精甲霜灵与代森锰锌混配防治烟草黑胫病的增效作用

张蕊蕊，胡伟群，朱卫刚

(浙江省化工研究院有限公司 国家南方农药创制中心浙江基地，浙江 杭州 310023)

精甲霜灵与代森锰锌混配防治烟草黑胫病的增效作用

张蕊蕊，胡伟群，朱卫刚

(浙江省化工研究院有限公司 国家南方农药创制中心浙江基地，浙江 杭州 310023)

通过菌丝生长抑制法，测定精甲霜灵与代森锰锌及其5个配比对烟草黑胫病的室内毒力。通过共毒系数法计算出当精甲霜灵与代森锰锌质量分数比为1∶16时，两者表现增效作用，其余配比表现相加作用。此比例可以作为田间试验的指导比例。

精甲霜灵； 代森锰锌； 混配； 烟草黑胫病； 联合毒力

烟草黑胫病是烟草上主要真菌病害之一，该病原菌属于鞭毛菌亚门，卵菌纲，疫霉属(PhytophthoranocitianaeBreda de Haan)[1-2]。该病原菌主要侵染烟草植株的茎基部和根部，高温高湿情况极易诱导该病发生，发病时引起植株茎基部出现水渍状病斑进而引起植株倒伏，发病严重时植株在一两周之内整株枯死，在我国由烟草黑胫病造成的经济损失超过亿元[3]。

生产上通常采用种植抗病品种、作物轮作等防治措施来降低烟草黑胫病为害，但优质抗病品种难培育及病原菌变异导致抗性丧失等问题一直存在，故化学防治仍是目前防治烟草黑胫病最快捷、有效的方法。目前生产上常用的化学药剂有保护性杀菌剂如代森锰锌、丙森锌等以及以甲霜灵为代表的内吸性杀菌剂等[4]。精甲霜灵属于苯基酰胺类杀菌剂(PAFs)，主要作用机制是抑制RNA聚合酶Ⅰ的活性，从而抑制rRNA的合成，抑制病原菌在寄主体内的发展[5]。代森锰锌属于多位点的广谱有机硫保护性杀菌剂，其主要作用机制是抑制病菌体内丙酮酸的氧化。但内吸性杀菌剂因其作用位点单一、杀菌谱较窄，极易使病原菌产生抗药性。因此，研究开发新型高效复配剂对于克服和延缓病菌抗药性、有效地控制烟草黑胫病为害、保障烟草稳产高产具有重要意义。本研究主要针对精甲霜灵和代森锰锌及其不同配比对烟草黑胫病的联合毒力进行测定，旨在明确不同配比对烟草黑胫病的协同增效作用及最佳配比，以期为延缓烟草黑胫病对精甲霜灵和代森锰锌的抗药性及对烟草黑胫病的防治提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

供试药剂为95%精甲霜灵原药、98%代森锰锌原药，由浙江禾本作物科技有限公司提供。

供试菌株烟草黑胫病(PhytophthoranocitianaeBreda de Haan)由贵州大学提供，浙化院生测安评中心保存培养。

1.2 方法

1.2.1 药剂处理

参照杀菌剂农药室内生物测定试验准则和农药试验技术与评价方法进行[6]，采用菌丝生长速率法。将原药用DMF配制成5%乳油溶液，然后用含0.1%吐温80蒸馏水配制成试验所需的剂量。

精甲霜灵(A)、代森锰锌(B)及二者的5个配比(质量分数比分别为1∶24、1∶20、1∶16、1∶12、1∶8)。精甲霜灵设置5、2.5、1.25、0.625、0.312 5 mg·L-15个浓度，除此之外均设50、25、12.5、6.25、3.125 mg·L-15个浓度，每个质量浓度设置4个重复，另设空白对照。

1.2.2 毒力测定

将精甲霜灵配制成50、25、12.5、6.25和3.125 mg·L-1的溶液，分别吸取6 mL到灭菌过的三角烧瓶，加入50 ℃左右的PDA培养基54 mL，摇匀后倒入4个直径9 cm的平皿，制成4个含5、2.5、1.25、0.625和0.312 5 mg·L-1浓度的PDA含毒培养基。将培养好的烟草黑胫病病原菌，用直径5 mm的打孔器在菌落边缘打成菌块，用接种针将菌块移至预先配制成的PDA含毒培养基中央，处理后的培养皿置于25 ℃恒温培养箱培养，每处理重复4次。视CK菌落生长情况，采用十字法用卡尺量取各处理菌落直径。代森锰锌以及两者之间5个配比的含毒培养基配制方法同精甲霜灵。

1.2.3 药效计算

每个菌落十字交叉测两个直径，以其平均数代表菌落大小。

菌落生长抑制率/%=(空白对照菌落增长直径-药剂处理菌落增长直径)×100/空白对照菌落增长直径。

1.2.4 数据处理

参照文献[7]的方法，运用DPS数据处理系统3.11专业版对室内数据进行处理，求出各个药剂的抑制中浓度(EC50)，根据EC50值求出回归直线、相关系数和95%置信区间。参考文献[8]共毒系数法计算混剂的共毒系数(CTC)。若CTC>120，表明有增效作用；若CTC明显低于100(80以下)，表明为拮抗作用；若CTC在100～120，表明为相加作用。

2 结果与分析

由表1可知，精甲霜灵对烟草黑胫病表现较好的离体防效，在试验设置浓度5～0.3125 mg·L-1下，对烟草黑胫病的防效为91.4%～100.0%；代森锰锌在试验设置浓度50～3.125 mg·L-1时，对烟草黑胫病的防效为66.9%～93.9%。

由表2可知，采用五点法取5个代表性的配比，并对这5个配比和标准药剂进行毒力测定。结果表明，精甲霜灵A、代森锰锌B及不同比例复配对烟草黑胫病的EC50分别为0.016、1.194、0.273、0.268、0.153、0.176、0.128 mg·L-1。

由表3可知，精甲霜灵与代森锰锌复配的5个配比对烟草黑胫病的共毒系数分别为111.32、99.41、147.31、102.52、102.01，精甲霜灵与代森锰锌质量分数比为1∶16时，两者的共毒系数为147.31，表现为增效作用。其余配比共毒系数均在100～120，表现一定的相加作用。

表1 不同处理对烟草黑胫病病原菌的防效

药剂浓度/(mg·L-1)防效/%精甲霜灵A5100025991125975062595303125914代森锰锌B50939258601257666257193125669A∶B(1∶24)501000259661259326258783125840A∶B(1∶20)501000259801259466259123125860A∶B(1∶16)501000259751259356259013125872A∶B(1∶12)501000259871259696259413125899A∶B(1∶8)501000259801259666259393125894

表2 精甲霜灵与代森锰锌及复配对烟草黑胫病的毒力测定

药剂回归直线rEC50/(mg·L-1)置信区间精甲霜灵Ay=6894+1057x099001600051～00896代森锰锌By=4935+0845x097119402853～20424A∶B(1∶24)y=5510+0905x099027300014～10538A∶B(1∶20)y=5571+0998x099026800013～10386A∶B(1∶16)y=5678+0831x096015300010～08351A∶B(1∶12)y=5766+1014x099017600001～08992A∶B(1∶8)y=5810+0908x098012800003～07927

表3 精甲霜灵和代森锰锌及复配对烟草黑胫病的联合毒力

试验药剂配比EC50实测毒指理论毒指共毒系数结论精甲霜灵A1∶0001610000代森锰锌B0∶11194135A∶B1∶24027359053011132相加A∶B1∶2002686016059941相加A∶B1∶160153105471514731增效A∶B1∶12017691689410252相加A∶B1∶801281256123110201相加

3 小结与讨论

病原菌的抗药性是现代农业农药应用中产生的一个严重问题。病菌常常能够通过与杀菌剂作用机制有关的单一基因突变来解除特异性位点抑制剂的杀菌活性。作为应用广泛的内吸性杀菌剂，由于近些年来苯基酰胺类杀菌剂的大规模使用，使得我国烟草种植区烟草黑胫病的抗性逐渐严重[9]。据调查，在我国贵州、四川等地的烟草种植区相继出现甲霜灵类药剂对烟草黑胫病的抗药性，并有逐年加重的趋势[10-11]。代森锰锌由于是多位点保护性杀菌剂，但近些年来大规模使用，使其用量逐年加大而防效逐年降低[12]。因此，多位点抑制剂和具有不同作用机理的复配杀菌剂可以有效的解决病害抗药性，延长药剂的使用年限。

本文通过研究两种作用机理不同的单剂精甲霜灵和代森锰锌及其不同比例复配对烟草黑胫病的联合毒力。并通过共毒系数法计算出当精甲霜灵与代森锰锌质量分数比为1∶16时，两者表现出最大的增效作用。通过合适比例的药剂混配以期可以有效延缓烟草黑胫病对精甲霜灵及代森锰锌抗药性的产生。这个比例可以作为下一步田间试验的指导比例。

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(责任编辑：张瑞麟)

2017-02-28

浙江省科技计划项目(2016F10G5080002)

张蕊蕊(1986—)，女，山东淄博人，硕士，从事杀菌剂方面的研究工作，E-mail：zhangruirui0001@163.com。

10.16178/j.issn.0528-9017.20170531

S435

B

0528-9017(2017)05-0823-03

文献著录格式：张蕊蕊，胡伟群，朱卫刚. 精甲霜灵与代森锰锌混配防治烟草黑胫病增效的作用[J].浙江农业科学，2017，58(5)：823-825.