辅酶Q10对缺血性脑卒中大鼠血浆CRP、NF-κΒ、TNF-α水平的影响

齐悦，张慧，孙凯牡丹江医学院公共卫生学院；牡丹江医学院基础医学院

辅酶Q10对缺血性脑卒中大鼠血浆CRP、NF-κΒ、TNF-α水平的影响

齐悦1，张慧1，孙凯2
1牡丹江医学院公共卫生学院；2牡丹江医学院基础医学院

目的：研究辅酶Q10对缺血性脑卒中大鼠血浆CRP、NF-κΒ、TNF-α水平的影响，为临床应用该药物预防和治疗缺血性脑血管病提供实验依据。方法：采用线栓法栓塞大鼠大脑中动脉建立局灶性缺血性脑卒中模型。用longa五级四分法对大鼠进行神经功能评分。用ELISA法检测血清中CRP、NF-κB、TNF-α水平在不同组间的变化。用SPSS13.0软件，方差分析法对各组间结果进行统计学分析。结果：各组神经学评分差异具有显著性。各组血浆CRP、NF-κΒ、TNF-α水平也具有显著性差异。干预组CRP、NF-κΒ、TNF-α水平随剂量的升高而降低。结论：大鼠血浆CRP、NF-κΒ、TNF-α的含量，其降低水平与辅酶Q10含量有关。说明辅酶Q10对缺血性脑卒中具有保护作用。

辅酶Q10；缺血性脑卒中；大鼠

脑卒中（Stroke）是一种神经系统疾病,是人类致死致残的重要因素。C-反应蛋白（CRP）是一种灵敏的炎性标志物,在缺血性脑组织损伤的级联反应中的重要环节[1]。核转录因子-kappaB（NF-κB）与脑卒中的关系在报道很少，但最新研究表明阻断核转录因子-κB通路成为治疗缺血性脑卒中的靶点[2]。肿瘤坏死因子（TNF-α）是人体内最重要的具有多种生物学活性的细胞因子，它与高血压、动脉粥样硬化和缺血性脑卒中等多种疾病的发生密切相关[3]。辅酶Q10具有自由基清除、稳定细胞膜维持钙离子通道完整性、免疫增强、促进学习记忆、改善微循环障碍等作用[4]。本课题通过研究辅酶Q10对缺血性脑卒中大鼠血清CRP、NF-Κβ、TNF-α水平的影响及不同剂量的影响程度，确定辅酶Q10对缺血性脑卒中是否具有保护作用，为临床应用该药物预防和治疗缺血性脑血管病提供实验依据。

一、材料与方法

1材料

1.1 实验动物：体重250-350g雌雄各半的健康成年Wister大鼠，由牡丹江医学院动物中心提供。

1.2 试剂及药品：大鼠CRPELISA、NF-κΒELISA、TNF-αELISA试剂盒，辅酶Q10，玉米油等。

1.3 仪器设备：离心机，-80℃超低温冰箱，酶标仪，恒温水浴箱，电子天平，微量加样器等。

2方法

2.1 实验动物分组：将30大鼠编号。随机分五组，每组N=6、假手术组和模型组给予玉米油灌胃7天，各干预组分别给予不同剂量的辅酶Q10（10mg/kg、20mg/kg、40mg/kg以相同的玉米油为溶剂）溶液灌胃7天。

2.2 大鼠缺血性脑卒中模型的制备：利用线栓法制备大鼠缺血性脑卒中模型。

2.3 神经功能评分：参考Longa的5级4分法。

2.4 标本采集：腹腔麻醉，腹主动脉采血,离心。将血浆与剩余血细胞放入标记后-80℃冰箱保存。

2.5 标本检测：按试剂盒说明书进行操作检测。

2.6 统计学处理：计量资料用xˉ±s表示，采用SPSS13.0统计软件进行重复测量方差分析，检验水准取α=0.05，P＜0.05认为差异有显著性。不同组间的计量资料比较采用t检验。

3结果

3.1 神经学评分各组神经学评分差异具有显著性，经多重比较，模型组神经功能评分明显高于假手术组，辅酶Q10干预组神经功能评分明显低于模型组而高于假手术组。干预组内神经功能评分随辅酶Q10剂量增加而降低。见表1。

表1 各组的神经功能学评分

3.2 血浆CRP、NF-kB、TNF-α水平比较各组间血浆CRP、NF-kB、TNF-α水平差异具有显著性。血浆CRP、NF-kB、TNF-α水平均为模型组高于假手术组，辅酶Q10干预组高于假手术组低于模型组。干预组内水平随辅酶Q10剂量增加而降低。见表2。

表2 各组间血浆CRP、NF-kB、TNF-α水平比较（xˉ±s，ng/ml）

二、讨论

从行为学上观察及数据可知：模型组神经功能评分明显高于假手术组，说明局部脑组织缺血后造成了明显的神经功能障碍；辅酶Q10处理后，神经功能评分明显低于模型组（P=0.000）,提示辅酶Q10能够改善局灶性缺血性损伤后的神经功能。我们分析辅酶Q10对神经的保护作用可能是因为其具有稳定细胞膜维持钙离子通道完整性的功能。

缺血性脑卒中大鼠血浆CRP、NF-kB、TNF-α水平：模型组均高于假手术组（P=0.000）；辅酶Q10干预组均高于假手术组（P= 0.000）低于模型组（P=0.000）；辅酶Q10干预组内水平均随辅酶Q10剂量增加而降低。假手术组由于具有创口能够引起炎症反应，因而会引起CRP、NF-kB、TNF-α等炎症因子水平升高。

已有研究表明[5]，通过注射辅酶Q10，能够清除自由基和增强免疫，降低血浆CRP水平。

参与免疫反应的早期和炎症反应各阶段的许多分子都受NF-κB的调控，所以要降低NF-κB水平就一定要做到增强免疫和抗炎。辅酶Q10具有免疫增强作用，在降低NF-kB水平中起到重要作用。

李海龙,等在文献中提到，随着PSD患者抑郁病情程度逐渐加重,血清IL-2、IL-6、TNF-α表达水平呈明显升高趋势（P＜0.05）[6]。所以有效调节血清细胞因子水平可成为治疗PSD的新途径。

三、小结

神经功能评分显示局部脑组织缺血后造成了明显的神经功能障碍而辅酶Q10能够改善局灶性缺血性损伤后的神经功能。改善水平随剂量增加而升高。

血浆中CRP、NF-kB、TNF-α水平测定显示：辅酶Q10可以降低缺血性脑卒中大鼠血清CRP、NF-κΒ、TNF-α的水平。并且降低的程度与辅酶Q10剂量相关，剂量越高影响越大。

[1]郭娜飞,王倩,周海霞等.进展性缺血性脑卒中的危险因素分析[J].临床合理用药，2017,10（1）：9-12.

[2]裴雯雯,董莎,刘瑞珍.炎性信号通路与缺血性脑卒中[J].中西医结合心脑血管病杂志,2014,12（9）：1141-1142.

[3]牛莹莹,姚立言,郭毓鹏等.C-反应蛋白、肿瘤坏死因子-α与缺血性脑卒中的关系病例对照研究[J].牡丹江医学院学报,2014,35（2）：38-40.

[4]蔡丽敏.阿伐他丁单用及与辅酶Q10连用对急性脑卒中血脂和肝功能的影响[D].山东：泰山医学院，2014：16.

[5]乐凯艳,夏章平.辅酶Q10注射液对侵袭性牙周炎患者龈沟液TNF-α、hs-CRP影响研究[J].中国生化药物杂志,2016,36（3）：149-150.

[6]李海龙,姚慧娟.脑卒中后抑郁患者血清细胞因子的水平变化及临床意义[J].西南军医,2016,5（3）：249-250.

孙凯。