气相色谱－质谱法测定火锅底料中的吗啡

沈 平，谢朝梅，谢燕湘，林永涛，曾小元，李兆敏，邓香香

（常德市疾病预防控制中心，常德415000）

气相色谱－质谱法测定火锅底料中的吗啡

沈 平，谢朝梅，谢燕湘，林永涛，曾小元，李兆敏，邓香香

（常德市疾病预防控制中心，常德415000）

吗啡是鸦片类毒品的重要组成部分，其在罂粟壳中含量较高。罂粟壳俗称大烟壳，为罂粟科植物罂粟割取浆汁后的干燥成熟果壳，内含多种生物碱，其中含量最多的生物碱分别为吗啡、可待因、蒂巴因、罂粟碱、那可汀等［1］。长期食用含有这类毒品的食物，会出现发冷、出虚汗、乏力、面黄肌瘦、犯困等症状，严重时可能对神经系统、消化系统造成损害，甚至出现内分泌失调等症状［2］。在我国，罂粟壳为非食用物质，不允许在食品及调味品中添加使用。但近年来少数食品生产经营者为了招揽顾客，牟取暴利，利用罂粟壳上瘾的特点将其添加在火锅底料中，对消费者身体造成极大伤害。

目前吗啡的测定方法主要有高效液相色谱法［36］以及液相色谱－串联质谱法［7］等。这些方法各有特点，液相色谱－串联质谱法检测结果准确可靠，但该法对仪器设备和人员的要求较高。本工作采用气相色谱－质谱法测定火锅底料中的吗啡含量。

1 试验部分

1.1 仪器与试剂

Thermo Trace1300－ISQ型气相色谱－质谱联用仪，配AI 1310型自动进样器；TTL－DC型多功能氮吹仪；KQ－250DE型数控超声波清洗器；MJ－30BH01A型手持搅拌匀浆机；Research RooⅠ－50型及ELGA－Lc134型纯水器；DragonMED型移液器；TGL－20M型离心机；VORTEX QL－902型混匀器。

吗啡标准储备溶液：1.00mg·L－1，称取吗啡标准品0.10mg（纯度大于99%）于100mL容量瓶中，用正己烷稀释并定容。

乙腈、正己烷、乙醚为色谱纯；无水硫酸镁和无水乙酸钠、盐酸、氢氧化钠为优级纯。

1.2 仪器工作条件

2）质谱条件 电子轰击离子源（EI），选择性离子扫描方式，离子源温度280℃，传输线温度250℃；溶剂延长时间4min。全扫描范围（m／z）为100～400；吗啡的定性离子（m／z）为162，215；定量离子（m／z）为285。

1.3 试验方法

1.3.1 样品处理

称取试样2.00g（固体样品搅拌匀浆后称取）置于50 mL聚四氟乙烯具塞刻度离心管中，加入0.1mol·L－1盐酸溶液5mL，超声处理30min，用1mol·L－1氢氧化钠溶液（约0.8mL）调节至中性，加入乙醚20mL，加入混合粉末（无水硫酸镁4g和无水乙酸钠1.2g），涡旋振荡1min，以4 000r· min－1转速离心5 min，弃除乙醚层，加入乙腈10mL，涡旋振荡1min后，以4 000r·min－1转速离心5min，取上清液待净化。

采用N－丙基乙二胺（PSA）／C18柱（150 mg／200mg），移取上清液3.0mL置于柱中，涡旋混合1min，以10 000r·min－1转速离心2min，移取上清液于5mL试管中，氮气吹干，用正己烷溶解残渣，定容至1mL，按仪器工作条件进行测定。

1.3.2 计算

试验采用外标法定量，校准标准曲线得样品中吗啡的质量浓度，按公式（1）计算结果：

细纸筒一个，粗纸筒一个，纸圈两个，黑色套圈两个，黑色圆孔观察盖一个，彩色珠子若干，长方形镜片三个（也可以用能够反光的镜面纸，一般的快餐盒或礼品盒内都可以找到），彩色塑料片一片，透明塑料片一片，胶水、胶带、画笔，画纸若干。

式中：ρ为样品中吗啡的质量浓度，mg·L－1；w为校准标准曲线实际测出的吗啡的质量分数，mg· kg－1。

2 结果与讨论

2.1 样品前处理条件的选择

由于吗啡能溶于水，且在酸性条件下较稳定，因此先加0.1mol·L－1盐酸溶液5mL溶解样品，再超声处理30min。试验考察了pH分别为1，2，3，4时对吗啡提取效果的影响。结果表明：在pH为1时，对吗啡的提取效果最好。

为了降低吗啡在水溶液中的溶解度，用1mol· L－1氢氧化钠溶液调节至pH试纸呈中性，使乙腈萃取更加完全。吗啡基本不溶于乙醚，试验选择用乙醚除去脂肪杂质。

试验考察了（150±5）mg PSA、（300±5）mg无水硫酸镁、（200±5）mg C18的混合物对样品的净化效果。结果表明：PSA具有较强的离子交换能力，能除去溶液中的干扰离子；无水硫酸镁可吸除乙腈中的少量水分；C18可去除有机物。由于无水硫酸镁和无水乙酸钠能让两相分层完全，便于分离，试验选择用混合粉末一次性净化样品，可以减少净化操作次数，降低样品在净化过程中的损失。

2.2 色谱条件及质谱条件的选择

试验采用TG－5MS色谱柱（30m×0.32mm，0.25μm），峰较对称，半峰宽窄，峰形较好；在1.0mL·min－1柱流量和试验选用程序升温条件下，各组分能实现良好地分离；进样口温度采用280℃，能实现样品充分气化。EI源下有较好的响应值，在选择性离子扫描模式下，吗啡溶液经质谱扫描后产生m／z285，162，215等3个特征离子，吗啡相对分子质量是285，所以选择特征碎片离子285作为定量离子，162，215作为定性离子。

2.3 标准曲线和检出限

移取1.00mg·L－1吗啡标准储备溶液2.50，5.00，10.00，25.00，50.00mL分别置于50mL容量瓶中，用正己烷稀释至刻度，配制成0.05，0.10，0.20，0.50，1.00mg·L－1标准溶液，按仪器工作条件进行测定，以吗啡的质量浓度为横坐标，对应的峰面积为纵坐标绘制标准曲线。结果表明：吗啡的质量浓度在0.05～1.0mg·L－1内呈线性，线性回归方程为y＝2.72×105x－170.2，相关系数为0.999 0，检出限（3s／k）为0.05mg·L－1。

2.4 精密度和回收试验

取空白样品18份，分成3组，每组分别加入1.00mg·L－1吗啡标准储备溶液0.20，1.0，1.8mL，加标量依次为0.10，0.50，0.90 mg· kg－1，按试验方法进行样品前处理后测定，其结果见表1。

表1 精密度与回收试验结果（n＝6）Tab.1 Results of tests for precision and recovery（n＝6）

2.5 样品分析

从一次食品安全事件处理中采集火锅底料样品，按试验方法进行前处理后测定，其色谱图见图1。

本工作采用气相色谱－质谱法测定了火锅底料中吗啡的含量，通过对样品前处理条件和气相色谱及质谱参数的优化后，操作简便快速，测定结果准确可靠，灵敏度高，稳定性好，可满足火锅底料中吗啡含量的测定，可用于实际检测工作。

［1］ 沈平，谢朝梅，谢燕湘，等.GC－MS法直接测定食品中罂粟壳提取物的残留量［J］.中国卫生检验杂志，2015，25（20）：3466－3468.

［2］ 陈伟，乔勇升，董贵军.高效液相色谱－荧光检测法同时检测火锅底料中吗啡和可待因［J］.粮油食品科技，2015，23（6）：89－91.

图1 样品的色谱图Fig.1 Chromatogram of the sample

［3］ 马维平，邓自力，李利军.高效液相色谱法测定罂黄散中吗啡的含量［J］.武警医学，2012，23（6）：480－482.

［4］ 徐丽红，王建清，陶秋，等.高效液相色谱同时测定3类食品中的5种罂粟壳生物碱［J］.分析测试学报，2011，12（30）：1387－1391.

［5］ 谷岩，刘广福，张元，等.固相萃取－高效液相色谱法测定汤料中罂粟壳提取物残留量［J］.理化检验－化学分册，2011，47（12）：1411－1412.

［6］ 张靖.食品中罂粟碱、吗啡、可待因含量的液相色谱检测法研究［J］.中国卫生检验杂志，2007，17（1）：72－73.

［7］ 李昱，方均建，吴胜明，等.高效液相色谱串联质谱分析人血浆中的罂粟碱含量［J］.药物分析杂志，2008，28（8）：1326－1329.

O657.63

B

1001－4020（2017）05－0559－03

10.11973／lhjy－hx201705014

2016－05－13