铁皮石斛组培苗生根技术研究

郜李彬 曹征宇 顾韵莉 周亚辉 （上海市浦东新区农业技术推广中心 201201）

铁皮石斛组培苗生根技术研究

郜李彬 曹征宇 顾韵莉 周亚辉 （上海市浦东新区农业技术推广中心 201201）

为加快铁皮石斛的繁殖速度、降低其生产成本、实现铁皮石斛的产业化生产，通过设计不同生根培养基配方和不同培养条件，进行了其生根试验研究。结果表明，生根培养基配方对铁皮石斛组培苗出根率的影响最大，其次为光照强度，但光照时间对出根率的影响不显著。铁皮石斛组培苗生根的最佳实验室环境条件为光照强度为2 000 Lx，培养室温度调控在（20±2）℃，最佳生根培养基为1/2 MS+NAA 0.1 mg/L+香蕉汁100 mg/ L。

铁皮石斛；生根培养；光照强度；光照时间；生根培养基；出根率

铁皮石斛为兰科多年生附生草本植物，属国家二级保护的贵重濒危药材。由于受品种特性的影响，铁皮石斛对生长环境条件的要求非常苛刻，且野生铁皮石斛的自然繁殖能力极弱、生长缓慢，目前已禁止采摘。而通过植物组培技术，可有效加快铁皮石斛的繁殖速度、降低生产成本、实现铁皮石斛的产业化生产，其中提高铁皮石斛组培苗的生根效率是实现其产业化生产的重点和难点。笔者以铁皮石斛组培苗为试验材料，通过设计不同生根培养基配方和不同培养条件进行其生根试验研究，以期为铁皮石斛产业化生产提供帮助。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验材料为增殖所得的铁皮石斛组培苗。

1.2 生根试验

在超净工作台上将铁皮石斛组培苗进行切割，切去种苗残叶、老叶和基部褐化老化组织，按照2叶1心的标准，把铁皮石斛组培苗切割分离成高度为1.5 cm左右的单株，接入不同生根培养基中，每瓶接种1株，重复10次，放入培养室中在不同环境条件下进行生根培养，接种后45 d进行出根率观察比较。

培养环境条件中，光照强度设计了1 000、2 000、4 000 Lx 3个梯度；光照时间设计了6、12、18 h/d 3个梯度；培养室温度均调控在（20±2）℃；培养基配方为：（1）MS、（2）MS+NAA 0.1 mg/L、（3）MS+NAA 0.5 mg/L、（4）MS+NAA1.0 mg/L、（5）1/2MS、（6）1/2 MS+NAA 0.1 mg/L、（7）1/2 MS+NAA 0.5 mg/L、（8）1/2 MS+NAA 1.0 mg/L，各培养基中均添加香蕉汁100 mg/L、蔗糖3%和琼脂0.6%，pH 5.6～5.8。合计216个处理。

2 结果与分析

经过45 d的生根培养，每个处理中随机选取3瓶进行生根率的统计分析（因数据较多，仅罗列各因素的平均出根率），将统计所得的数据用SPSS17软件进行多因素方差分析。

由表1、表3和表4可看出，在其他试验条件不变的情况下，培养基配方（6）的铁皮石斛组培苗平均出根率最高，达78%，显著高于其他培养基配方；平均出根率位居第2的是培养基配方（2），平均出根率为33%；其次是培养基配方（3）、（7），平均出根率分别为30%、26%；其余培养基配方的平均出根率均低于20%，生根效果较差。在其他试验条件不变的情况下，当光照强度为2 000 Lx时，铁皮石斛组培苗的平均出根率最高，达44%，显著高于光照强度为1 000、4 000 Lx。光照时间对铁皮石斛组培苗的出根率影响不大，在光照时间为6、12、18 h/d时，平均出根率分别为29%、28%、22%。

表1 铁皮石斛组培苗在不同因素下的平均出根率分析

表2 误差方差等同性的 Levene 检验分析

检验零假设，即在所有组中因变量的误差方差均相等。表2中Sig.值小于5%，说明试验数据具有统计学意义。

表3 光照强度对平均出根率影响的显著性分析

为研究不同环境条件因素对出根率的影响，用SPSS17进行主体间效应检验。由表5可知，光照强度和培养基配方的Sig.值均小于5%，说明出根率的变化由光照强度和培养基配方所决定，不同强度的光照和不同的生根培养基配方对铁皮石斛组培苗的出根率影响显著；而光照时间的Sig.值为0.495，大于5%，说明不同光照时间对铁皮石斛组培苗出根率的影响作用不显著。

表4 不同培养基配方对平均出根率影响的显著性分析

表5 主体间效应的检验分析

3 结论与讨论

试验结果表明，对铁皮石斛组培苗出根率影响最大的因素是生根培养基配方，光照强度对出根率也有一定影响，而光照时间对出根率的影响较小。因此，综合上述试验结果考虑，促使铁皮石斛组培苗生根的最佳实验室环境条件：光照强度为2 000 Lx、培养室温度调控在（20±2）℃，最佳生根培养基为1/2 MS+NAA 0.1 mg/L+香蕉汁100 mg/L。

2016-12-07