老年非小细胞肺癌患者中外周血T细胞的表达与癌胚抗原表达的相关性

刘东利,张宇祥,杜延玲

(延安大学附属医院 呼吸内科，陕西 延安716000)

老年非小细胞肺癌患者中外周血T细胞的表达与癌胚抗原表达的相关性

刘东利,张宇祥,杜延玲

(延安大学附属医院 呼吸内科，陕西 延安716000)

目的 探讨老年非小细胞肺癌患者中外周血T细胞的表达与癌胚抗原(CEA)表达的相关性。方法 采用前瞻性方法，2013年5月到2015年5月选择在我院经病理确诊的65例老年非小细胞肺癌患者作为观察组，同期选择在我院进行体检的健康老年人65例作为对照组，两组都进行外周血T细胞表达检测与血清CEA表达检测，同时进行相关性分析。结果 观察组与对照组的血清CEA含量分别为34.45±14.19 ng/mL和2.19±0.13 ng/mL，观察组明显高于对照组(P<0.05)。观察组的总T细胞比例为2.53±2.19%，明显低于对照组的6.54±2.98%(P<0.05)，同时观察组的CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+的比例也明显低于对照组(P<0.05)。Spearman秩相关分析结果显示老年非小细胞肺癌患者外周血总T细胞比例与血清CEA含量之间的表达呈现明显负线性相关(r=-0.569，P<0.05)；Cox多因素分析结果显示总T细胞、CD3+、CD3+CD4+的比例为影响CEA表达的独立影响因素(P<0.05)。结论 老年非小细胞肺癌患者中外周血T细胞与CEA表达都呈现异常情况，外周血T细胞下降与CEA高表达可能具有一定相关性，为此检测外周血T细胞与CEA表达可评价患者疾病状况。

老年人；非小细胞肺癌；外周血T细胞；癌胚抗原；相关性

(ChinJLabDiagn,2017,21:1329)

非小细胞肺癌是严重威胁我国人民生命健康的恶性肿瘤，多发病于老年人[1]。由于早期发病比较隐匿，很多患者在发病时以为晚期，导致治疗效果欠佳，总体5年生存率不到20.0%，为此早发现和提高诊断率成为提高患者生存率的关键[2]。当前临床上多依靠影像学诊断和病理学对肺癌进行诊断，但是效果一直不太好。现代研究表明非小细胞肺癌的产生与遗传、环境因素等多种因素是密切相关的，其中血清肿瘤标志物是由于恶性肿瘤细胞异常而产生的物质，能反映肿瘤发生、发展情况[3,4]。癌胚抗原(CEA)是一种细胞内糖蛋白，是目前诊断非小细胞肺癌应用最常用的一种肿瘤标志物，但是在早期筛查非小细胞肺癌上仍有一定的局限性[5,6]。现代研究表明恶性肿瘤的发生、发展与机体的细胞免疫功能状态密切相关，生理状态下免疫系统能够清除出现的突变细胞[7,8]。T细胞构成细胞免疫的主要部分，肿瘤患者的外周血T细胞亚群存在异常情况，也表明T细胞亚群在机体细胞免疫调控和抗肿瘤免疫中起主导作用[9]。本文为此具体探讨了老年非小细胞肺癌患者中外周血T细胞的表达与癌胚抗原表达的相关性，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 研究对象

采用前瞻性方法，2013年5月到2015年5月选择在我院经病理确诊的65例老年非小细胞肺癌患者作为观察组，纳入标准：均未经任何治疗；排除远处转移；年龄≥60岁。其中男36例，女29例；年龄最小61岁，最大84岁，平均年龄73.13±5.29岁；病程最短3个月，最长2年，平均为1.98±0.45年；平均体重指数为21.09±1.87 kg/m2；临床分期：Ⅰ期20例，Ⅱ期20例，Ⅲ10例，Ⅳ15例；分化程度：低分化15例，中分化26例，高分化24例。同期选择在我院进行体检的健康老年人65例作为对照组，其中男38例，女27例；年龄最小60岁，最大89岁，平均年龄73.13±5.29岁。两组都排除术前曾有过恶性肿瘤病史(包括非小细胞肺癌患者)，合并心、肝、胃等重要脏器的疾病患者，妊娠与哺乳期妇女；研究得到医院伦理委员会的批准与入选者的知情同意。两组的性别、年龄等对比无明显差异(P<0.05)。

1.2 外周血T细胞表达检测

分别抽取两组入选者的外周抗凝血2 ml，采用直接免疫荧光标记法进行实验，选择连接有荧光素的抗体进行免疫标记反应，上FACS流式细胞仪(BD FACS Calibur)检测后，用系统配套的软件进行数据分析，计算与检测总T细胞比例、CD3+占淋巴细胞比例，CD3+CD4+、CD3+CD8+占CD3+T细胞比例，检测试剂购于美国BD公司。

1.3 CEA检测

分别抽取两组入选者的空腹静脉血3 ml，静置20 min,3 000 rpm 的转速离心5 min，取上层血清置于-20℃低温冰箱保存待测，所用仪器为罗氏全自动电化学发光免疫分析仪，Roche公司提供检测试剂盒，CEA的检测方法为电化学发光免疫分析法，均严格按照仪器和试剂盒说明书进行。

1.4 统计方法

2 结果

2.1 血清CEA含量对比

经过检测，观察组与对照组的血清CEA含量分别为34.45±14.19ng/mL和2.19±0.13ng/mL，观察组明显高于对照组(P<0.05)，见表1。

表1 两组血清CEA含量对比

2.2 外周血T细胞对比

经过检测，观察组的总T细胞比例为2.53±2.19%，明显低于对照组的6.54±2.98%(P<0.05)，同时观察组的CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+的比例也明显低于对照组(P<0.05)，见表2。

表2 两组外周血T细胞对比

2.3 相关性分析

在观察组患者中，我们把外周血总T细胞比例与血清CEA含量进行Spearman秩相关分析，结果显示老年非小细胞肺癌患者外周血总T细胞比例与血清CEA含量之间的表达呈现明显负线性相关(r=-0.569，P<0.05)。

我们也对老年非小细胞肺癌患者中外周血T细胞表达与CEA表达经Cox多因素分析，结果显示总T细胞、CD3+、CD3+CD4+的比例为影响CEA表达的独立影响因素(P<0.05)，见表3。

表3 老年非小细胞肺癌患者中外周血T细胞表达与CEA表达的多因素Cox回归分析

3 讨论

由于各种因素的影响，当前我国老年人非小细胞肺癌的发病率正迅猛增长，是造成癌症相关性死亡的最主要病因，已成为我国部分城市人口恶性肿瘤死亡原因的第一位。同时很多患者在第一次就诊时，病变已属中晚期而失去手术机会，为此早期诊断与病情判断有助于改善预后[10]。

伴随着分子生物学标志物的发展，越来越多的血清肿瘤分子标志物开始应用于临床，其有利于对非小细胞肺癌进行早期诊断与治疗[11]。癌胚抗原(CEA)是一种位于细胞质内的糖蛋白，正常胚胎的消化管组织中也存在一定量的癌胚抗原，也可微量存在于正常个体血清中，而在多数癌组织中呈现高表达状况[12]。研究显示非小细胞肺癌患者的血清中CEA的检测和诊断的灵敏度在40.0%左右，CEA还可以用于疾病预后的辅助诊断，可作为非小细胞肺癌复发的监视器[13]。本研究显示观察组与对照组的血清CEA含量分别为34.45±14.19 ng/mL和2.19±0.13 ng/mL，观察组明显高于对照组(P<0.05)，说明老年非小细胞肺癌患者中CEA呈现高表达状况。

当前研究证据表明肺癌的发生、发展与机体的免疫功能密切相关。生理状态下免疫系统能够清除突变细胞及早期的肿瘤细胞，而细胞免疫缺陷者可导致肿瘤发病率高，同时肿瘤负荷使宿主免疫系统的功能失衡，形成恶性循环[14]。在机体细胞免疫系统中，T细胞作为主要的效应细胞，可通过T细胞亚群来完成复杂的免疫调控。T细胞也可根据细胞表面分子又分为几大亚类，从而在维持机体免疫平衡中均起着各自的作用[15]。本研究显示观察组的总T细胞比例为2.53±2.19%，明显低于对照组的6.54±2.98%(P<0.05)，同时观察组的CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+的比例也明显低于对照组(P<0.05)，也表明观察组患者存在明显的细胞免疫紊乱状况。从机制上分析，肿瘤可能通过不表达MHC Ⅰ类分子，下调T细胞的激活表位；同时肿瘤细胞分泌趋化因子可趋化T细胞至肿瘤局部，发挥免疫抑制效应[16]。

CEA 是一种重要的广谱性肿瘤标志物，对肺癌的判断疗效、监控病情、监测与预后分析都有一定的价值，CEA 的高表达状况与非小细胞肺癌的病情与病理状况也有一定的相关性，但其具有不强的特异性[17，18]。而当前T细胞及抑制分子在肿瘤的发生、发展、侵袭及转移中的作用日渐受到重视[19-21]；不过由于肿瘤免疫微环境构成复杂，且机体细胞免疫调节受多因素影响，还需要进行进一步分析。本研究Spearman秩相关分析结果显示老年非小细胞肺癌患者外周血总T细胞比例与血清CEA含量之间的表达呈现明显负线性相关(r=-0.569，P<0.05)；Cox多因素分析结果显示总T细胞、CD3+、CD3+CD4+的比例为影响CEA表达的独立影响因素(P<0.05)，说明老年非小细胞肺癌患者外周血T细胞的下降表达可影响肿瘤细胞的理化性质及其代谢情况，造成CEA的异常高表达。

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The correlation analysis between peripheral blood T cells expression and tumor antigen expression in the elderly patients with non small cell lung cancer

LIUDong-li,ZHANGYu-xiang,DUYan-ling.

(DepartmentofRespiratoryMedicine,AffiliatedHospitalofYan'anUniversity,Yan'an716000,China)

Objective To investigate the correlation analysis between peripheral blood T cells expression and tumor antigen(CEA) expression in the elderly patients with non small cell lung cancer.Methods Used a prospective method,From May 2013 to May 2015,65 elderly patients with non small cell lung cancer by pathological diagnosis in our hospital were selected as the observation group,and the medical examination of the health of the elderly 65 cases were selected at the same period as the control group,two groups were given the peripheral blood T cells expression detecting and serum CEA detection and correlation analysis.Results The serum CEA levels of the observation group and the control group were 34.45±14.19 ng/mL and 2.19±0.13 ng/mL,the observation group was significantly higher than that of the control group (P<0.05).The total T cell ratio in the observation group was 2.53±2.19%,which was significantly lower than that of the control group of 6.54±2.98%(P<0.05),and the ratios of CD3+,CD3+CD4+and CD3+CD8+in the observation group were significantly lower than that in the control group (P<0.05).Spearman rank correlation analysis showed that the peripheral blood T cell ratio and serum CEA levels in the elderly patients with non small cell lung cancer patients were showed a significantly negative linear correlation(r=0.569,P<0.05).Cox multivariate analysis showed that the ratios of total T cells,CD3+,CD3+CD4+expression were the independent influence factors for the CEA levels(P<0.05).Conclusion The peripheral blood T cells and CEA expression in the elderly patients with non small cell lung cancer patients are showed abnormal situation,the decrease of peripheral blood T cells and the high expression of CEA may have some correlation,lfor the detection of peripheral blood T cells and CEA expression can evaluate the status of patients.

Elderly;non small cell lung cancer;peripheral blood T cell;tumor antigen;correlation

1007-4287(2017)08-1329-04

R734.2

A

2016-07-18)