梅毒螺旋体抗体两种检测方法的对比分析

胡利清+周玉球

【摘要】 目的 探讨梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）与梅毒螺旋体抗体凝集法（TPPA）在梅毒螺旋体检测中的应用。方法 450例阴性标本和40例梅毒阳性标本， 采用TP-ELISA与TPPA检测血清梅毒螺旋体结果进行分析， 比较两种方法检测梅毒螺旋体的差异。结果 TP-ELISA与TPPA各检出梅毒螺旋体陽性41例和40例， 阳性检出率分别为8.4%和8.2%， TP-ELISA与TPPA阳性检出率比较差异无统计学意义（P>0.05）。两种方法的阳性符合率为97.6%， 阴性符合率为99.8%， 总符合率为99.8%。TP-ELISA的假阳性率为0.2%， TPPA无假阳性。结论 为实现大批量自动化处理和提高检测的准确性， 对于梅毒检验工作使用TP-ELISA筛查联合TPPA确认更为快速， 准确。

【关键词】 梅毒螺旋体抗体；梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验；梅毒螺旋体抗体凝集法

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.13.023

梅毒在《中华人民共和国传染病防治法》中列为乙类防治管理病种， 其是一种慢性、系统性性传播疾病[1]， 由苍白螺旋体苍白亚种（TP）感染所引起。其主要通过性传播途径、血液、母婴垂直传播途径等传播。随着医学和科技的不断发展， 各种有效的抗菌药物可积极控制梅毒的发展， 但梅毒发病率仍居高不下， 且梅毒感染还可增加患艾滋病的风险[2]。梅毒根据临床表现可分为一期梅毒、二期梅毒、三期梅毒、潜伏梅毒和胎传梅毒等。各期梅毒的临床特征分别为一期梅毒的硬下疳， 通常感染TP后7～60 d 出现；二期梅毒以二期梅毒疹可伴有全身症状；三期梅毒（晚期梅毒）中， 1/6为良性， 1/6～1/5为严重的晚期梅毒可有皮肤黏膜溃疡性损害或内脏器官的肉芽肿样病变， 近关节结节、心血管毒素、神经梅毒等表现[3]， 对自身组织器官的破坏性很强；潜伏梅毒（隐形梅毒）无明显临床症状， 脑脊液检查正常但梅毒血清试验阳性， 显性梅毒活动期后症状暂时消退后也可引起；孕期发生的显性或隐性梅毒叫妊娠梅毒， 此时， TP可通过胎盘或脐静脉传给胎儿让所生婴儿患先天梅毒， 梅毒孕妇极易造成流产、早产、死胎， 只有少数可生健康儿。据WHO估计梅毒在全世界流行， 每年约有1200万新发病例， 主要集中在南亚、东南亚和次撒哈拉非洲。我国近年来梅毒已成为报告病例数最多的性病， 因此采用高敏感性和高特异性的检验方法对于该病的确诊和治疗具有重要意义。本文采用TP-ELISA法和TPPA法两种方法对490份血清标本进行检测比较， 现报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选择2015年1月～2016年7月在本院做TPPA的标本490例， 其中临床确认梅毒标本40例， 批量做TP-ELISA检测。

1. 2 试剂和方法 TP-ELISA和TPPA检测试剂盒分别购自珠海丽珠试剂公司和日本富士瑞必欧。两种检测都严格按照检测试剂盒说明书进行操作。采用瑞士的HAMEITONG为TP-ELISA的洗板和判读。TP-ELISA每次测试均设置空白、阴性和阳性对照， 与待测标本同时检测。TPPA每次测试均设置阴性、阳性对照， 与待测标本同时检测， 肉眼判读。

1. 3 统计学方法 采用SPSS19.0统计学软件处理数据。计数资料以率（%）表示， 采用χ2检验。P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2. 1 检测梅毒螺旋体抗体的阳性率 采用TP-ELISA和TPPA从上述血清中检出TP阳性有41例和40例， 阳性检出率分别为8.4%和8.2%， TP-ELISA的假阳性率为0.2%， 两种方法阳性检出率比较， 差异无统计学意义（P>0.05）。

2. 2 TP-ELISA和TPPA检测的一致性 两种方法阳性符合率为97.6%（40/41）， 阴性符合率为99.8%（449/450）， 总符合率为99.8%（489/490）， TP-ELISA阳性TPPA阴性有1例。见表1。

3 讨论

血清学试验在梅毒的诊断中具有重要意义。当人体感染梅毒螺旋体后1个月后， 抗类脂质抗原的非特异性反应素抗体[主要免疫球蛋白（Ig）M和IgG]和抗梅毒螺旋体抗原的特异性抗体（主要是IgG、IgM）可在血清中产生， 可通过各种免疫学方法检测此两种抗体作为协助诊断梅毒。实验室梅毒血清学诊断的方法很多， 选取符合患者利益的灵敏度高、特异度强检查方法显得尤为重要。针对非螺旋体抗原（心磷脂抗原）的快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）、 梅毒甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）等检测方法， 可做定量试验， 用于判断疗效和病情活动程度；而针对梅毒螺旋体特异性抗原的TPPA、TP-ELISA等检测方法， 特异度高， 用于TP 感染的确证[4]。另外梅毒螺旋体IgM 抗体检测诊断婴儿的胎传梅毒意义很大。TP-ELISA是以梅毒螺旋体抗原包被， 以双抗原夹心同时检测IgG、IgM抗体， 由于TP-ELISA法利用了酶的放大系统， 提高了检测灵敏度[5]， TP-ELISA操作简便快捷， 易实现大批量自动化处理， 非常适合用于大批量的血清梅毒筛查工作。高龄老人[6]血清中的特殊成分和临床上许多疾病如自身免疫性疾病、恶性肿瘤、糖尿病等可使患者体内含有某些治疗性抗体、易嗜性抗体、类风湿因子、甲胎蛋白等， 这些特殊成分有一定的吸附作用， 让 TP-ELISA血清学试验有一定的假阳性率， 本文中前面分析的TP-ELISA法阳性而TPPA法阴性的1例结果， 可能是上述原因造成的。TPPA 试验是目前国际上公认的检测梅毒确诊的首选方法， 其检测血清中的梅毒特异性抗体是利用人工载体明胶粒子包被纯化后的梅毒螺旋体菌株成分制成抗原， 其特异度和灵敏度均较高， 但其试剂价格昂贵， 检测时需手工将标本做系列稀释， 自动化程度低， 以肉眼判断结果， 主观性较强， 不利于大批量标本检测[7-9]。本文结果中TPPA法灵敏度高特异性好， 不易出现假阳性反应[10]， 本文中TPPA法未出现假阳性结果。由于梅毒特异性抗体IgG出现较晚， 甚至可终身存在， 而心磷脂抗体可在梅毒治愈后消失， 所以TP-ELISA或TPPA阳性也无法判断是初次感染还是既往感染， 即在确认梅毒后， 用TRUST法来判断传染性和治疗疗效比较适宜。总之不同的梅毒检测方法联合检测， 可进一步提高梅毒检测的敏感性和特异性[11-14]。

综上所述， 为实现大批量自动化处理和提高检测的准确性， 对于梅毒检验工作使用TP-ELISA筛查联合TPPA确认更为快速， 准确。

参考文献

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[收稿日期：2017-02-28]