共和县布鲁氏菌病的血清学调查

龚却卓玛 （青海省共和县畜牧兽医站 813000）

共和县布鲁氏菌病的血清学调查

龚却卓玛 （青海省共和县畜牧兽医站 813000）

应用虎红平板凝集试验(RBT)和试管凝集试验(SAT)，2008～2016年间对共和县4个半农半牧乡镇的9000份奶牛血清，进行布鲁氏菌病检测，检出阳性血清15份，阳性率0.116%，结果表明共和县奶牛布鲁氏病在近几年得到了有效控制。

布鲁氏菌病(以下简称布病)，是由布氏杆菌感染引起的慢性接触性人畜共患的传染病，其特征是妊娠母畜发生流产，公畜呈现睾丸炎。奶牛感染发病后临床特征为生殖器官的胎膜发炎，发生流产，引发子宫内膜炎、胎衣不下、卵巢囊肿等病而久配不孕。传播途径以消化道为主，其次为自然交配，皮肤、眼结膜、呼吸道感染都可引起本病。该病的发生不但对畜牧业生产造成巨大的经济损失，还严重威胁着畜产品质量卫生安全和人类健康。因此笔者认为奶牛布鲁氏菌病检测工作是当前动物防疫工作中的一项关键性任务，也是动物疫病监测中最为重要的一项工作。为全面掌握共和县奶牛布鲁氏菌病近几年的疫情动态和流行规律，及时发现和处理疫情，预测和分析发病特点及风险因素，制定科学防控措施。本人对共和县2008～2016年奶牛布鲁氏菌病血清学检测情况进行了调查。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 诊断液 每年所用虎红平板抗原；标准阴性、阳性血清；试管凝集抗原均由青海省动物疫病预防控制中心提供。

1.1.2 稀释液 0.5%石碳酸生理盐水。

1.1.3 被检血清 来源于全县养殖奶牛的4个乡镇，共9000份血清。

1.2 方法

每年首先用虎红平板凝集试验(RBT)对被检奶牛血清进行初筛，检出的阳性和可疑血清再用试管凝集试验(SAT)进行复检，以试管凝集试验做为检测的最终判定结果。操作及判定标准按照(GB/18646-2002)进行。

1.2.1 虎红平板凝集试验步骤 在洁净的玻璃板上划分成数个4cm2的方格，编号，用加样器滴加相应的血清0.03ml，在被检血清旁滴加抗原0.03ml，用牙签搅动血清和使之混合。每次设立阴、阳性血清对照。

1.2.2 试管凝集试验步骤 准备4支玻璃试管，将每份被检血清分别按1∶50、1∶100、1∶200、1∶400四个稀释度稀释，即第1管加1.2ml稀释液，第2～4管各加入0.5ml稀释液，然后用吸管吸取0.05ML被检血清加入第1管，反复吹打3次，吸取混合液0.25ml弃之，再吸取0.5ml混合液沿管壁加入到第2管中，用该吸管如前述方法混匀，再吸取第2管混合液0.5ml至第3管，如此倍比稀释至第4管，从第4管弃去混合液0.5ml。稀释完毕，将0.5ml20倍稀释的抗原加入已稀释好的各血清管中并振摇均匀。作阴性、阳性和抗原对照，并配置比浊管，将全部试管、对照管及比浊管充分振荡后置37℃温箱中培养20～22h，取出后置室温2h，然后以比浊管为标准判定结果。

1.3 结果判定

1.3.1 虎红平板凝集试验 在阴、阳性血清对照成立的条件下，被检血清在4min内出现肉眼可见凝集现象者判为阳性，无凝集现象，呈均匀粉红色者判为阴性。

1.3.2 试管凝集反应 在阴阳性对照成立的前提下，被检血清在1∶100稀释度出现“﹢﹢”以上的凝集现象时，判为阳性；1∶50稀释度出现“﹢﹢”以上的凝集现象时，可判为可疑，可疑反应的牛经过3～4周后重新采血检验，如果仍可疑，可判定为阳性。

2 检测结果

2008～2014年间共检测奶牛血清8004份，检出阳性奶牛15头，阳性率为0.19%，每年的检测情况祥见附表。

附表 2008～2014年奶牛布鲁氏菌病检测结果 (头、%)

附图 2008～2016年布鲁氏菌病血清学检测结果

3 讨论

（1）通过对共和县4个乡镇9000份奶牛血清连续9年进行布鲁氏菌病检测，共检出阳性血清15份，平均阳性率为0.16%，说明共和县奶牛布病感染率并不高，在有效控制范围内，而且从2010年以后每年呈下降趋势。2009年阳性率高达1.4%。这与2008年由于实施本县扶贫开发项目，从外县引进的奶牛数量大，检疫工作把关不严，使本县奶牛的布鲁氏菌病阳性率达到了历年的高峰期，见检测结果对比图。（2）本县采取以监测、检疫、隔离、阳性畜的及时扑杀、消毒和无害化处理等综合措施，特别是加大了阳性畜及时扑杀和调运奶牛的检疫监督力度，切断传染源和传播途径，使奶牛阳性率从2009年的1.4% 下降到2010年和2011年的0.4%和0.08%，且2012～2016年连续五年未检出阳性血清，这进一步说明布病防治措施的科学性和有效性。（3）为了巩固布病防治效果，防治疫情回升，还要继续加强监测工作，随时掌握疫情动态，制定合理的综合防治规划。加强检疫监督，严把检疫关，引进种畜和调运畜群时，严格按规范要求检疫。同时要加强布病防治知识的宣传力度，提高养殖户对布病危害的认识，增强防治意识。（4）布鲁氏菌病的防制是一项长期而艰巨的工作，在工作中要坚持“预防为主”的方针，采取以监测、检疫、隔离、阳性畜及时扑杀等综合防治措施，控制传染源，切断传播途径。做到加强联防、群防群治，同时加强畜间检疫，按省上下达的监测任务，合理采样，规范检测，注意疫情动态，及时发现并扑杀病畜，直至成为无病畜群。（5）加强牲畜饲养和卫生管理，严格扑杀阳性畜及污染物的无害化处理。坚持自繁自养，逐步选育更新种牛，这样才能加快共和县奶牛布鲁氏菌病净化的进程，使布鲁氏菌病得到长期稳定的控制。

S851.34+7

A

1007-1733(2017)06-0063-02

2017–02–17）