五味沙棘散的抗感染及免疫调节作用

包桂兰 白月辉 汤文莉 王秀枝 梁凤娟 田伟刚 刘月英

(内蒙古民族大学医学院，内蒙古 通辽 028000)



五味沙棘散的抗感染及免疫调节作用

包桂兰 白月辉 汤文莉 王秀枝 梁凤娟 田伟刚 刘月英

(内蒙古民族大学医学院，内蒙古 通辽 028000)

目的 研究五味沙棘散的抗感染及免疫调节作用。方法 应用醋酸引起小鼠腹腔毛细血管通透性亢进炎性模型观察五味沙棘散的抗感染作用，通过给小鼠腹腔内注射鸡红细胞，分别测试小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力和小鼠血清溶血素水平，观察其免疫调节作用。结果 与空白对照组比较，五味沙棘散(0.5、1.0、2.0 g/kg)各剂量组对醋酸引起小鼠腹腔毛细血管通透性亢进具有抑制作用，对巨噬细胞吞噬百分率、吞噬指数及血清溶血素形成均有明显提高(P<0.05)。结论 五味沙棘散具有抗感染和免疫调节作用。

五味沙棘散；抗感染；免疫调节

五味沙棘散为蒙医临床常用验方。具有清热祛痰，止咳定喘功效，临床主治肺热久嗽，痰多喘促，胸中满闷，胸胁作痛等症，急慢性支气管炎见上述证候者〔1〕。实验表明五味沙棘散具有明显止咳、化痰及平喘作用〔2〕。为深入探讨五味沙棘散的药理作用及其机制，本实验探讨了五味沙棘散对炎症模型小鼠的抗感染和对免疫功能的调节作用。

1 材料与方法

1.1 实验动物、药品与试剂、仪器 昆明种小鼠，体重(20±2)g，雌雄各半，由吉林大学动物研究所实验动物繁育场提供,许可证号码SCXK(吉)2011-0004。五味沙棘散(内蒙古蒙药股份有限公司生产,批号120612)；醋酸泼尼松(天津药业集团新郑股份有限公司生产，批号110210)；盐酸左旋咪唑片(西南药业股份有限公司生产，批号130922)。SYSMESKX-21型血细胞计数仪(日本产)；UV-730分光光度计(日本)；Olympus显微镜(日本)；荧光显微镜(上海)。

1.2 实验方法

1.2.1 五味沙棘散对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性的影响〔3〕取小鼠50只，雌雄各半，随机分为5组，每组10只。分别为空白对照组(30 ml/kg)、泼尼松组、五味沙棘散低、中、高剂量组(0.5，1.0,2.0 g/kg)。各组灌胃给药40 min后，尾静脉注射伊文氏蓝0.1 ml/10 g，然后立即腹腔注射0.6%醋酸0.2 ml/只，20 min后断头处死小鼠，再腹腔注入5 ml生理盐水，轻揉腹部，剪开腹腔，吸取洗脱液于离心机上3 000 r/min离心10 min，UV-730分光光度计590 nm测定OD值(表示被测物被吸掉的光密度)。

1.2.2 五味沙棘散对巨噬细胞吞噬实验的影响〔4〕取小鼠50只，随机分成5组，每组10只。分别为空白对照组(30 ml/kg)、左旋咪唑组(50 mg/kg)、五味沙棘散低、中、高剂量组(0.5，1.0，2.0 g/kg)。灌胃每天1次给药，6 d后腹腔注射5%鸡红细胞0.4 ml/只，13 h后颈椎脱臼法处死小鼠，剪开腹部暴露腹腔脏器，吸取2 ml生理盐水冲洗，收取冲洗液摇匀，吸取0.5 ml滴于载玻片上，37℃恒温孵箱内孵育30 min后取出，生理盐水内漂洗，晾干后及时用95%乙醇固定15 min，HE染色并封片，用光学显微镜观察，计数200个巨噬细胞内吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数(吞噬率)及吞噬的鸡红细胞数(吞噬指数)。

1.2.3 五味沙棘散对血清溶血素水平的影响〔4〕取小鼠50只，与1.2.2同法分组、给药。灌胃每天1次给药，5 d后每只小鼠腹腔注射5%鸡红细胞0.3 ml进行免疫，各组小鼠再连续给药6 d后，每鼠从眼眶后静脉丛取血0.5 ml，3 000 r/min离心，取血清20 μl加入盛有1.0 ml生理盐水的试管内，加入5%鸡红细胞0.5 ml，再加1∶10豚鼠血清稀释液0.5 ml，混匀后置37℃水浴保温30 min，取出后冰水浴10 min终止反应，2 000 r/min离心10 min，取上清液1.0 ml，加都氏液(血红蛋白稀释液)3.0 ml混匀，静置10 min，在波长546 nm比色，用OD值表示血清溶血素含量。

1.3 统计学方法 采用SPSS12.0软件进行单因素方差分析。

2 结 果

2.1 五味沙棘散对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响 五味沙棘散低、中、高剂量组巨噬细胞吞噬率及吞噬指数较空白对照组均有明显提高(P<0.05)，说明五味沙棘散能增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力。见表1。

表1 各组巨噬细胞吞噬能力比较

与空白对照组比较：1)P<0.05

2.2 五味沙棘散对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性的影响 空白对照组、泼尼松组、五味沙棘散低、中、高剂量组OD值分别为0.287 5±0.061 3，0.180 7±0.076 5，0.195 9±0.078 4，0.179 5±0.033 0，0.177 3±0.031 1。五味沙棘散对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增加均有不同程度的降低作用(P<0.05,P<0.01)。

2.3 五味沙棘散对小鼠血清溶血素水平的影响 五味沙棘散中、低、高剂量组血清溶血素水平(0.265±0.017、0.271±0.015、0.273±0.021)与空白对照组比较有明显的增高(0.257±0.021，P<0.05)，说明五味沙棘散能促进小鼠血清溶血素的生成。

3 讨 论

五味沙棘散为蒙医验方，其中沙棘为君药起主导作用，直接针对主症和病患部位。沙棘中含有异鼠李素及其糖苷、槲皮素、山萘酚等7种黄铜物质，具有止咳、平喘祛痰、降低胆固醇、清除自由基等的功效〔5～7〕。栀子性味苦，寒；归心、肺、三焦经，具有泻火解毒，清热利湿，凉血散瘀等功效。木香具有行气止痛，健脾消食等功效。甘草具有补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛，调和诸药等功效等。全方共奏止咳定喘，清热祛痰，调整阴阳之功效。五味沙棘散低、中、高剂量组对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增强均有抑制作用，对免疫功能有一定的增强作用。表明此验方具有一定的抗感染和免疫增强作用。

1 杨阿敏.蒙药使用指南〔M〕.呼和浩特：内蒙古教育出版社,2001：33.

2 包桂兰，杜智敏，赵中华，等.五味沙棘散止咳祛痰平喘作用的实验研究〔J〕.现代中西医结合杂志，2009；18(3)：243-7.

3 雷 玲，王 强，白莜露，等.安息香的抗炎解热作用研究〔J〕.中药药理与临床,2012；28(2):109-10.

4 黄 利，李利民，唐丽燕，等.白术水煎剂对小鼠免疫功能的影响〔J〕.中药药理与临床,2012；28(2)：114-5.

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6 李振海，刘祥忠，付 佳，等.沙棘对辐射损伤大鼠免疫功能及清除自由基酶活力的影响〔J〕.佳木斯医学院学报，1996;19(4)：30-2.

7 于晓莉，潘雨利，侯永坤,等.沙棘提取物抗老龄鼠衰老作用的实验研究〔J〕.白求恩医科大学学报,2001;27(5)：501-2.

〔2016-04-23修回〕

(编辑 苑云杰/曹梦园)

内蒙古自然科学基金资助项目(No.2012MS1210)

包桂兰(1965-)，女，教授，硕士，硕士生导师，主要从事中蒙药抗感染免疫药理学研究。

R285.5

A

1005-9202(2017)14-3399-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.14.008