消郁安神胶囊对慢性随机温和应激大鼠行为学的影响

韦丽佳，王 惠

（1.重庆医药高等专科学校，重庆 400030； 2.重庆市药物制剂工程技术研究中心，重庆 400030）

·实验研究·

消郁安神胶囊对慢性随机温和应激大鼠行为学的影响

韦丽佳1，2，王 惠1

（1.重庆医药高等专科学校，重庆 400030； 2.重庆市药物制剂工程技术研究中心，重庆 400030）

目的观察消郁安神胶囊对慢性随机温和应激(CUMS)大鼠行为学的影响。方法以慢性随机温和应激配合孤养CUMS建立大鼠模型，灌胃给予消郁安神胶囊（3.3 mg／kg，10 mg／kg，30 mg／kg）。通过糖水偏好、高架十字迷宫试验观察大鼠行为学的变化。结果糖水偏好试验结果显示，CUMS大鼠的糖水偏好率明显降低；高架十字迷宫试验中CUMS大鼠进入开臂中的次数和停留时间所占百分比明显比正常组低；给予消郁安神胶囊后能剂量依赖性增加CUMS大鼠的的糖水偏好率，增加CUMS大鼠在开臂中的进入次数和停留时间占比。结论消郁安神胶囊能改善CUMS大鼠的抑郁行为。

消郁安神胶囊；慢性随机温和应激；糖水偏好率；高架十字迷宫

抑郁症是一种患病率、复发率、自杀率高的常见精神疾病，主要临床表现包括心境低落、兴趣减低、焦虑、饮食睡眠差等[1]。临床为了尽快缓解患者症状，控制病情进展，多采用化学药品进行治疗，但化学药品刺激性较强，不良反应较大[2]，甚至对部分患者无效。消郁安神胶囊是重庆市中药研究院研制的抗抑郁中药复方，根据中医理论采用辨证施治、标本兼治的原则，毒副作用较小且能使患者从根本上得到康复。本研究中主要以慢性随机温和应激(CUMS)建立大鼠模型，通过CUMS大鼠行为学的变化来观察消郁安神胶囊的抗抑郁作用。现报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 药品

消郁安神胶囊（重庆市中药研究院提供，批号为20120809）；舍曲林（四川省百草生物药业有限公司，批号为20120621）；羧甲基纤维素钠（CMC－Na，天津市光复精细化工有限公司，批号为20120122）。

1.1.2 动物与饲养环境

雄性SD大鼠60只（清洁级），体质量180～220 g，由重庆医科大学实验动物中心提供，动物合格证书号为SCXK（渝）2007－0001。饲养环境：重庆医科大学动物实验中心进行。需先在实验条件下饲养1周，同时实验操作员在此期间需抚触大鼠使其适应操作。复制模型前提供自由饮食、饮水，室温控制在（23±1）℃，相对湿度为45%～65%，12 h∶12 h的光－暗周期。

1.1.3 仪器

高架十字迷宫视频分析系统（EPM，中国医药科学院药物研究所）：无味医用有机板制成，在离地面50 cm高的铝制支架处有呈“＋”字交叉的两个相对闭臂和两个相对开臂。闭臂尺寸：50 cm×10 cm×40 cm，开臂尺寸：50 cm×10 cm，中央开阔部：10 cm×10 cm。开阔部和四只臂均为黑色，闭臂的上部是敞开的，迷宫上方安装录像监控器，记录动物的活动情况。

1.2 方法

1.2.1 分组及给药剂量

将大鼠随机分成6组，正常组，模型组，阳性对照组（舍曲林），消郁低剂量组[3.3 mg／(kg·d）]、中剂量组[10 mg／(kg·d)]、高剂量组[30 mg／（kg·d）]，每组10只。正常组采用10只群养，其余组均为孤养（1只／笼）。

1.2.2 CUMS大鼠造模[3]

造模周期21 d，除正常组大鼠，其余组大鼠均以慢性随机温和刺激＋孤养。为使大鼠不可预见刺激的发生，每日给予随机温和刺激（且3 d内不能重复），主要包括：游泳5 min（冰水4～5℃），游泳5 min（热水40℃），24 h禁水、禁食、禁食水，干净木屑用纯化水浸湿后成潮湿垫料，自制塑料筒(束缚4 h，长20 cm，直径10 cm，前部有换气孔，尾部可打开），24 h昼夜颠倒，消毒后的石块放入鼠笼中（异物刺激），1 h噪声刺激（1 500 Hz，92 dB）。正常组大鼠则给予充足水食、光暗周期（12 h∶12 h）、室温（23±1）℃。

1.2.3 给药

造模成功后连续给药21 d，同时继续孤养，每组每日按体质量灌胃给药（见表1）。所有灌胃药物都采用1%CMC－Na溶液配制。

1.2.4 糖水偏好试验[4]

分别在造模成功后和给药21 d后进行。测试前将1%蔗糖水（用纯化水配制）、纯化水一同放在大鼠的鼠笼上，任其自由饮用，同时提供充足的饲料，每12 h将糖水和纯化水互换位置（防止大鼠产生位置偏好），待48 h后取走所有水和食物。禁食24 h后，将相同质量的糖水和纯化水随机放在鼠笼上供其自由饮用1 h，取下糖水和纯化水分别称重，计算出糖水消耗质量（g）和纯化水消耗质量（g），利用公式计算大鼠的糖水偏好率。糖水偏好率与动物的快感程度呈正比[5]，动物快感缺失越严重则糖水偏好率的值越小。

糖水偏好率＝糖水消耗质量（g）／糖水消耗质量（g）＋纯化水消耗质量（g）×100%

1.2.5 高架十字迷宫试验(EPM)[6]

在9:00～15:00对所有大鼠平行进行，每只大鼠观察5 min，实验期间保持安静。实验室光照保持均匀恒定，不可过亮，只需能分辨出动物的细微活动即可，在EPM周围悬挂遮光布帘以维持弱光环境。大鼠测试前应先放入敞箱中（open－field test）[7]，自由活动5min后迅速移至EPM的中央开阔部，大鼠头朝向开臂，松开后即开始观察并记录下列指标：进入开臂次数（open arm entry，OE），以大鼠四肢全部进入为准，有任何1只爪子完全退出就算进入活动结束；进入开臂时间（open arm time，OT）；进入闭臂次数（close arm entry，CE），以大鼠四肢全部进入为准；进入闭臂时间（close arm time，CT）。进入开臂次数百分比和开臂停留时间百分比可反映大鼠是否存在抑郁或焦虑情绪。

1.3 统计学处理

2 结果

2.1 对CUMS大鼠糖水偏好的影响

通过测定给药前和给药后大鼠糖水偏好率，可反映大鼠的快感程度。由表2可见，造模成功后（即给药前），正常组的糖水偏好率最高，其余各组无明显差异。给予消郁安神胶囊21 d后，中剂量组与模型组大鼠的糖水偏好率有明显差异。高剂量组和阳性对照组均能显著提高CUMS大鼠的糖水偏好率。

2.2 对CUMS大鼠OE%和OT%的影响

高架十字迷宫试验结果显示，模型组大鼠进入开臂的次数和在开臂停留时间所占百分比(OE%和OT%)均较正常组明显降低。与模型组比较，消郁低剂量组无显著差异，中剂量组和高剂量组大鼠进入开臂的次数和开臂中停留时间所占百分比均显著增加。

表1 各组大鼠灌胃药物及剂量

表2 各组大鼠糖水摄入变化比较（±s，%，n＝10）

表2 各组大鼠糖水摄入变化比较（±s，%，n＝10）

注：与模型组相比， P＜0.05， P＜0.01；与正常组相比，＃P＜0.05，＃＃P＜0.01。下表同。

糖水偏好率组别正常组模型组阳性对照组消郁低剂量组消郁中剂量组消郁高剂量组造模成功后85.6±14.2 58.5±13.8 60.3±12.7 58.7±11.9 59.2±12.4 61.4±12.1给药21 d后88.3±16.4 55.4±8.9＃84.6±11.3 68.3±10.2 72.5±11.4 85.2±12.6

表3 消郁安神胶囊对CUMS大鼠OE%和OT%的影响（±s，%，n＝10）

表3 消郁安神胶囊对CUMS大鼠OE%和OT%的影响（±s，%，n＝10）

组别正常组模型组舍曲林组消郁低剂量组消郁中剂量组消郁高剂量组OE% 14.54±9.16 5.65±2.36＃13.14±9.16 6.97±5.95 11.27±6.89 15.57±8.53 OT% 25.26±10.15 6.63±3.23＃＃18.63±8.06 5.90±2.62 12.93±3.47 19.14±9.76

3 讨论

抑郁症发病原因较复杂，可由外界刺激因素引起，也可由机体病理因素产生[8]。其临床主要表现为心境低落、兴趣低下、焦虑等并伴有头晕、心悸、胸闷、失眠等植物神经功能症状[9]。根据中医辨证施治的原则，抑郁症主要是由肝气郁结，而发生肝气乘脾、损及肾，气滞、血瘀等因实致虚的病机变化引起[10]。治疗应以疏肝解郁为主，宣阳开郁是关键。国内抗抑郁中药复方制剂有无忧汤[11]、开心散[12]、柴胡舒肝散[13]等。消郁安神胶囊复方中包含的多味中药，如酸枣仁、石菖蒲[14]、知母、广藿香等，通过养肝血、补益心脾，改善虚烦不眠[15]、心悸善怒等抑郁症状。

本研究中的糖水偏好试验是检测抑郁症中快感缺失的经典方法，与正常组比较，模型组大鼠的糖水偏好率明显下降，提示以慢性随机温和应激配合孤养能成功复制CUMS大鼠模型。给予消郁安神胶囊能提高CUMS大鼠的糖水偏好率，且与剂量大小有关系。提示消郁安神胶囊对CUMS大鼠的抑郁情况有明显的改善作用。高架十字迷宫试验是焦虑型抑郁研究的经典实验，抑郁症患者多伴有一定程度的焦虑。OE%和OT%均可反映大鼠的焦虑状态，经典抗抑郁药物舍曲林能使CUMS大鼠的2个指标升高。消郁安神胶囊也能使这2个指标升高，与舍曲林具有一致性，提示消郁安神胶囊有抗焦虑作用。

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Effect of Xiaoyu Anshen Capsule on Praxiology in Chronic Unpredictable M ild Stress Rats

Wei Lijia1,2,Wang Hui1
(1.Chongqing Medical and Pharmaceutical College,Chongqing,China 400030; 2.Engineering Research Center of Pharmaceutical Sciences,Chongqing,China 400030)

Objective To investigate the effect of Xiaoyu Anshen Capsule on praxiology in chronic unpredictable mild stress(CUMS) rats.M ethods CUMS rats models were established by CUMS combined with solitary feeding.The models were given Xiaoyu Anshen Capsule(3.3 mg／kg,10 mg／kg,30 mg／kg)by intragastric administration,and then the praxiology changes in rats were observed through sugar preference and high plus maze experiment.Results The sugar preference experimental results showed that the sucrose preference partial rate of CUMS rats significantly reduced;In high plus maze experiment,the open arms entry times of CUMS rats and the percentage of stay time was significantly reduced than the normal group.Given Xiaoyu Anshen Capsule could dose dependently increase the sucrose preference partial rate of CUMS rats,and also could increase the open arms entry times and residence time ratio.Conclusion Xiaoyu Anshen Capsule can improve the depression praxiology of CUMS rats.

Xiaoyu Anshen Capsule;chronic unpredictable mild stress;sucrose preference partial rate;high plus maze

R965.2；R971＋.3

A

1006－4931(2017)13－0014－03

2017－03－09；

2017－04－17)

10.3969／j.issn.1006－4931.2017.13.004

重庆医药高等专科学校校级自然科学一般项目[ygz2013105]。

韦丽佳（1981－），女，硕士研究生，讲师，主要从事药理学、药物制剂工艺研究工作，（电子信箱）245087661＠qq.com。

王惠（1983－），女，硕士研究生，讲师，主要从事心理学、预防医学研究工作，（电子信箱）153238731＠qq.com。