抗菌肽RISE-AP12联合中药汤剂对种植体周围炎龈沟液炎症因子的影响

董颖韬，贾斌

（北京市崇文口腔医院，北京100062）

抗菌肽RISE-AP12联合中药汤剂对种植体周围炎龈沟液炎症因子的影响

董颖韬，贾斌

（北京市崇文口腔医院，北京100062）

目的探讨抗菌肽RISE－AP12联合中药汤剂治疗对种植体周围炎龈沟液炎症因子的影响。方法选择2010年3月至2015年10月医院收治的种植体周围炎患者80例（种植体146枚），按随机数字表法分为观察组和对照组，各40例（种植体各73枚）。两组患者均行牙周基础治疗，双氧水漱口，盐酸米诺环素软膏留置，每周1次治疗，4周为1疗程，连续治疗2个疗程；口服中药汤剂，每日2次，4周为1个疗程，连续治疗2个疗程。观察组患者在此基础上加用抗菌肽RISE－AP12含漱，每日3次。结果治疗后，两组患者菌斑指数（PLI）、探诊深度（PD）和龈沟出血指数（SBI）水平均降低，且观察组降低更明显（P＜0.05）。两组患者龈沟液中白细胞介素6（IL－6）、一氧化氮合酶（NO）、基质金属蛋白酶2（MMP－2）表达均降低，且观察组降低更明显（P＜0.05）。两组患者可溶性血管黏附分子1（sVCAM－1）、E型钙黏附分子（E－cadherin）均降低，骨保护因子（OPG）均升高，且观察组变化更优（P＜0.05）。虽观察组总不良反应发生率高于对照组（P＜0.05），但症状均较轻微，不影响治疗。结论抗菌肽RISE－AP12联合中药牙周基础治疗可显著改善种植体周围炎患者的临床体征，并显著降低患者龈沟液中炎症因子、黏附因子表达，促进OPG表达，不良反应均轻微，经对症处理后不影响治疗，值得临床推广。

抗菌肽RISE－AP12；中药；种植体周围炎；牙周基础治疗；龈沟液；炎症因子

口腔种植技术是目前治疗牙缺失或受损的主要技术[1]，而种植体在口腔内存留时间是评价种植技术成功与否的重要指标。种植体周围炎是发生在已形成骨结合的种植体，在行使正常功能后出现的可逆性牙周黏膜炎症，如不及时治疗可导致骨功能丧失而使种植体松动[2－3]。研究显示[4]，在种植体植入的5～10年中约有将近1／10的患者出现种植体周围炎，表现为口腔疼痛、牙周肿胀、严重影响生活质量，目前针对此类疾病主要采用牙周基础治疗，严重者可配合口服抗生素，但抗生素因存在过敏及不良反应的问题，使其应用具有一定限制性。中医认为，种植体周围炎是外感毒邪上犯于上焦所引起的气血失和，治疗以泻热止痛、清火解毒为法[5]。口服中药汤剂以黄连上清散加减，具有清热泻火止痛的功效，可用于口腔牙龈红肿热痛等诸症。抗菌肽RISE－AP12为人工合成的新制剂，抗菌谱更广，抗耐药性更强，高效低毒，在口腔疾病的治疗中具有独特优势[6]。本研究中拟对我院种植体周围炎患者采用牙周基础治疗配合口服中药汤剂，观察其临床疗效及对龈沟液中炎症因子表达水平的影响，为临床治疗提供参考。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

纳入标准[7]：均行种植修复术超过1年；表现为种植体牙周组织充血水肿、质软，种植体无松动，周围有种植体周围袋；近中或远中的龈沟出血指数≥1；牙周探诊深度≥3 mm；种植体牙周组织可有脓液溢出或出现窦道，X线摄片显示出现骨吸收透影区。本研究经我院医学伦理委员会批准，患者均签署知情同意书。

排除标准：治疗前1个月大剂量应用抗生素、非甾体类药物或采用其他方式治疗种植体周围炎；合并其他牙周疾病；糖尿病且血糖控制不佳；白塞氏病、血管炎、结缔组织病等相关免疫疾病；合并严重脏器的器质性病变；妊娠或哺乳期；精神类疾病依从性不佳；对本研究所用药物过敏。

病例选择与分组：选择2010年3月至2015年10月在我院治疗的种植体周围炎患者80例（种植体146枚，每例患者≥1枚），按随机数字表法分为观察组和对照组，各40例（种植体各73枚）。两组患者年龄、性别、病程、种植体植入时间等一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。详见表1。

表1 两组患者一般资料比较（n＝40）

1.2 方法

所有患者均嘱咐采用漱口水清洁口腔，采用牙线等工具清洁，在此基础上给予牙周基础治疗，采用超声洁牙机行洁治术，同时采用龈上、下洁治，平整根面，调整咬合，术后采用双氧水及生理盐水反复冲洗牙周袋；采用盐酸米诺环素软膏（日本SUN－STARINC株式会社药厂，国药准字H20100244，规格为0.5 g）留置于牙周0.5 h，每周1次治疗，4周为1个疗程，连续治疗2个疗程；口服中药汤剂，组方黄连10 g，大黄10 g，连翘10 g，薄荷6 g，旋覆花6 g，黄芩10 g，荆芥6 g，栀子10 g，防风10 g，石膏15 g，桔梗6 g，黄柏10 g，蔓荆子（炒）10 g，白芷10 g，甘草6 g，加水煮至200m L，每日2次，4周为1个疗程，连续治疗2个疗程。观察组患者在此基础上给予抗菌肽RISE－AP12（美国锐瑟公司）含漱，每日3次。

1.3 观察指标与临床疗效评价标准[8]

观察患者菌斑指数（PLI）、探诊深度（PD）、龈沟出血指数（SBI）。PLI评分：无菌斑为0分，探针轻划种植体表面即可看到菌斑为1分，肉眼可见菌斑为2分，大量菌斑为3分。PD评分：保证同一医师采用均一力度使用探针探测龈缘到牙周袋底的间距，记录6个部位，分别为颊侧及舌侧的近中、中央、远中部位，取平均深度。SBI评分：保证同一医师采用均一力度使用探针沿种植体龈缘探诊，无出血为0分，点状出血为1分，线状出血为2分，重度出血为3分，自发出血为4分。

龈沟液中炎症因子：治疗前后对两组患者的牙种植体周围龈沟液采用滤纸进行提取，将龈沟液提取存放于－80℃行下一步测定。采用夹心法ELISA检测龈沟液中炎症因子，包括白细胞介素6（IL－6）、一氧化氮合酶（NO）、基质金属蛋白酶2（MMP－2）的表达。

龈沟液中黏附分子及骨保护因子（OPG）：采用同一批龈沟液标本，采用夹心法ELISA检测，包括可溶性血管黏附分子1（sVCAM－1）、E型钙黏附分子（E－cadherin），采用real－time PCR检测OPG表达。

在治疗期间密切观察两组患者的临床表现，记录不良反应发生情况。

1.4 统计学处理

采用SPSS 17.0版软件包进行数据处理。计量资料以均数±标准差（）表示，行t检验；计数资料以百分比表示，行χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

结果见表2至表5。

3 讨论

目前，口腔种植技术在全球范围内广泛应用[9]，但存在一定的远期失败率，由于清洁不当，口腔内大量细菌滋生牙菌斑，而种植体与骨组织之间缺乏天然牙齿周围的牙周膜，导致种植体缺乏一层天然的保护屏障，抵抗力差，易受细菌影响发生炎症[10]。种植体周围炎初期表现为牙周黏膜出现的炎症反应，多表现为软组织红肿，探诊可伴有出血；随着病程发展可见牙周袋形成，种植体附着水平降低出现松动，X线摄片显示种植体骨密度下降，存在骨质吸收等[11]。牙龈沟内的龈沟液具有天然的杀菌成分，当种植体周围炎发生时，龈沟液中会产生各类炎症因子，其中IL－6作为由中性粒细胞及巨噬细胞等合成分泌的一种重要趋化因子[12]，可直接参与炎症反应，并对损伤组织的细胞因子进行放大作用，对牙周组织进行损害；NO具有细胞毒作用，在炎症发生时，可被过度释放，打破局部促炎及抗炎因子的循环，加剧炎症过程；MMP－2是对牙周组织进行破坏的炎症因子，能降解胶原纤维及蛋白，破坏细胞外基质[13]。sVCAM－1及E－cadherin为具有黏附作用的免疫球蛋白，可募集更多的炎症因子向局部黏附，加重炎症反应。OPG是反应骨质破坏的一类配体，当骨质遭到炎症的破坏，破骨细胞活跃时，OPG的表达开始降低，因此可反映牙槽骨被破坏程度[14]。

表2 两组患者PLI，PD，SBI比较（s，n＝40）

表2 两组患者PLI，PD，SBI比较（s，n＝40）

注：与治疗前相比，＃P＜0.05；与对照组治疗后比较， P＜0.05。表3和表4均同。

组别PLI（分）PD（mm）SBI（分）对照组观察组治疗前2.46±0.42 2.50±0.50治疗后2.09±0.34＃1.87±0.33＃治疗前4.30±0.52 4.23±0.55治疗后3.19±0.45＃2.98±0.36＃治疗前3.62±1.02 3.65±1.04治疗后2.06±0.25＃1.81±0.23＃

表3 两组患者龈沟液中炎症因子表达水平比较（s，n＝40）

表3 两组患者龈沟液中炎症因子表达水平比较（s，n＝40）

IL－6（ng／mL）NO（ mol／L）MMP－2( g／L)组别对照组观察组治疗前39.50±2.52 39.69±2.08治疗后25.72±1.99＃22.69±1.57＃治疗前3.82±0.64 3.92±0.56治疗后1.38±0.34＃1.10±0.32＃治疗前223.10±23.01 230.45±24.97治疗后130.12±19.24＃110.01±17.00＃

表4 两组患者sVCAM－1，E－cadherin，OPG表达水平比较（s，n＝40）

表4 两组患者sVCAM－1，E－cadherin，OPG表达水平比较（s，n＝40）

组别sVCAM－1（ng／L）E－cadherin（ng／L）OPG对照组观察组治疗前104.50±17.52 105.69±18.08治疗后78.72±8.99＃63.69±7.57＃治疗前70.82±10.64 71.92±0.56治疗后39.38±7.34＃35.10±6.32＃治疗前45.10±7.01 46.45±6.97治疗后86.12±9.24＃91.01±9.00＃

表5 两组患者不良反应发生情况比较[例（%），n＝40]

中医认为[15]，口腔内产生的炎症属于外感风火邪毒侵犯上焦，导致局部气血失和，发为红肿热痛、种植体周围炎被认为上焦火热邪犯的一种，治疗当以清热泻火、疏风止痛为法。本研究中使用的中药均具有疏风解毒、清热去火功效，其中黄连、黄芩、黄柏、大黄均是清热泻火要药，配伍可清三焦火邪。大黄泄腑通便并给邪以通路，栀子清心导赤，连翘解上焦火热之毒，蔓荆子疏风散邪，各药配伍重在泻火解毒，同时疏风止痛。

抗菌肽是一种广泛存在于真核细胞生物体内的小分子多肽，具有广谱抗细菌作用。抗菌肽和微生物之间通过电荷相互作用或由受体介导发生接触后，在细胞膜积累进而破坏膜结构完整性，导致细胞死亡[16]。抗菌肽RISE－AP12为人工合成新型抗菌肽，比天然抗菌肽具有更高的抗菌能力和极高的抗耐药性，对人体自身细胞影响小。此外，在口腔感染中，内毒素可攻击根尖周的成纤维细胞，促使其坏死而破坏根尖周的屏障作用，抗菌肽则RISE－AP12可中和内毒素，具有独特的优势[17]。

本研究结果显示，采用口服中药汤剂结合抗菌肽、牙周基础治疗种植体周围炎患者，治疗后PLI，SBI，PD较对照组显著改善，且治疗组治疗后龈沟液中的炎症因子、黏附因子的表达也较对照组治疗后显著下降，OPG较对照组治疗后显著升高。

综上所述，口服中药汤剂联合抗菌肽RISE－AP12治疗种植体周围炎可显著改善种患者临床体征，并显著降低龈沟液中炎症因子、黏附因子的表达，促进OPG的表达，不良反应较轻微，经对症处理后不影响治疗，值得临床推广。

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Effect of Antibacterial Pep tide RISE－AP12 Com bined w ith Traditional Chinese M edicine Decoction on Inflamm atory Factors in Peri－Im p lant Crevicu lar Fluid

Dong Yingtao,Jia Bin

(Chongwen Stomatological Hospital,Beijing,China 100062)

Ob jective To investigate the effect of Antibacterial Peptide RISE－AP12 combined with traditional Chinese medicine(TCM) decoction on inflammatory factors in peri－implant crevicular fluid.M ethods 80 patients(146 implants)with periimplantitis admitted to our hospital from March 2010 to October 2015 were random ly divided into the observation group and the control group,40 cases(73 imp lants)in each group.The patients in the two groups were given periodontal treatment,hydrogen peroxide mouthwash,minocycline hydrochloride ointment lien,once weekly treatment for 4 weeks as a course of treatment,continuous treatment for 2 courses,at the same time,the patients were given TCM decoction,4 weeks as a course of treatment,continuous treatment for 2 courses,on this basis,the observation group was treated with Antimicrobial Peptide RISE－AP12 gargle,3 times／d.Results After treatment,The PLI,PD,SBI levels in the two groups were significantly decreased,and the observation group decreased more significantly(P＜0.05).After treatment, the expression of IL－6,NO,MMP－2 in the two groups were significantly decreased,and the observation group decreased more significantly(P＜0.05).After treatment,the sVCAM－1,E－cadherin in the two groups were significantly decreased,but OPG were significantly increased,and the observation group improved more significantly(P＜0.05).The incidence of adverse reactions in the observation group was higher than that in the control group(P＜0.05),but the symptoms were mild and did not affect the treatment.Conclusion Antibacterial Peptide RISE－AP12 combined with TCM decoction can significantly improved clinical signs of patients with periimplantitis,significantly decreased the expression of inflammatory factors and adhesion factors in peri－implant crevicular fluid and promote the expression of osteoprotegerin,the adverse reactions are mild and it does not affect the treatment after symptomatic treatment,it is worthy of clinical promotion.

Antibacterial Peptide RISE－AP12;traditional Chinese medicine;periimplantitis;initial periodontal therapy;grevicular fluid;inflammatory factors

R969.4；R988.2

A

1006－4931(2017)11－0060－04

2017－03－09)

10.3969／j.issn.1006－4931.2017.11.020