同型半胱氨酸水平对晚期孕妇血栓前状态标志物的影响

汪成丽，张志坚，彭涛，李新琳，向彬彬

(重庆市巴南区人民医院产科1、重症医学科2、检验科3，重庆401320)

同型半胱氨酸水平对晚期孕妇血栓前状态标志物的影响

汪成丽1，张志坚2，彭涛1，李新琳1，向彬彬3

(重庆市巴南区人民医院产科1、重症医学科2、检验科3，重庆401320)

目的分析同型半胱氨酸(HCY)水平对晚期孕妇血栓前状态(PTS)标志物的影响。方法收集2015年1月至2016年7月在巴南区人民医院产科就诊的289例晚期孕妇，按照HCY水平分为高HCY水平组(HHCY组：HCY≥15 μmol/L，n=69)和低HCY水平组(LHCY组：HCY<15 μmol/L，n=220)。检测两组晚期孕妇血栓前状态标志物指标，分析HCY水平与血栓前状态标志物的相关性。结果与LHCY组比较，HHCY组晚期孕妇的抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)含量明显降低[(68.45±12.37)mg/L vs(91.23±9.29)mg/L]；血栓调节蛋白(TM)、血小板α颗粒膜蛋白140 (GMP-140)含量明显升高[TM：(5.38±1.17)ng/mL vs(3.58±1.09)ng/mL；GMP-140：(20.12±6.32)ng/mL vs(15.28± 5.15)ng/mL]，差异均有统计学意义(P<0.05)。两组晚期孕妇间的D-二聚体(D-dimer)、纤维蛋白原(Fib)、红细胞压积(Hct)比较差异均无统计学意义(P>0.05)。相关性分析结果显示，血浆HCY水平与AT-Ⅲ呈负相关(r=-0.213，P= 0.018)，与TM呈正相关(r=0.278，P=0.021)。结论HCY可能通过改变晚期孕妇PTS介导对机体产生损伤作用。

晚期妊娠；同型半胱氨酸；血栓前状态；抗凝血酶；血栓调节蛋白；血小板α颗粒膜蛋白140；

血栓前状态(prothrombosis state，PTS)又称血液高凝状态，是多种因素引起的止血、凝血和抗凝系统失调的一种综合病理过程，临床中易致血栓形成的状态。同型半胱氨酸(homocysteine，HCY)是一种含硫氨基酸，既往研究已证实机体HCY水平异常与心脑血管疾病、自身免疫病、炎症性疾病及妊娠相关性疾病均密切相关[1-3]。妊娠期妇女因机体内激素等一系列变化会导致诸如凝血活性显著增强等现象发生，这也是正常妊娠期的一种生理现象，当机体内促凝因子水平的增高、抗凝物质水平的降低和纤维蛋白溶解功能低下几个因素的相互作用下，妊娠期血液形成高凝状态，是血栓及出血性疾病高发人群。本研究以晚期孕妇为研究对象，旨在分析HCY水平对晚期孕妇血PTS标志物的影响，为晚期孕妇高凝状态形成原因提供新的理论基础。

1 资料与方法

1.1 一般资料纳入2015年3月至2016年3月在本院门诊或住院的晚期孕妇。入组标准：晚期孕妇(孕37～40周)，年龄20～40岁，同意进行该研究者。排除标准：肝肾功能异常者；有心脑血管疾病、甲状腺疾病、肿瘤、出血及血栓性疾病病史者；吸烟、酗酒等嗜好者。最终纳入研究289例，其中高HCY水平组(HHCY组，HCY≥15 μmol/L)69例，低HCY水平组(LHCY组，HCY<15 μmol/L)220例。本研究经医院伦理委员会批准，所有患者均自愿参加本研究，并签署知情同意书。

1.2 观察指标与检测方法所有参加研究的晚期孕妇均于晨起空腹未服药的前提下采集静脉抗凝血标本。采用酶循环法检测血清中的HCY含量。微量离心法测定血细胞比容(Hct)。酶联免疫(ELISA)双抗体夹心法测定纤维蛋白原(Fib)、血栓调节蛋白(TM)、血小板α颗粒膜蛋白(GMP)-140、D-二聚体(D-Dimer)。免疫比浊法测定抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)。

1.3 统计学方法应用SPSS16.0统计软件进行数据分析，计量资料以均数±标准差(x-±s)表示，两独立样本的比较采用t检验，对两个正态分布的连续变量间相关关系检验采用Pearson直线相关分析，均以P< 0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组晚期孕妇的一般资料、HCY及PTS指标比较两组晚期孕妇的年龄、体质量、D-Dimer、Fib、Hct比较差异均无统计学意义(P>0.05)；HHCY组晚期孕妇的AT-Ⅲ明显低于LHCY组，而TM、GMP-140均明显高于LHCY组，差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05)，见表1。

表1 两组晚期孕妇的一般资料、HCY及PTS相关指标比较

表1 两组晚期孕妇的一般资料、HCY及PTS相关指标比较

组别HHCY组LHCY组t值P值例数69 220年龄(岁) 24.31±3.75 23.59±3.18 0.387 0.698体质量(kg/m2) 23.67±4.14 24.02±3.18 0.978 0.287 AT-Ⅲ(mg/L) 68.45±12.37 91.23±9.29 9.542 0.001 TM(ng/mL) 5.38±1.17 3.58±1.09 2.678 0.018 GMP-140(ng/mL) 20.12±6.32 15.28±5.15 3.219 0.012 D-Dimer(ng/L) 0.41±0.17 0.40±0.15 1.105 0.387 Fib(g/L) 4.12±1.57 4.10±1.59 1.003 0.418 Hct(%) 0.48±0.05 0.47±0.03 1.568 0.075

2.2 HCY与PTS相关指标的相关性对纳入晚期孕妇HCY与PTS指标进行Pearson直线相关分析，结果显示：HCY与AT-Ⅲ呈负相关(r=-0.213，P=0.018)；HCY与TM呈正相关(r=0.278，P=0.021)；HCY与GMP-140、D-Dimer、Fib、Hct无相关性(rGMP-140=0.064，P=0.578；rD-Dimer=0.044，P=0.756；rFib=-0.149，P=0.179；rHct= 0.080，P=0.443)。

3 讨论

妇女在妊娠期间为适应妊娠及分娩的需要，机体各项机能将出现一系列的适应性变化，凝血及纤溶系统的交化是其中重要的体现之一。的凝血因子在妊娠期被各种原因激活，这就使得妇女在妊娠期，特别是在妊娠晚期处于明显高凝状态，这种状态被称为血栓前状态(PTS)。PTS对于减少产妇产后出血风险具有积极意义，是机体所产生的一种保护性机制，但持续的高凝状态也可引起一系列的不良后果，可能增加妊娠高血压综合征、胎盘早剥、胎盘梗死及深静脉血栓形成等许多产科并发症的发生，严重者可导致孕产妇和围产儿的死亡，严重威胁孕产妇的安全[4-6]。因此妊娠期妇女PTS的研究尤其重要，可以为临床防治妊娠期及围生期PTS导致的危害提供指导。近年来各项研究表明妊娠期PTS发生的机制涉及众多方面，如促凝水平增高、抗凝物质下降、纤维蛋白溶解减少或凝血因子改变不平衡，同时还与先天遗传、后天获得、免疫失调、炎症反应及多种缺陷等因素有关，但仍未完全阐明其发生机制，需要研究者们继续探寻[7-8]。

HCY是一种含巯基氨基酸，主要来源于饮食摄取的蛋氨酸，是蛋氨酸和半胱氨酸代谢过程中重要的中间产物。研究表明HCY有促进血液流变学变化的作用，也是血栓形成的危险因素之一[9-10]。HCY导致血栓形成的机制比较复杂，研究表明HCY能损伤血管内皮细胞、促进血管平滑肌细胞增殖、增加血小板活性、促进炎症反应、导致基因突变[11-12]。故我们可以认为HCY是通过综合因素促进血栓形成，而这些因素中部分与妊娠期PTS的形成有关，因此HCY可能在妊娠期PTS发生发展中也占据一定的地位。

AT-Ⅲ是机体中重要的生理性抗凝物质之一，其在机体活性可有效反映抗凝系统的功能状态，AT-Ⅲ活性降低，血液抗凝作用明显减弱。TM是由血管内皮细胞合成的位于血管内皮细胞膜表面的糖蛋白，是凝血活化蛋白所必需的辅助因子，可作为血管内皮细胞损伤的有效评估指标。GMP-140在是位于血小板α颗粒的糖蛋白，可直接反映血小板的活化程度；D-Dimer及Fib是纤维蛋白的降解产物之一；他们都是反应PTS变化的重要参照指标。本研究结果显示HHCY组晚期孕妇PTS相关指标与LHCY晚期孕妇组比较有显著差异，主要表现在AT-Ⅲ明显低于LHCY组；而TM、GMP-140均明显高于LHCY组。这些结果表明HHCY晚期孕妇较LHCY晚期孕妇处于更严重的PTS，表明HCY对晚期孕妇PTS的确有一定的促进作用。我们在研究中通过分析整个晚期孕妇相关指标可以发现HCY与AT-Ⅲ呈负相关，与TM呈正相关，进一步证实了HCY与PTS存在明确的相关性，提示HCY可能通过影响PTS的程度介导对机体产生损伤，提示我们不仅要关注妊娠妇女的PTS状态，还要关注血HCY情况，利于早期判断并及时调整治疗。

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Effect of homocysteine level on prethrombotic state markers in late-pregnant women.

WANG Cheng-li1,ZHANG Zhi-jian2,PENG Tao1,LI Xin-lin1,XIANG Bin-bin3.Department of Obstetrics1,Department of Critical Care Medicine2, Department of Clinical laboratory3,Chongqing Ba'nan District People's Hospital,Chongqing 401320,CHINA

ObjectiveTo study the effect of different homocysteine levels on prethrombotic state markers in women in late pregnancy.MethodsFrom Jan.2015 to Jul.2016,289 women in late pregnancy in Chongqing Ba'nan District People's Hospital were selected and divided,according to homocysteine(HCY)level,into high HCY group(HHCY group,HCY≥15 μmol/L,n=69)and low HCY group(LHCY group,HCY<15 μmol/L,n=220).Prethrombotic state markers were detected,and Pearson correlation test was used to analyze the correlation between homocysteine and the laboratory parameters of prethrombotic state.ResultsCompared with LHCY group,the AntithrombinⅢ(AT-Ⅲ),thrombomodulin(TM),Granule membrane protein 140(GMP-140)in HHCY group were(68.45±12.37)mg/L,(5.38± 1.17)ng/mL,(20.12±6.32)ng/mL,as compared with(91.23±9.29)mg/L,(3.58±1.09)ng/mL,(15.28±5.15)ng/mL in the LHCY group(P<0.05).There were no significant differences in D-dimer,Fib,Hct between the two groups(P>0.05). Pearson correlation analysis showed that the level of plasma homocysteine was negatively correlated with AT-Ⅲ(r=-0.213,P=0.018)and was positively correlated with TM(r=0.278,P=0.021).ConclusionHomocysteine damage effect may be mediated through changing the prethrombotic state of women in late pregnancy.

Late pregnancy;Homocysteine;Prethrombotic state;AntithrombinⅢ;Thrombomodulin;Granule membrane protein 140

10.3969/j.issn.1003-6350.2017.10.018

R714.2

A

1003—6350（2017）10—1602—03

2016-11-03)

汪成丽。E-mail：4768587@qq.com