儿童幽门螺杆菌感染检测方法临床适用性分析

张 燕，岳玉林，张之烽， 王 贤，沈 瀚

·临床经验·

儿童幽门螺杆菌感染检测方法临床适用性分析

张 燕1，岳玉林2，张之烽1， 王 贤1，沈 瀚1

目的 分析13C-尿素呼气试验(13C-UBT)、血清幽门螺杆菌-IgG抗体、粪便幽门螺杆菌抗原和幽门螺杆菌培养试验方法检测儿童幽门螺杆菌感染的适用性。 方法 92例怀疑幽门螺杆菌感染患儿进行幽门螺杆菌培养，其中41例(44.57%)培养出幽门螺杆菌。将41例幽门螺杆菌感染患儿和30例健康体检儿童同时行13C-UBT、血清幽门螺杆菌-IgG抗体检测、粪便幽门螺杆菌抗原检测。 结果 粪便幽门螺杆菌抗原检测敏感性为46.34%，13C-UBT和血清幽门螺杆菌-IgG检测敏感性较高，分别为92.68%和90.24%。13C-UBT和血清幽门螺杆菌-IgG检测相比差异无统计学意义(P>0.05)，13C-UBT和血清幽门螺杆菌-IgG检测敏感性均高于粪便幽门螺杆菌抗原检测(P<0.05) ；13C-UBT和粪便幽门螺杆菌抗原检测特异性和阳性预测值均高于血清幽门螺杆菌-IgG检测 (P<0.05)；粪便幽门螺杆菌抗原检测的阴性预测值明显小于其他方法(P<0.05)。结论13C-UBT检测的敏感性及特异性均较高，更能反映幽门螺杆菌感染的变化状况，可作为临床诊断幽门螺杆菌感染的首选方法。血清幽门螺杆菌-IgG特异性较低，不宜单独作为幽门螺杆菌感染的诊断依据，可用于幽门螺杆菌感染的流行病学调查。

幽门螺杆菌；儿童；检测方法

儿童为幽门螺杆菌的易感人群，幽门螺杆菌感染的流行病学情况与成人有所不同，感染后组织病理学改变、临床表现、机体的免疫机制和细菌致病及治疗等均与成人有所不同，对儿童幽门螺杆菌感染检测方法的研究具有重要的意义。提高检验人员和临床医师对儿童幽门螺杆菌感染试验诊断的充分正确认识，从而探索出合理、经济的检测方法非常有必要。本文通过分析13C-尿素呼气试验(13C-UBT)、血清幽门螺杆菌-IgG抗体、粪便幽门螺杆菌抗原和幽门螺杆菌培养试验方法检测儿童幽门螺杆菌感染的适用性，研究寻求快速简便、敏感性及特异性高的儿童幽门螺杆菌感染检测方法，为临床儿童幽门螺杆菌感染提供可靠的检测结果，促进幽门螺杆菌感染的早期诊断及治疗[1-3]。

1 资料与方法

1.1 对象 2014年5月至2015年12月在南京医科大学附属儿童医院消化科住院的最近1个月内未使用过抗生素、质子泵抑制剂、H2受体阻滞剂的92例怀疑幽门螺杆菌感染患儿，其中男48例，女44例，年龄3～14岁。92例均进行幽门螺杆菌培养，其中41例(44.57%)培养出幽门螺杆菌。2015年5-12月在南京医科大学附属儿童医院健康体检儿童30例作为阴性对照，其中男16例，女14例，年龄3～14岁，无血液系统疾病、肿瘤、结核、消化不良、营养不良、消化系统疾病及自身免疫性疾病。将41例幽门螺杆菌感染患儿和30例健康体检儿童同时行13C-UBT、血清幽门螺杆菌-IgG抗体检测和粪便幽门螺杆菌抗原检测。

1.2 试验方法

1.2.1 细菌培养 常规插入胃镜，用活检钳在患儿胃窦部距幽门2～3 cm处及胃体中部前壁各取胃黏膜组织1块，将其研磨后直接种于含选择性抗生素添加剂和10%马血的哥伦比亚琼脂培养基，37℃微氧环境(含5%的O2，15%的CO2，85%的N2)，培养4～5 d后观察分离效果，镜下查找到幽门螺杆菌为幽门螺杆菌培养阳性，为幽门螺杆菌感染诊断金标准。

1.2.213C-UBT 患者清晨空腹时在相应的仪器上进行13CO2检测，试剂盒由北京勃然制药有限公司提供，仪器为北京华亘安邦科技有限公司提供的HG-IRIS200型红外光谱仪。

1.2.3 血清幽门螺杆菌-IgG抗体检测(胶体金法) 间接固相免疫层析法，测试时血清中抗体从样本孔向上迁移与固定在膜上的幽门螺杆菌抗原结合形成抗原抗体复合物，接着复合物与金标记的抗人IgG结合而被检出。质控线含有蛋白A，与人IgG结合，做为质控指标。试剂由MP生物医学亚太私人有限公司提供，严格按照说明书要求操作。

1.2.4 幽门螺杆菌抗原检测 患儿粪便2～4 g经稀释后采用双抗体夹心法检测幽门螺杆菌抗原,操作步骤严格按说明书进行,试剂盒由北京协和药业有限公司提供。

1.3 观察指标 比较幽门螺杆菌感染3种检测方法的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值。计算公式：灵敏性=a/(a+b)；特异性=d/(c+d)；阳性预测值=a/(a+c)；阴性预测值= d /(b+d)。a为呈阳性结果的幽门螺杆菌感染数,b为呈阴性结果的幽门螺杆菌感染数,c为呈阳性结果的非幽门螺杆菌感染数,d为呈阴性结果的非幽门螺杆菌感染数。

1.4 统计学分析 应用SPSS 13.0统计学软件包进行数据处理，计数资料采用χ2检验，以P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 儿童幽门螺杆菌感染检测结果 41例幽门螺杆菌感染患儿的13C-UBT阳性检出率[92.68%(38/41)]最高，粪便幽门螺杆菌阳性抗原检出率[46.34%(19/41)]最低。见表1。

表1 41例幽门螺杆菌感染患儿和30例健康体检儿童幽门螺杆菌感染3种检测方法结果

检测方法幽门螺杆菌感染患儿(n=41)健康体检儿童(n=30)+-+-13C⁃UBT383228血清幽门螺杆菌⁃IgG检测374624粪便幽门螺杆菌抗原检测1922129

2.2 灵敏度、特异性、阳性预测值和阴性预测值比较13C-UBT和血清幽门螺杆菌-IgG检测敏感性较高，分别为92.68%和90.24%，两者比较差异无统计学意义(P>0.05)；13C-UBT和血清幽门螺杆菌-IgG检测敏感性均高于粪便幽门螺杆菌抗原检测(P<0.05) ；13C-UBT和粪便幽门螺杆菌抗原检测特异性和阳性预测值均高于血清幽门螺杆菌-IgG检测，差异具有统计学意义(P<0.05)，而3C-UBT与粪便幽门螺杆菌抗原检测特异性和阳性预测值差异不具统计学意义(P>0.05)；粪便幽门螺杆菌抗原检测的阴性预测值明显小于其他方法(P<0.05)。见表2。

表2 幽门螺杆菌感染3种检测方法的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值比较(%)

检测方法敏感性特异性阳性预测值阴性预测值13C⁃UBT92 68∗93 33#95 00#90 32∗血清幽门螺杆菌⁃IgG检测90 24∗80 0086 0485 71∗粪便幽门螺杆菌抗原检测46 3496 67#95 00#56 86与粪便幽门螺杆菌抗原检测比较，∗P<0 05；与血清幽门螺杆菌⁃IgG检测，#P<0 05

3 讨 论

流行病学研究显示在发达国家30%～50%的成年人有幽门螺杆菌感染,而发展中国家的幽门螺杆菌感染率则高达80%[1]。众多研究发现幽门螺杆菌与慢性胃炎、消化性溃疡、胃黏膜相关淋巴样组织(MALT)淋巴瘤等疾病的关系密切。1994年幽门螺杆菌被世界卫生组织确定为第Ⅰ类致癌因子。我国属于发展中国家，幽门螺杆菌感染率为40%～90%，平均为54.76%[1-3]。成人幽门螺杆菌感染往往始于儿童期，如不给予根除治疗，可持续终身。因此，儿童幽门螺杆菌感染状况的研究对控制和消除人群幽门螺杆菌感染有不可忽视的意义。国内外幽门螺杆菌感染检测方法很多，各有优缺点。细菌培养是金标准，幽门螺杆菌为微需氧苛养菌，培养条件较为严格，一般医院缺少相应的技术和设备，污染菌及污染物会抑制幽门螺杆菌的生长[4-5]，阳性率较低(本文仅为44.57%)，同时取标本检查时具有创伤性、易受胃黏膜病变及取样误差的影响。13C是一种稳定性较高的同位素，无放射性污染，13C-UBT检测的敏感性和特异性均较高，更能反映幽门螺杆菌感染的变化状况，具有准确、快速、可反复检测、无痛苦等优点，价格低廉、不易受胃黏膜病变及取样误差的影响，在儿童幽门螺杆菌感染检查及疗效判断评价中发挥重要作用[6-7]。

幽门螺杆菌-IgG抗体一般都不能自行消失，血清抗幽门螺杆菌-IgG在幽门螺杆菌根治后6～8个月内仍可持续存在，故有较高的假阳性率。敏感性与13C-UBT比较差异无统计学意义。幽门螺杆菌-IgG阳性不能肯定患者是否有活动性感染，阴性不能排除是否为初期感染[8-10]。所以幽门螺杆菌-IgG不能作为幽门螺杆菌感染的诊断指标和疗效监测，但其具有高的敏感性可用于流行病学调查，还有不愿意或不能配合呼气试验的儿童可以选择此方法。粪便幽门螺杆菌抗原检测敏感性不是很理想，可能和取材的因素有关，用于检测的粪便仅为2～4 g，这可能是阳性率偏低的因素之一。

总之13C-UBT检测的敏感性及特异性均较高，更能反映幽门螺杆菌感染的变化状况，更适合临床，是临床诊断幽门螺杆菌的首选方法。幽门螺杆菌-IgG敏感性、特异性虽然也较高，不宜单独作为幽门螺杆菌感染的诊断依据，更不宜用于根除幽门螺杆菌药物的疗效监测，可用于幽门螺杆菌感染儿童的流行病学调查[11-13]。

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(本文编辑：叶华珍)

1.210008 南京,南京大学医学院附属鼓楼医院检验科：2. 210008南京,南京医科大学附属儿童医院检验科

沈 瀚，E-mail：shenhan10366@sina.com

张 燕，岳玉林，张之烽, 等.儿童幽门螺杆菌感染检测方法临床适用性分析[J].东南国防医药，2017,19(3): 302-304.

R725.7

B

1672-271X(2017)03-0302-03

10.3969/j.issn.1672-271X.2017.03.020

2016-12-30;

2017-02-15)