficacy of three commercial PCV2 vaccines in conventionally reared pigs[J].Vet J,2009,189(1):58-62.
[9]Segalés J,Urnizac A,Alegrea A,et al.A genetically engineered chimeric vaccine against porcine circovirus type 2 improves clinical,pathological and virological outcomes in postweaning multisystemic wasting syndrome affected farms[J].Vaccine,2009,27:7313-7321.
[10]Martelli P,Ferrari L,Morganti M,et al.One dose of a porcine circovirus 2 subunitvaccine induces humoral and cell-mediated immunity and protects against porcine circovirusassociated disease under field conditions[J].Vet Microbiol,2011, 149(3-4):339-351.
[11]Takahagi Y,Toki S,Nishiyama Y,et al.Differential effects of porcine circovirus type 2 (PCV2)vaccination on PCV2 genotypes at Japanese pig farms[J].J Vet Med Sci,2010,72(1): 35-41.
[12]Cline G,Wilt V,Edler R.Efficacy of immunizing pigs against porcine circovirus type 2 at three or six weeks of age[J].Vet Rec,2008,163:737-740.
[13]Chae C.Postweaning multisystemic wasting syndrome: a review of aetiology,diagnosis and pathology[J].Vet J,2004, 168(1):41-49.
[14]Allan GM,Kennedy S,McNeilly F,et al.Experimental reproduction of wasting disease and death by co-infection of pigs with porcine circovirus and porcine parvovirus[J].J Comp pathol,1999,121(1):1-11.
[15]Harms PA,Sorden SD,Halbur PG,et al.Experimental reproduction of severe disease in CD/CD pigs concurrently infected with type 2 porcine circovirus and porcine reproductive and respiratory syndromevirus[J].Vet Pathol,2001,38(5):528-539.
[16]Opriessnig T,Thacker EL,Yu S,et al.Experimental reproduction of postweaning multisystemic wasting syndrome in pigs by dual infection with Mycoplasma hyopneumoniae and porcine circovirus type 2[J].Vet Pathol,2004,41(6):624-640.
[17]章红兵,杜震宇,严新兴,等.猪圆环病毒2型灭活疫苗免疫效果试验[J].中国猪业,2016(1):44-46.
S852.65
:A
:1673-4645(2017)08-0067-04
2017-05-23
王保有(1981-),男,天津市宁河人,主要从事猪场疾病防控,E-mail:djtliuyujie@126.com
*通讯作者:周双海(1972-),男,博士,副教授,主要从事动物分子病毒学与免疫学研究、动物传染病诊断与防治,E-mail:shhaizhou@bac.edu.cn