湖北地区山羊球虫感染调查与虫种形态学观察

漆明伟 , 杨 新 , 方 瑞 , 王锁开 , 胡 敏

(1.农业微生物学国家重点实验室华中农业大学动物医学院， 湖北武汉430070；2.湖南省张家界市桑植县畜牧水产局， 湖南张家界427100)

湖北地区山羊球虫感染调查与虫种形态学观察

漆明伟1, 杨 新1, 方 瑞1, 王锁开2, 胡 敏1

(1.农业微生物学国家重点实验室华中农业大学动物医学院， 湖北武汉430070；2.湖南省张家界市桑植县畜牧水产局， 湖南张家界427100)

从湖北省9个地区采集山羊粪便668份，采用饱和食盐水漂浮法和改良麦克马斯特虫卵计数法对采集的样品进行了球虫感染率和感染强度的分析，对山羊球虫种类进行了形态学鉴定。湖北地区山羊球虫总感染率为72.60%，母山羊和公山羊的球虫感染率分别为64.22%和60.06%。大于1岁、6月龄到1岁和小于6月龄山羊的球虫感染率分别为54.70%、62.87%和68.36%，不同性别和不同年龄段山羊的球虫感染率的统计学差异均不显著。天门、咸宁和恩施3个地区的平均OPG(每克粪便卵囊数)分别为2 808、1 107和910。本调查共鉴定出8种羊球虫，即阿氏艾美耳球虫(E.arloingi)、艾丽艾美耳球虫(E.alijevi)、克氏艾美耳球虫(E.christenseni)、羊艾美耳球虫(E.caprovina)、山羊艾美耳球虫(E.caprina)、家山羊艾美耳球虫(E.hirci)、约奇艾美耳球虫(E.jolchijevi)和雅氏艾美耳球虫(E.ninakohlyakimovea)。湖北省地区山羊球虫当中的优势虫种是阿氏艾美耳球虫(E.arloingi)、艾丽艾美耳球虫(E.alijevi)和克氏艾美耳球虫(E.christenseni)。

山羊 ； 球虫 ； 调查 ； 优势虫种

山羊球虫病是由寄生在山羊肠上皮细胞中的艾美耳属球虫引起的一种原虫病。患羊主要表现为消瘦，贫血，腹泻，生长缓慢等。严重感染时，可以导致羔羊死亡[1]。近年来，国内已有较多关于山羊球虫病和山羊球虫种类鉴定方面的报道[2-8]。为了查清湖北地区山羊球虫的感染情况和山羊球虫种类，并找到该地区的优势虫种，进行了本次研究。

1 材料

1.1 粪便样品 从湖北省9个地区用直肠取粪法共采集山羊粪便样品668份，分别装入干净PE手套内，标记好性别和年龄信息，带回实验室，储存于4 ℃冰箱待检。

1.2 主要仪器设备 正置显微镜、高速台式冷冻离心机、4 ℃冰箱、恒温培养箱和改良麦克马斯特计数板等。

1.3 主要试剂 饱和食盐溶液、2.5%重铬酸钾溶液等。

2 方法

2.1 粪便中虫卵的检查 采用饱和食盐水漂浮法检查，计算感染率。

2.2 卵囊计数 用改良麦克马斯特计数法对选取的阳性样品进行卵囊计数，计算感染强度。

2.3 卵囊的分离培养 将各个地区的阳性样品分别集中，称重，按照m ∶v=1∶8～10的比例加入蒸馏水，充分研磨。用60目、120目和260目的铜筛过滤3次，滤液静置过夜，弃掉2/3的上清液，剩余滤液以3 500 r/min离心10 min，弃上清，沉淀加入适量2.5%重铬酸钾溶液，置于27 ℃恒温培养箱中培养至孢子化。

2.4 孢子化卵囊的形态学鉴定 根据汪明[8]的报道进行。

2.5 数据分析 用GraphPad Prism 5软件的T test分析法对山羊球虫感染率进行分析。

2.6 优势虫种的确定 在对孢子化球虫卵囊进行形态学鉴定时，每个地区分别鉴定10～15张盖玻片1×1cm正方形内的孢子化卵囊，计算各种球虫所占百分比，百分比最高的3种球虫定为该地区的优势虫种。

3 结果

湖北部分地区山羊球虫感染率较高，最高达到83.79%，但不同性别和年龄段的山羊球虫感染率差异均不显著。天门、咸宁和恩施3个地区的平均OPG分别为2 808、1 107和910。

表1 湖北省9个地区不同性别和年龄段的山羊球虫感染情况

本研究共鉴定出8种球虫，其主要形态学特征如下：艾丽艾美耳球虫(N=143)：小型虫体，卵囊近似圆形，没有极帽，平均大小14.63×13.41 μm，形状指数为1.09，卵膜孔不明显，斯氏体明显。

羊艾美耳球虫(N=36)：中型虫体，卵囊呈短椭圆形或亚球形，无极帽，平均大小26.83×19.51 μm，形状指数为1.38，卵膜孔比山羊艾美耳球虫的宽且大，孢子囊比山羊艾美耳球虫的粗而短。

阿氏艾美耳球虫(N=178)：中型虫体，卵囊呈椭圆形且两侧较为平直，有极帽，平均大小29.27×19.51 μm，形状指数为1.50。

雅氏艾美耳球虫(N=61)：小型虫体，短椭圆形或近似亚球形，无极帽，平均大小19.51×14.63 μm，形状指数为1.33，卵膜孔不明显。

克氏艾美耳球虫(N=116)：大型虫体，卵囊为典型的卵圆形，有极帽，平均大小41.46×26.83 μm，形状指数为1.55。

山羊艾美耳球虫(N=70)：中型虫体，卵囊呈卵圆形或椭圆形，无极帽，平均大小29.27×19.51 μm，形状指数为1.50，孢子囊呈长卵圆形或尖卵圆形。

家山羊艾美耳球虫(N=67)：中型虫体，卵囊呈较宽的椭圆形或亚球形，有极帽，平均大小24.39×18.29 μm，形状指数为1.33。

约奇艾美耳球虫(N=9)：大型虫体卵囊呈典型的罐状，有极帽，平均大小29.27×21.95 μm，形状指数为1.33，卵膜孔较宽，斯氏体明显。

从表2可以看出，阿氏艾美耳球虫、艾丽艾美耳球虫和克氏艾美耳球虫出现的频率最高，分别占鉴定总数的26.18%、21.03%和20.00%，在8种球虫中所占比例最高。据此可以初步断定，湖北地区山羊的优势球虫种类是阿氏艾美耳球虫、艾丽艾美耳球虫和克氏艾美耳球虫。

表2 湖北省不同地区山羊艾美耳球虫中的优势虫种

4 讨论

国内有关山羊球虫感染的报道中，江淮地区的山羊球虫感染率低于本研究的结果[6]，而重庆、广西、河南和福建等地的山羊球虫感染率高于本研究的结果。同时，这些地区报道的山羊球虫种类也多于本研究鉴定的球虫种类[2-3,5,7]。本研究的结果显示，湖北地区山羊的球虫感染率随着年龄的增大而呈现逐渐下降的趋势，这与陶立[3]、张玲[4]和林琳[7]的报道相一致。但卫九键[5]调查河南、安徽和重庆部分地区的山羊球虫感染情况时发现，在这几个地区，球虫感染率最高的山羊集中在6～12月龄，在小于6月龄和大于12月龄的山羊中，其他年龄段，球虫感染率则较低。本调查的结果显示，湖北地区不同年龄段山羊的球虫感染率的统计学差异均不显著，这与陶立[3]和林琳[7]的结果不一致。

本研究调查发现，湖北各地区的山羊球虫感染情况有较大差异。这可能是由于这些地区的地势、气候和降雨量等有明显差异所致[9-10]。同时，依托其地势和牧草资源方面的优势，天门等地的山羊养殖业起步早，发展快，这也为山羊球虫病的流行创造了条件。

与人们对禽类、牛和兔等动物的球虫病的重视程度相比，山羊球虫病一直被广大山羊养殖者严重忽视[11]。本次的调查结果显示，湖北地区山羊的球虫感染率比较高，部分地区的感染强度较大。因此，广大山羊养殖者应该对山羊球虫病给予足够的重视，并采取有力措施防治山羊球虫病，以免导致巨大经济损失。

[1] 汪明．兽医寄生虫学[M]．3版.北京：中国农业出版社，2009: 306-307．

[2] 聂奎，袁成刚，陈洪．重庆市荣昌地区山羊球虫的种类调查[J]．四川畜牧兽医学院学报，2001(3): 28-32．

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[6] 俞涛，徐前明，陈璇，等．江淮地区山羊球虫流行病学调查[J]．安徽农业科学， 2013，41(34): 13 256-13 257．

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[9] 毕旭．湖北省气温和降水的变化特征及其与地理因子的相关性分析[D]．武汉：华中师范大学，2013．

[10] 汪高明．湖北省近47年气温和降水气候特征分析[D]．兰州： 兰州大学，2009．

[11] Ruiz A, Matos L,Munoz M C,etal. Isolation of an Eimeria ninakohlyakimovae field strain (Canary Islands)and analysis of its infection characteristics in goat kids[J].Res Vet Sci, 2013, 94: 277-284.

Investigation on the infection and morphological observation of Coccidia in Goats of Hubei District

QI Ming-wei1， YANG Xin1， FANG Rui1， WANG Suo-kai2， HU Min1

(1.State key Laboratory of Agricultural Microbiology/College of Veterinary Medicine Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China； 2.Bureau of animal husbandry and fishery of Sangzhi county, Zhangjajie 427100, China)

668 samples were collected from 9 different places ofHubei district, floatation technique using saturated sodium chloride solution and modified McMaster technique were used to analyze the prevalence and intensity of infection, and then the morphological identification of the sporulated oocysts was performed. The overall infection rate was 72.60%. The infection rate among male goats and female goats was 64.22% and 60.06%, respectively. The infection rates between age groups of more than one year old, within 6 months and 1 year old and less than 6 months were 54.70%, 62.87% and 68.36%, respectively. No significant differences were observed either in different sex groups or different age groups. The OPG from Tianmen, Xianning and Enshi was 2808, 1107 and 910, respectively. Eight eimeria species were found in the fecal samples, namelyE.arloingi,E.alijevi,E.christenseni,E.caprovina,E.caprina,E.hirci,E.ninakohlyakimoveaandE.jolchijevi. The predominant eimeria species of goats in Hubei district areE. arloingi,E. alijevi,E. christenseni.

goats; coccidia; investigation; predominant species

HU Min

2017-02-13

国家公益性行业(农业)科研专项(201303037)

漆明伟(1990-)，男，硕士，研究方向为反刍动物寄生虫病防控，E-mail：1426939785@qq．com

胡敏，E-mail：mhu@mail.hzau.edu.cn

S827.7

A

0529-6005(2017)07-0007-03