干热处理甜瓜、籽瓜细菌性果斑病种子对幼苗发病的影响

万秀琴，王惠林,2*

（1.新疆农业大学林学与园艺学院，新疆 乌鲁木齐 830052；2.国家瓜类工程研究技术中心，新疆 昌吉 831100)）

新疆是我国甜瓜、籽用西瓜生产制种最主要的区域之一，然而新疆出现的检疫性病害细菌性果斑病对瓜类产品能引起危害且其危害日益加重[1]。在北疆和哈密产区调查发现，哈密瓜轻病田叶片发病率8%～15%，重病田叶片发病率80%以上，哈密瓜生长中后期果实感病后引起溃烂，失去商品价值，受损率5%～15%，对哈密瓜的品质和产量影响较大[2]。经国内外研究表明，细菌性果斑病病菌可在种子或随病残体在土壤中越冬，种子带菌是该病传播的重要方式之一[3]。目前种子健康处理的方法和技术很多，药剂处理仍然是防止种子带菌的主要措施之一[4]，但大部分药剂处理会影响种子的发芽率和田间成苗率，长期利用化学防治的方法的确有效地控制了病害，但高残留、抗药性等缺点对环境和人畜健康造成严重威胁，生态平衡遭到破坏[5]。宋顺华等[6]研究表明，种子干热处理可以阻止病原菌在种子表面的进一步繁殖，降低种子的带菌率。干热处理作为一种绿色、有效的处理方式，为西瓜、甜瓜的种子安全性及有效控制瓜类细菌性果斑病提供了新的途径[7]。唐炎英等[8]对西瓜种子干热处理有报道，但对甜瓜、籽用西瓜带菌种子干热处理的报道少见，由于不同种子对温度的敏感性不同，每种类型种子都有其适宜的干热处理程序，因此本研究对甜瓜、籽用西瓜带菌种子进行有针对性地摸索干热处理的条件，以便有效地杀灭病原菌，且不影响种子的质量，筛选出适宜甜瓜、籽瓜的干热处理方法，为生产提供参考。

1 材料和方法

1.1 试验材料

试验于2016年6-8月在国家瓜类工程技术研究中心试验基地进行。试验选用的种子材料为Vm 9-109甜瓜新品系及民籽1号籽瓜自交系，均由新疆农业大学林学与园艺学院提供；供试细菌性果斑病菌的菌株由南京农业大学植物检疫研究室提供，菌株代号为xjl12。

1.2 试验方法

1.2.1 病原菌的培养

细菌性果斑病菌在KMB（20g胰蛋白胨，1.5 g K2HPO4，1.5 g MgSO4·7H2O，10 g甘油，10 g琼脂粉，定容到1 L）固体平板上进行活化，28 ℃培养24 h，挑取单菌落接种于NB液体培养液中，220 r/min、28 ℃培养16～18 h。用分光光度计测定菌悬液的OD值，并用灭菌水将菌悬液浓度调到OD600为0.2～0.5备用[9]。1.2.2 试验设计

试验所用的甜瓜、籽用西瓜种子经过人工接菌2 h后阴干。甜瓜种子在恒温干燥箱中分别进行50、55、60、65、70 ℃干燥灭菌，时间分别为2、4、6、8 d。籽用西瓜种子的干燥温度同甜瓜种子处理温度，处理时间分别为3、6、9、12 d，对照设置为带菌种子不进行高温处理。

育苗基质用以锯末和蛭石4∶1的体积比混合配制，并高温（100 ℃）灭菌，装于经84消毒液浸泡15 min后清洗干净的穴盘中。甜瓜和籽用西瓜种子每穴播2粒，甜瓜每个处理设置3个重复，共计120粒；籽用西瓜每个处理设置3个重复，共计120粒。出苗后统计种子出苗率，并在出苗后每天傍晚浇水，在真叶展开后喷施营养液以供幼苗生长。1.2.3 试验指标的统计

病情调查统计，病情分级参考Hopkins等[10］的分级标准，且略有改动，分级标准如下。

0级：植株无病斑；

1级：叶片病斑较少，病斑面积占整棵植株面积的20%以下；

3级：病斑较多，病斑面积占总面积的21%～40%；

5级：病斑较多，病斑面积占总面积的41%～60%；

7级：病斑很多或融合成大斑，病斑面积占总面积的61%～80%；

9级：病斑很多或融合成大斑，胚轴或茎部有病斑，病斑面积占总面积的81%以上，植株死亡。

病情指数的计算方法如下：DI=（∑发病级数×发病株数）÷（最高病级×总株数）×100。防治效果=（对照病情指数-处理病情指数）÷对照病情指数×100%。

2 结果与分析

2.1 干热处理对甜瓜带菌种子防治效果的影响

干热处理甜瓜带菌种子后，对其幼苗发病情况的影响结果见表1。在50 ℃条件处理下，随着处理时间的增加，幼苗的出苗率≥90%，且大于对照的出苗率。甜瓜种子50 ℃处理2 d与50 ℃处理6 d后种子的活力无明显差异，与对照相比种子活力极显著提高；随着温度的增加，55、60、65 ℃处理（2、4 d），幼苗的出苗率与对照相比有显著差异；70 ℃处理时间较长（4～8 d）会影响种子出苗率，显著低于对照的出苗率。70 ℃处理条件下幼苗的发病率、病情指数随着处理时间的增加而降低，防治效果随着处理温度和时间的增加而增强。将防治效果大于80%作为筛选依据，综合防治效果及种子活力，防治效果较好的处理是：60 ℃处理6、8 d，防治效果均为85.6%；65 ℃处理6 d，防治效果为85.0%。

2.2 干热处理对籽用西瓜带菌种子防治效果的影响

干热处理籽用西瓜带菌种子后，对其幼苗发病情况的影响结果见表2。在50、55 ℃下，随着处理时间的增加种子的出苗率整体呈增加趋势，50 ℃处理9、12 d，55 ℃处理12 d与对照相比，增加了种子的出苗率，且差异显著，说明适宜的温度可促进种子的活力。60 ℃和70 ℃处理9、12 d后种子出苗率较对照极显著降低，说明种子活力受到影响。幼苗的病情指数在同温度下随着时间的增加而降低。将防效大于75%作为筛选依据，综合考虑出苗率及防治效果，防治效果较好的处理是：60 ℃处理12 d，防治效果为86.5%；65 ℃处理12 d，防治效果为83.0%。

表1 甜瓜带菌种子干热处理后幼苗的发病情况

表2 籽用西瓜带菌种子干热处理后幼苗的发病情况

3 结论与讨论

试验结果表明：对甜瓜带菌种子有较好的防治效果的处理是：60 ℃处理6、8 d和65 ℃处理6 d，防治效果分别为85.6%和85.0%；对籽用西瓜带菌种子防治效果较好的处理是：60 ℃处理12 d，防治效果为86.5%；65 ℃处理12 d，防治效果为83.0%。

干热灭菌是目前农业上应用于种子生产加工的一种经济有效的方法，对杀死各种病原菌都有效[11]。特别是对于侵入种子内部的病原菌起到浸种拌种所达不到的效果[12]，又能避免出现水浸种子及毒性残留问题，对种子加工来说既节省了工

序又节约了成本。适当的干热处理不仅可以起到杀菌效果，还能促进种子萌发[13]，与试验中籽用西瓜种子在高温处理下种子的活力有提高的结果一致。黄俊霞[14]研究表明种子带菌率与幼苗的发病率具有明显的线性关系，因此幼苗的发病情况是反映高温处理后防治效果的重要依据。试验结果显示，高温处理对甜瓜与籽用西瓜种子的防治效果不同，对甜瓜种子的处理效果优于籽用西瓜种子，可能与籽用西瓜种子较大且其种皮较厚有关，因此增加高温处理的温度及时间，才能有效地杀死种子内部的病原菌。但处理温度及时间不当会严重影响种子的活力，并且会加速种子老化及种子的耐贮藏性[15]，所以不同种子需根据其对温度的敏感性，选择适宜的干热处理方法。

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