探究高效液相色谱法检测脂肪乳注射液中的抗氧剂BHT

＊张贾亮 陈敏 雷翔霄 王洋

（常州方圆制药有限公司工程中心 江苏 213125）

探究高效液相色谱法检测脂肪乳注射液中的抗氧剂BHT

＊张贾亮 陈敏 雷翔霄 王洋

（常州方圆制药有限公司工程中心 江苏 213125）

应用液液萃取的方法能够获得脂肪乳内的BHT（2，6-叔丁基-4-甲基苯酚）抗氧剂，基于此应用高效液相色谱法检测脂肪乳注射液中抗氧BHT。实验结果证明，在2.07～259.00ug/mL区间内BHT线性关系优良。回收效率也处于较高层次上。由此可见，对脂肪乳注射液中的抗氧剂BHT采用这样的检测方法，在精确性以及时效性等方面均体现出巨大的优越性。

脂肪乳注射液；抗氧剂BHT；探究高效液相色谱；精确性

应用的色谱柱为Inertsil ODS-SP，柱表温度为36℃，乙腈-水为其流动相，流动速度为1．5mL/min，检测波长度为280nm。与天然橡胶相比较，药用丁基胶塞在密封性、稳定性以及低渗出性等方面均体现出优良性，正因如此其在药物包装领域获得高频率的应用。基于胶塞组成成分的多样性，加大了化合物渗透进药液中的几率，对药品性能以及洁净度造成一定程度的干扰。在GC-MS方法以及相关器具的协助下，才能对BHT的渗透量进行测量，但是这一方法很难普及。所以本文在采用高效液相色谱法，检测输液瓶装脂肪乳注射液胶塞化合物渗透到药液中的BHT情况。

1.器具和试剂

(1)器具。LC-20A高效液相色谱仪，由日本岛津公司制造；低速台式离心机，由上海安亭科学仪器厂提供；电子天平，由曝多利斯科学仪器（北京）有限公司生产。

(2)试剂。抗氧剂BHT对比样品品（批号：20627）；四氢呋喃、乙睛、脂肪乳注射液。

2.方法与结果

(1)色谱条件。色谱柱Inertsil ODS-SP，规格为0．46cm x1．5，柱内5um，柱表温度为36℃，流动相为乙睛-水，混合比例为4：1，流动速度为1．5mL/min，检测波长为280 nm，样品进样量为20uL/次。在上述色谱状态下，BHT对比样品与脂肪乳注射液供试品的HPLC色谱图如图1所示。

(2)溶液配制。对比样品(A)存储液的配制，精确量取抗氧剂。

BHT对比样品25．0mg与10mL蒸馏水混合，对其定容之时借用等体积乙睛和四氢呋喃混合液。

脂肪乳注射液供试品的配制。精确量取称取0．50g脂肪乳注射液，与2mL乙睛充分混合，将其置于转速为3000r/ min的离心机上0．5h，继而对其施以静放对策，旨在使脂肪乳注射液与乙睛处于不同的层次上，将乙睛层导入圆底烧瓶内，连续提取3次，对其整合后采取减压干燥措施然后，将5mL乙睛融入其中，应用0．22um滤膜对其施以过滤举措，即得预配溶液。

(3)线性关系。量取一定量抗氧剂BHT储存液，按照1：1比例对乙睛和四氢呋喃施以混合对策，用混合液稀释BHT储存液到2．060、10．32、20．82、51．60、102．6、245．0ug/ mL，进样量均为20uL，应用HPLC对其进行检测。每一浓度检测次数均为3次，最后计算平均值。基于质量浓度与色谱峰面积存在线性关系这一实况，设定的线性方程如下，即C=0．0001661A-0．6930，R2=0．9999。检测结果证明，抗氧剂BHT储存液在2．070～259．0ug/mL区间里线性关系优良。

(4)精密度。量取浓度为8．390、10．26，19．42ug/mL的抗氧剂BHT对比样品，参照“2．1色谱条件”将其导入液相色谱仪内，进样量均为20uL，每一溶液进样总量为60uL，每日中峰面积RSD值分别为0．17%，0．45%，0．06%，在日照条件下，检测得到的峰面积的RSD值分别为0．25%、0．54%、0．12%。

表1

图1 BHT对比样品（A）和脂肪乳注射液供试品(B)HPLC色谱图

(5)抗氧剂BHT在脂肪乳注射液中迁移量的回收效率。准确称量0．60g脂肪乳注射液3份，将其分别注入浓度为0．1154、0．2310与0．5740mg的BHT内。与2mL乙睛充分混合，将其置于转速为3000r/min的离心机上0．5h，继而对其施以静放对策，旨在使脂肪乳注射液与乙睛处于不同的层次上，将乙睛层导入圆底烧瓶内，连续提取3次，对其整合以后采取减压干燥措施以后，将5mL乙睛融入其中，应用0．22um滤膜对其施以过滤举措，即得预配溶液将其导入高效液相色谱内，统计结果见表1。

(6)脂肪乳注射液内抗氧剂BHT迁移量的检测。基于3类脂肪乳注射液都没有测试出抗氧剂BHT，并且样品前处理环节中0．60g脂肪乳注射液处理后定容到5mL，并且本实验中构建的高效液相色谱法的检测限设定为0．20ug/mL，因此抗氧剂BHT在脂肪乳注射液中迁移量都低于1．67ug/g。

3.讨论

基于脂肪乳注射液体系成分的复杂性，液液萃取方法在本次实验进程中的应用，对样品处理的效果是极为优良的。

将乙睛设置为提取溶剂，在其协助下抗氧剂BHT在脂肪乳注射内的回收效率处于较高的水平，并且其也承担着本次实验流动相的角色。萃取效果与离心时间存在一定的关联性，实践证明，与10min与60min相比较，离心为30min时所取得的效果是最佳的。

在最适检测波长度确定上，对比样品在200nm～280 nm产生最大吸收，但基于乙睛的截止波长是190nm的缘故，若将波长设置为200nm，将会产生较大噪音，所以该实验择取280nm为检测波长。

结束语

借助构建HPLC方法并在液液萃取检方法的协助下对脂肪乳注射液中的抗氧剂BHT进行测定。明确了脂肪乳注射液中BHT的萃取方法，溶剂成分选择。对3类脂肪乳注射液开展检测工作，均没有显示抗氧剂BHT存在的指标出现。由此可见，该方法在脂肪乳注射液中抗氧剂BHT方面带有精确性与稳固性。

[1]李莉,李培,于婵娟,刘亚华,杨劲．多民族麻醉手术患者血浆丙泊酚浓度的测定及分析[J]．中国医药导报,2014,34:84-88．

[2]姜丽娜．高效液相色谱法测定注射用亚胺培南西司他丁钠含量的分析[J]．中国医药指南,2015,04:57-58．

[3]田宇,史小平,贺春浩,许雪飞,何聪芬．HPLC技术研究美白类化妆品中熊果苷稳定性[J]．香料香精化妆品,2015,02:33-36．

(责任编辑：王恒)

Study on the Detection of Antioxygen BHT in Fat Emulsion Injection by High Performance Liquid Chromatography Method

Zhang Jialiang, Chen Min, Lei Xiangxiao, Wang Yang

（Engineering Center, Changzhou Fangyuan pharmacy Co., ltd., Jiangsu, 213125）

Application liquid-liquid extraction method can obtain the BHT(2,6-tertiary butyl-methylphenol)antioxygen in fat emulsion, based on which, using the high performance liquid chromatography method to detect take detection of the antioxygen BHT in fat emulsion injection. The experiment result proves that in the range of 2.07～259.00ug/mL, the BHT linear relation is good and the recovey rate is also in the higher level. Thus, it can seen that, adopting this method has great superiority in the aspects of accuracy and effectiveness.

fat emulsion injection；antioxygen BHT；high performance liquid chromatography study；accuracy

T < class="emphasis_bold"> 文献标识码：A

A

张贾亮（1987～)，男，常州方圆制药有限公司工程中心；研究方向：生物工程（生物制药)。