熊脱氧胆酸对实验性肝损伤模型的研究进展

张林林

【摘要】熊脱氧胆酸（ur sodeoxycholic Acid，UDCA）作为应用几十年的护肝药物，一直被作为其他护肝药物筛选的阳性对照药。但近年来，随着科学技术的不断进步，人们对肝损伤机制及UDCA保护作用有了更深一步的认识。本文对UDCA在药物性肝损伤（Drug-induced liver injury，DILI）、胆总管结扎（bile duct ligated，BDL）性肝损伤模型的应用情况进行简要概述，以期为UDCA在相关肝胆疾病的应用研究提供参考。

【关键词】肝损伤；熊脱氧胆酸

因为人类的肝纤维化造成的肝损伤是一个世界性的临床问题，急性和慢性肝功能衰竭的实验动物模型在过去的几十年里已经建立。以鼠科体系为例，常见的模型有由各种不同的肝毒素造成的损伤，胆总管的结扎，对免疫性肝损伤的诱导，和有针对性的诱导基因缺陷或转基因的过度表达从而影响肝纤维化发病机制关键的信号通路转导。UDCA经常在治疗肝损伤的动物实验中作为阳性对照药，但近来，发现UDCA易发生腹泻等不良反应，对胆结石的溶石作用也较弱、起效缓慢、疗程较长，不尽如人意。更值得注意的是，长期或过量服用UDCA可能增加胆石的钙化，还出现了UDCA对肝损害作用的报道。本文简要综述了UDCA对药物性肝损伤（Drug-induced liver injury，DILI）、胆总管结扎（bile duct ligated，BDL）性肝损伤模型的应用情况，以期为UDCA在相关肝胆疾病的应用研究提供参考。

1药物性肝损伤（DILI）

药物性肝损伤是药物开发和临床治疗面临的一个严峻的挑战。美国所有急性肝功能衰竭中一半以上都是药物性肝损伤。很多化学药物，例如醋氨酚（APAP），四氯化碳（CC14）和丙烯醇（AlOH）已经被用来作为人类曝露相关的肝毒性模型。APAP和CC14，母体化合物被CYP450酶代谢产生活性代谢产物，分别是NAPQI（N-乙酰-对-苯醌亚胺）和CC13。AlOH在肝脏被乙醇脱氢酶代谢产生活性代谢产物丙烯醛。谷胱甘肽与丙烯醛被CYP酶修饰产生缩水甘油醛。来自这些活性代谢产物的毒性是多因素的并包含脂质过氧化产生的氧化应激，改变细胞的氧化还原反应状态和蛋白质加合物形成。ANIT和胆道结扎（BDL）另一方面也被用来做胆汁淤积模型，肝胆汁流损伤造成的病理状态。ANIT（α-茶基异硫氰酸盐）产生的是肝内胆汁淤积，而BDL产生的是肝外胆汁淤积。在BDL和ANIT造成的胆汁淤积中，增加胆汁酸浓度激发活性氧产生，最终导致肝细胞坏死和凋亡。

V.SIMKO等早在94年就研究表明UDCA无论在体内或体外均没有起到改善中毒性肝损伤模型的损伤状况，在CCIA、ETH、APAP三种肝毒剂无论是联合使用或单独使用情况下。他们认为可能原因有以下三点：首先，UDCA可能对中毒性肝损伤无保护作用；二是UDCA可能对该模型的作用没有发挥其完全的代谢效应；第三，不太可能的是，UDCA的新陈代谢在大鼠与人之间存在巨大种属差异。AjishPillai，MD等报道了罕见的由补充食用大豆蛋白粉引起的DILI，并且UDCA能够缓解症状，减少瘙痒。MasoumehAsgarshirazi等报道了UDCA可以改善抗惊厥药物肝毒性引起的患儿肝脏转氨酶数量升高，利用UDCA细胞保护和抗氧化的特性。Sami Akbulut，MD等研究表明UDCA，别嘌呤醇，和褪黑激素等抗氧化剂可能有助于防止环孢素A对肝组织的损伤。Maria del Carmen Martinez等通过研究评估胆汁酸的治疗能否增加灰黄霉素诱导的原卟啉症小鼠实验模型的卟啉排泄，从而减少灰黄霉素引起的肝损伤。得出，相对于脱氧胆酸能够增加卟啉排泄、消除灰黄霉素作用、减少脂质过氧化等，UDCA不仅不能阻止卟啉的积累且降低了氨基乙酰丙酸合成酶和抗氧化防御酶系统的活性。因卵磷脂（PC）抗肝毒性的特性已作为脂质体被确认用于急性肝损伤的治疗，UDCA是在稳定细胞膜的已知的一个肝保护剂。为了肝损伤的治疗，将UDCA与磷脂偶联成为熊脱氧胆酸一溶血磷脂酰乙醇胺偶合物（UDCA-LPE）。根据WaleeChamulitrat的研究，UDCA-LPE的肝保护性能超越了UDCA和PC。UDCA-LPE作为肝保护剂可以诱导保护性PC的合成使得因急性肝损伤损耗的PC得到补充。这一特性使得UDCA-LPE成为治疗醋氨酚急性肝中毒的药物之一。

2胆总管结扎（BDL）

在大多数脊椎动物中，肝脏产生的胆汁，是使脂肪乳化吸收必须的并使脂质在小肠中得以消化以及排泄胆红素等代谢产物。肝外胆管系统的实验性梗阻启动了一个复杂的病理过程级联，导致胆汁淤积和炎症产生源自汇管区的强烈纤维化反应。因此，胆总管结扎术已成为最常用的诱导阻塞的模型。且对啮齿类动物的胆总管结扎实验程序研究已进行了多年，动物生存率高达95%以上。

从1992年Poo等研究表明UDCA限制BDL引起的大鼠肝组织改变和门静脉高压开始，二十多年来有关UDCA对BDL大鼠/小鼠的作用主要报道的都是其保护作用。如Marco Marzioni等06年报道的UDCA和TUDCA对BDL大鼠迷走神经切除后触发的胆管上皮细胞凋亡和功能性活动丧失最终导致胆管数目显著下降的状态呈Ca²⁺依赖的细胞保护作用。13年

Halka Buryova等提出UDCA对BDL诱导的C57BL/6小鼠急性胆汁淤积的保护作用部分与其抑制ADAM17（金属蛋白酶）的活性有关。同年Peter Fickert等却提出UDCA对BDLC57/BL6小鼠的损伤作用，研究显示UDCA诱导了选择性结扎小鼠（SBDL）结扎肝叶的胆汁梗阻，且诱导细胞ATP的耗竭，对胆总管结扎小鼠（CBDL）比norUDCA更具毒性。

虽然UDCA对BDL动物模型的损害作用的研究尚不充足但其结果对UDCA應用于胆汁淤积相关疾病具有重要的临床意义。

综上所述，UDCA对于不同类型的实验性肝损伤动物模型效果不一，不能一概而论，认为UDCA是护肝药物，就适用于所有肝损伤动物模型。对于BDL模型，UDCA可能就并不适合担任阳性药这个角色。且人类肝病的发病机制较为复杂，在研究其发病机制时，除应用可控的动物模型外，主要还是要选择合适的阳性对照药，才可正确分析其各种发病机制。不然分析的结果也值得质疑。