P物质IL-17与IL-6在颅内感染中的表达

杜开先 范冬霞 贾天明 董 燕 霍爱香 高丽佳

郑州大学第三附属医院小儿神经内科 郑州 450052

P物质IL-17与IL-6在颅内感染中的表达

杜开先 范冬霞 贾天明 董 燕 霍爱香 高丽佳

郑州大学第三附属医院小儿神经内科 郑州 450052

目的 探讨P物质、IL-17与IL-6在颅内感染中的表达变化及其相关性。方法 采用酶联免疫吸附试验双抗体夹心法测定23例明确诊断为化脓性脑膜炎与25例明确诊断为病毒性脑炎的患儿入院后24 h内脑脊液中SP、IL-17、IL-6的含量，并与同期入院的非神经系统疾病患儿30例作对照，比较3组SP、IL-17、IL-6水平。 结果 脑脊液中SP、IL-17、IL-6变化各组间差异有统计学意义(P<0.05)；化脑组升高更显著，与病脑组相比差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 SP、IL-17与IL-6在颅内感染早期表达明显增高，且以细菌感染时升高明显。

颅内感染；P物质；IL-17；IL-6

颅内感染是小儿神经内科多发病和常见病之一，随着广谱抗感染药物的应用，病死率有所降低，但仍有较高的病死率和致残率，患儿大多伴有癫痫、智力低下及其他神经功能损伤等[1-2]。颅内感染最常见的有化脓性脑膜炎(简称化脑)、病毒性脑炎(简称病脑)和结核性脑膜炎(简称结脑)，本文重点探讨寻找鉴别化脓性脑膜炎和病毒性脑炎的实验室方法，为早期鉴别化脑和病脑提供依据，及时对症有效治疗，对于降低后遗症的发生率、改善患儿的生活质量具有重要意义。本文旨在通过检测患儿脑脊液中P物质、IL-17、IL-6的水平变化及其之间的相互关系，探讨颅内感染的免疫机制并为早期鉴别化脓性脑膜炎和病毒性脑炎提供理论依据。

1 资料与方法

1．1 一般资料 2014-12—2016-04在我院住院治疗明确诊断为化脑(诊断标准符合诸福棠儿科学第7版)的患儿23例，男15例，女8例，年龄1个月～4岁6个月(2.3±1.7)。同期明确诊断为病脑(诊断标准符合诸福棠儿科学第7版)的患儿25例，男16例，女9例，年龄3个月～8岁(3.7±2.4)。对照组30例，男19例，女11例，年龄3个月～6岁(2.6±1.8)，为同期住院的排除颅内感染、非神经系统疾病的儿童。3组年龄、性别等差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1．2 检测方法 入院后24 h内进行腰椎穿刺，采集CSF 5 mL，其中3 mL送至检验室进行生化、常规、三染色检测，2 mL于无菌EP管中，置于-80 ℃中保存待检。SP(Substance P)、IL-17(Interleukin-17)、IL-6(Interleukin-6)的采用双抗体夹心ELISA法，试剂盒由武汉伊莱瑞特生物科技有限公司提供，所有检测均严格按说明书进行。

2 结果

脑脊液中SP、IL-17、IL-6检测结果比较见表1。

表1 3组脑脊液中SP、IL-17、IL-6水平比较

注：与病脑组比较，*P<0.01；与对照组比较，**P<0.01

3 讨论

CNS感染是小儿常见的疾病之一，有较高的病死率和致残率，给患儿家庭及社会带来经济负担，严重影响患儿的生命及生活质量，因此，尽早鉴别化脓性脑膜炎和病毒性脑炎，及时对因治疗，可减少后遗症及病死率的发生，从而提高患儿生活质量。

病原体对神经组织的直接侵袭是颅内感染脑组织损伤的主要机制之一，机体对病原体抗原的免疫反应是导致神经组织损伤的又一主要机制。近年来有关颅内感染的免疫学机制愈发引起大家关注，其中研究最多的是CD4+T淋巴细胞亚群及其代表因子的研究。根据CD4+T细胞分泌因子谱分类为Th1、Th2、Th17、Treg等亚群。Th1类淋巴细胞代表因子有IL-2、TNF、INF-γ，Th2类淋巴细胞代表因子有IL-6、IL-10、IL-4，Th17类淋巴细胞代表因子有IL-17A[3]。

IL-6是一种重要的炎症因子，具有多种生物学功能，广泛存在于中枢神经系统中，与巨噬细胞进入脑内合成有关[4-5]。当发生炎症时，外周巨噬细胞产生细胞因子介导免疫反应，研究表明，当CNS感染时，血脑屏障受到破坏，外周巨噬细胞通过血脑屏障进入脑内，在IL-6的刺激下合成多种促炎因子；同时，脑内的小胶质细胞和星型胶质细胞在炎症反应时也可分泌大量的IL-6激活T细胞，增强T细胞免疫功能，可见IL-6在CNS炎症反应中起重要作用[6]。本研究发现，在化脓性脑膜炎和病毒性脑炎的脑脊液中均可测得高表达的IL-6，且在化脑中IL-6表达明显高于病脑中的表达，说明化脑时产生的免疫反应强于病脑。

IL-17是由一种新发现的T淋巴细胞亚群Th17分泌的，其在机体防御反应中具有重要的意义。TGF-β、IL-6、IL-23、IL-21和IL-1在Th17细胞的分化形成过程中起着促进作用[7]。研究[8]表明，TGF-β和IL-6是Th17淋巴细胞启动分化及诱导其发育成熟所必需的细胞因子。在仅有TGFβ和IL-6的条件下，Th17的发育过程可以重建[9]。Hou等[10]研究表明，在CNS感染时IL-6的过度表达可促进IL-17的表达，两者可通过协同作用清除感染的细胞。本试验中，对照组IL-6和IL-17在脑脊液中浓度较低，化脓性脑膜炎中脑脊液检测到IL-6和IL-17均明显升高，且在化脓性脑膜炎中IL-6和IL-17相互协同。在病毒性脑炎中，这2个炎症因子也是升高的，虽然较化脓性脑膜炎升高不明显，但仍明显高于对照组，由于IL-6可诱导Th17淋巴细胞分化，表明在病毒性脑炎时IL-6和IL-17也协同参与了炎症的免疫应答，这与Hou等[10]的研究结果一致，至于IL-6和IL-17是如何相互作用，参与炎症反应的具体机制有待于进一步研究。

SP是最早发现的神经肽，属于速激肽家族中的一员，它不仅是一种重要的神经递质，而且还是参与机体免疫和内分泌调节的重要因子[11]，所以，目前认为SP是神经-内分泌-免疫网络中的重要信号肽。P物质能促进脑膜炎奈瑟菌诱导小胶质细胞表达COX-2 及产生PGE2，从而可能加重中枢神经系统的炎症反应。本研究发现，SP在颅内感染时，脑脊液中的浓度明显升高，与对照组相比有显著性差异(P<0.01)。表明SP在颅内感染的早期发生机制中起着重要作用，其可能机制为[12-13]：(1)SP是神经源性炎症最主要的介质，促进单核细胞分泌IL-1、IL-6等炎症因子；促进中性粒细胞和肥大细胞合成释放TNF-α、IL-1、IL-2、IL-6、IL-8、前列腺素D2(PGD2)和白三烯烯C4(LTC4)；(2)SP是一种免疫调节肽，直接作用于单核-巨噬细胞，借助IL-1、IL-6等因子的释放，参与诱导或始动体液免疫和细胞免疫反应；(3)SP通过促进淋巴细胞的增殖分化，影响B淋巴细胞合成免疫球蛋白调节免疫应答；SP还影响活化的淋巴细胞合成细胞因子，进而介导和调节免疫炎症反应；(4)SP有可能借助脑内的星形细胞及小胶质细胞参与脑内的免疫反应；陈庆德等[14]研究证明，P物质能促进脑膜炎奈瑟菌诱导小胶质细胞表达COX-2 及产生PGE2，从而可能加重中枢神经系统的炎症反应。SP是具体通过何种途径参与颅内感染的发生机制，尚需进一步探讨。

总之，颅内感染时，脑脊液中SP、IL-17、IL-6均明显升高，且化脑组明显高于病脑组，虽然其具体机制有待于进一步研究，但本试验结果为早期诊断与鉴别诊断化脓性脑膜炎、病毒性脑炎提供了理论依据，积极寻找鉴别诊断化脑与病脑的实验室方法将是未来重点研究的方向。

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(收稿2016-11-05)

Expressions of substance P，IL-17 and IL-6 in intracranial infection

DuKaixian，FanDongxia，JiaTianming，DongYan，HuoAixiang，GaoLijia

DepartmentofPediatricNeurology，theThirdAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversity，Zhengzhou450052，China

Objective To investigate the expressions of substance P(SP)，IL-17 and IL-6 in intracranial infection and the analysis of their correlations．Methods The contents of SP，IL-17 and IL-6 in cerebrospinal fluid which was acquired within 24h after hospital admission from 23 children definitely diagnosed as purulent meningitis and 25 children with the clear diagnosis of viral encephalitis were assessed by enzyme linked immunosorbent assay(ELISA)．Meanwhile，30 cases with non-neural system diseases were selected as control group．Then we compared the differences between three groups．Results Significant differences were found among three group in terms of the changes of the expressions of SP，IL-17 and IL-6 in cerebrospinal fluid(P<0.05)，which were obviously higher in purulent meningitis group than those in other two groups(P<0.05)．Conclusion The expressions of SP，IL-17 and IL-6 can be tremendously increased in the early stage of intracranial infection，especially in those with purulent meningitis．

Intracranial infections；SP；IL-17；IL-6

河南省教育厅科学技术研究重点项目(13A320662)

R51

A

1673-5110(2017)05-0036-03