桥本甲状腺炎患者血清中白细胞介素- 12、- 17、- 23和单核细胞趋化蛋白- 1的表达

刘 锐 姜凤伟 任 卓 马 敏

(锦州医科大学附属第一医院内分泌科，辽宁 锦州 121000)

桥本甲状腺炎患者血清中白细胞介素- 12、- 17、- 23和单核细胞趋化蛋白- 1的表达

刘 锐 姜凤伟 任 卓 马 敏

(锦州医科大学附属第一医院内分泌科，辽宁 锦州 121000)

目的 检测桥本甲状腺炎患者血清中白细胞介素(IL)- 12、IL- 17、- 23和单核细胞趋化蛋白(MCP)- 1的表达，探讨其临床意义。方法 确诊为桥本甲状腺炎患者的血清标本59例为观察组，20例经体检证实为健康成人的血清标本为对照组，应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测两组血清中IL- 12、IL- 17、IL- 23和MCP- 1的表达。结果 两组血清中IL- 12、IL- 17、IL- 23和MCP- 1的表达差异有统计学意义(P<0.05)。观察组中IL- 17、IL- 23和MCP- 1的表达与钙化灶密切相关，IL- 12的表达与钙化灶无明显相关性，四者的表达与纤维化无关。线性相关分析显示观察组IL- 17和IL- 23呈正相关，其他指标间无相关性。结论 桥本甲状腺炎患者血清中IL- 12、IL- 17、IL- 23和MCP- 1的表达升高，对病变的形成有重要作用。IL- 17、IL- 23和MCP- 1升高可能与钙化灶的形成有一定关联性。

桥本甲状腺炎；白细胞介素- 12；白细胞介素- 17；白细胞介素- 23；单核细胞趋化蛋白- 1

桥本甲状腺炎是最常见的甲状腺炎症疾病，是器官特异性自身免疫性疾病，女性多见，临床表现主要是机体内产生特异性甲状腺自身抗体，在局部甲状腺组织内浸润大量的淋巴细胞〔1〕。晚期出现组织的纤维化，同时甲状腺功能下降，病变形成和发展过程中血清中相关指标可以出现明显变化〔2〕。白细胞介素(IL)- 12、- 17和- 23是机体中免疫相关因子和炎性相关因子，研究显示三者可能在自身免疫性疾病中表达异常〔3,4〕。单核细胞趋化蛋白(MCP)- 1是CC亚族趋化因子，主要来源于单核/巨噬细胞，MCP- 1与CC受体作用后可以趋化和活化单核巨噬细胞、T细胞和自然杀伤(NK)细胞，对炎性细胞发挥免疫反应有重要价值。本研究关注桥本甲状腺炎患者血清中IL- 12、IL- 17、IL- 23和MCP- 1的表达特征，分析其临床意义。

1 资料与方法

1.1 临床资料 2015年1月至2016年6月锦州医科大学附属第一医院确诊为桥本甲状腺炎的59例患者作为观察组，其中男10例，女49例，年龄45～78(平均56)岁。均经临床症状、实验室检查及术后病理诊断。排除标准：①伴有其他内脏器官恶性肿瘤；②近3个月伴有感染；③其他自身免疫性疾病患者。甲状腺功能正常30例，甲状腺功能低下29例。20例体检证实为健康成人血清标本作为对照组，其中男6例，女14例，年龄46～63岁，平均50.4岁。两组年龄、性别构成无明显差异。

1.2 血清中IL- 12、IL- 17、IL- 23和MCP- 1的检测方法 观察组和对照组均抽取清晨的空腹静脉血3 ml，2 000 r/min离心15 min后分离血清，置于-20℃冰箱中冻存。血清中IL- 12、IL- 17、IL- 23和MCP- 1的检测应用酶联免疫吸附试验，由同一技师进行操作，按说明书进行操作，减少误差，做好质控。

1.3 统计学方法 采用SAS6.12统计软件进行t检验、方差分析、线性相关性分析。

2 结 果

2.1 血清IL- 12、IL- 17、IL- 23和MCP- 1在两组表达比较 两组血清IL- 12、IL- 17、IL- 23和MCP- 1表达差异显著(P<0.05)。见表1。

表1 两组血清中IL- 12、IL- 17、IL- 23和MCP- 1表达的比较

2.2 观察组不同临床病理特征中IL- 12、IL- 17、IL- 23和MCP- 1表达的比较 观察组中IL- 17、IL- 23和MCP- 1的表达与钙化灶密切相关，IL- 12的表达与钙化灶无明显相关性，四者表达与纤维化无相关性。见表2。

2.3 观察组中IL- 12、IL- 17、IL- 23和MCP- 1表达的相关性 观察组IL- 17和IL- 23呈正相关(r=0.47,P=0.042 7)，其他指标间无相关性(P>0.05)。

表2 观察组不同临床病理特征中IL- 12、IL- 17、IL- 23和MCP- 1表达的比较

3 讨 论

现在的观点认为桥本甲状腺炎在遗传易感因素与环境因素相互影响的基础上，机体免疫系统紊乱所致，病变发生过程中辅助T细胞的活化起到了重要的作用〔5〕。相关研究认为桥本甲状腺炎的病理特征和甲状腺功能低下与体内出现Th1细胞优势群体及其分泌的细胞因子有关〔6〕。Th17细胞活化后可以表达IL- 17、IL- 25、IL- 22等细胞因子〔7〕。研究认为CD8阳性的T细胞及在固有免疫应答中发挥作用的T细胞也可以产生IL- 17〔8,9〕。IL- 17是含有两条136个氨基酸链的同源二聚体分子，IL- 17能与上皮细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞等多种细胞表面的相关受体进行有效结合发挥其生物学功能〔10〕。IL- 17可以激活促炎因子，促进前炎性因子的分泌，同时引起趋化因子的释放，对慢性炎症的形成及维持起一定作用〔11〕。IL- 23结构特征为IL- 12 P40亚单位和IL- 23 P19亚单位构成的异二聚体，与IL- 12的生物学作用一定的协同性，IL- 23来源于激活的单核细胞、NK细胞和B细胞等，其作用特征为刺激T淋巴细胞和NK/T细胞的分泌和激活，引起CD4+的T细胞向Th1细胞进行转化，提高NK/T细胞及相关毒性T细胞的杀伤作用〔12,13〕。也有观点认为IL- 23作为体内重要的免疫调节因子，能高效诱发免疫因子和炎性因子的级联反应〔14〕。IL- 12是多活性的Th1细胞因子，有3种分泌形式：异二聚体P70、同二聚体P402、单体P40。IL- 12的重要作用是可以引起T细胞和NK细胞的分泌现象，使组织中CD4+T细胞向Th1细胞分化，提高NK细胞的杀伤功能〔15,16〕。MCP- 1作为趋化因子亚家族成员之一，能促进细胞迁移，同时具有调节神经功能和免疫活性的作用，其对ILs家族的相关成员也有一定的调节作用〔17〕。

本研究提示IL- 12、IL- 17、IL- 23和MCP- 1表达升高是促进桥本甲状腺炎形成的重要内环境因素。四者升高与自身免疫性损伤有直接关系，病变的形成也是炎性反的结果。提示IL- 17、IL- 23和MCP- 1是促进钙化结节形成的因素，由于钙化结节在一定程度上有提示肿瘤的风险的作用，因此IL- 17、IL- 23和MCP- 1表达升高与甲状腺乳头状癌可能有一定关联。甲状腺滤泡上皮表达的MCP- 1主要趋化单核细胞和T淋巴细胞，诱导其向病变部位聚集，调节肿瘤坏死因子和白三烯的释放，促进炎症反应的发生。也有研究认为MCP- 1可以趋化B细胞及树突细胞向炎症部位及血液中聚集〔18〕。但是其具体机制有待更多实验研究证实。本文结果发现IL- 12作为促炎因子与IL- 17和IL- 23的作用可能不完全一致。提示桥本甲状腺炎中IL- 17和IL- 23的表达具有正向协同作用。IL- 17可以与炎性因子IL- 23、肿瘤坏死因子- α有协同作用，放大其致炎症的作用，同时有效激活免疫效应，此时适应免疫的系统可以通过IL- 17和固有免疫系统相联系并促进桥本甲状腺炎的形成〔19〕。IL- 23是促进Th17细胞分化的关键细胞因子，但是IL- 23能促进IL- 17的分泌，提高Th17细胞的效应，但IL- 23并不是促进Th17分化的因素〔20〕。因此即使IL- 23的缺陷或分泌减少也不影响Th17的分化〔21〕。初始T细胞能在树突细胞或Treg细胞及其产生的炎性因子IL- 6的作用下分化形成Th17细胞，而且转化生长因子可以上调IL- 23受体的表达〔22〕，因此IL- 12和IL- 17的调节及影响因素较多，具体调节过程有待更多研究证实。

1 崔 巍,施秉银.自身免疫性甲状腺病甲状腺内Th1/Th2平衡偏移研究〔J〕.西安交通大学学报(医学版),2003;24(2):167- 8.

2 Mcintosh RS,Asghar MS,Kemp EH,etal.Analysis of immunoglobulin G kappa antithyroid peroxidase antibodies from different tissues in Hashimoto′s thyroiditis〔J〕.J Clin Endocrinol Metab,1997;82(11):3818- 25.

3 吴汉妮,余 玲,屈新才,等.IL- 23、 IL- 17在桥本氏甲状腺炎患者甲状腺组织中的表达〔J〕.细胞与分子免疫学杂志,2008;24(12):1182- 4.

4 张进安,张 健,徐 利,等.自身免疫甲状腺病患者血清中IL- 12和IL- 18水平的分析〔J〕.细胞与分子免疫学杂志,2006;22(5):630- 2.

5 李 宏,刘戈力.IL- 12及IL- 10在桥本甲状腺炎发病机制中作用的研究进展〔J〕.国际内分泌代谢杂志,2006;26(1):72- 4.

6 郭小楠,宋厂义,郑向红.131I治疗Graves病和HT甲亢患者治疗前后血清IL- 12、IL- 18的变化〔J〕.放射免疫学杂志,2006;19(6):449- 51.

7 余 玲,吴汉妮,屈新才,等.IL- 17在桥本甲状腺炎甲状腺组织中的表达研究〔J〕.中国免疫学杂志,2009;25(2):185- 7.

8 谢荣章,叶伙梅,袁炜华.桥本甲状腺炎患者甲状腺组织中IL- 17的表达研究〔J〕.重庆医学,2013;24(21):2536- 8.

9 Bossowski A,Moniuszko M,Dabrowska M,etal.Role of Th17 cells and IL- 17,IL- 23 cytokines in pathogenesis of autoimmune thyroid disease in children〔J〕.Thyroid Res,2013;6(2):8.

10 Lee YC,Chung JH,Su KK,etal.Association between interleukin 17/interleukin 17 receptor gene polymorphisms and papillary thyroid cancer in Korean population〔J〕.Cytokine,2015;71(2):283- 8.

11 Liu B,Lai W,Meyerle C,etal.Complement component C5a promotes expression of IL- 22 and IL- 17 from human T cells and its implication in age- related macular degeneration〔J〕.J Transl Med,2011;9(1):1- 12.

12 肖 波,吴汉妮,余 玲,等.白细胞介素- 23在桥本甲状腺炎甲状腺组织中的表达及其意义〔J〕.骨科,2008;32(4):281- 3.

13 Ruggeri RM,Saitta S,Cristani M,etal.Serum interleukin- 23 (IL- 23) is increased in Hashimoto′s thyroiditis〔J〕.Endoc J,2014;61(4):359- 63.

14 Stevic S,Mirjana S,Stefanic M,etal.Peripheral T- cell gene expression analysis of IL- 23/Th17 members in patients with Hashimoto′s thyroiditis〔J〕.PLoS One,2014;7(9):e45693.

15 Hong LI.IL- 12,IL- 10 and Hashimoto thyroiditis〔J〕.Int J Endocrinol Metab,2006;107(4):602- 6.

16 Halacheva K,Gerenova J,Dimova S.Increased levels of serum interleukin- 12 in patients with autoimmune thyroid disease〔J〕.Clin Appl Immunol,2006;5(1):538- 42.

17 林志波,黄海忠.支气管哮喘儿童血清IL- 16、IL- 35、MCP- 1的水平变化及临床意义〔J〕.现代医院,2015;15(2):25- 8.

18 任欣会,张会娟,高慧祯.趋化因子MIP- 1α、MIP- 1β、MCP- 1在自身免疫性甲状腺疾病中的表达及意义〔J〕.重庆医科大学学报,2013;25(7):776- 9.

19 柳迎昭,朱晨露,田 洁,等.桥本甲状腺炎患者Th17细胞比例升高〔J〕.中华内分泌代谢杂志,2012;28(8):638- 40.

20 陈万志,余济春,余志坚.桥本氏甲状腺炎患者Th17与调节性T细胞免疫失衡的研究〔J〕.国际免疫学杂志,2011;34(4):307- 10.

21 柳迎昭,彭辉勇,王 丽,等.桥本甲状腺炎患者外周血IL- 23水平及意义〔J〕.江苏大学学报(医学版),2015;35(4):331- 4.

22 Gerenova J,Manolova I,Stanilova S.Impact of IL- 10 and IL- 12B single nucleotide polymorphisms on circulating cytokine level in development of Hashimoto′s thyroiditis〔J〕.Biotechnol Biotechnol Equip,2016;3(2):1- 8.

〔2017- 02- 15修回〕

(编辑 苑云杰)

刘 锐(1977- )，女，硕士，主治医师，主要从事内分泌与代谢性疾病研究。

R581.4

A

1005- 9202(2017)15- 3754- 03；

10.3969/j.issn.1005- 9202.2017.15.049