联组检测梅毒特异性和非特异性抗体效果观察

廖世业?李军俊?熊丽娟

[摘要] 目的 觀察联组运用特异性抗体检测试验ELISA法、胶体金法和非特异性抗体检测试验TRUST法检测诊断梅毒的效果。 方法 联组运用ELISA法、胶体金法和TRUST法对302例各期梅毒病例进行检测诊断，以其中两种及以上结果阳性判定为联组检测阳性，同时对全部样本用TPPA法作对照检测，计算四种检测方法各自对各期梅毒的阳性检出率。对联组检测试验组和对照试验组检测结果进行比较。 结果 56例潜伏期梅毒病例ELISA法、胶体金法、TRUST法和TPPA法阳性检出率分别为91.1%、94.6%、75.0%和96.4%；78例一期梅毒四种方法阳性率分别为97.4%、97.4%、96.2%和100.0%；102例二期梅毒四种方法阳性检出率均为100%；66例三期梅毒四种方法阳性率分别为100.0%、93.9%、66.7%和100.0%。联组检测试验组中ELISA法、胶体金法、TRUST法三种方法各自对潜伏期、一期和三期梅毒病例阳性检出率虽与对照组TPPA法稍有差别，但联组判别结果后56例潜伏期梅毒病例实际阳性54例，与对照组阳性率相等；78例一期、102例二期和66例三期梅毒，联组试验结果和对照组阳性检出率均为100%，二者对此三期梅毒检出结果比较差异无统计学意义（P>0.05）。 结论 联组运用特异性抗体检测试验ELISA法、胶体金法和非特异性抗体检测试验TRUST法检测不同期梅毒病例检出效果较好。

[关键词] 特异性；抗体；联合；检测；梅毒

[中图分类号] R759.1 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2017）05-19-04

[Abstract] Objective To observe the effect of specific antibody test ELISA method，colloidal gold method and non-specific antibody test TRUST method in joint detection of diagnosis of syphilis. Methods The joint of ELISA method，colloidal gold method and TRUST method was used to detect and diagnose the 302 cases of syphilis.In which two or more results were found for positive group.At the same time，all samples were detected by TPPA method.The positive detection rate of four methods for each stage of syphilis was calculated.The test results were compared between the test group and the control group. Results 56 cases of latent syphilis cases ELISA，colloidal gold，TRUST and TPPA positive detection rates were 91.1%，94.6%，75% and 96.4%，respectively.78 cases of primary syphilis of four methods positive rates were 97.4%，97.4%，96.2% and 100%，respectively.102 cases of secondary syphilis positive rate of the four methods were 100%.66 cases of the three stage syphilis positive rates of the four methods were 100%，93.9%，66.7% and 100%，respectively.There was slightly different on relevance ratio between ELISA method，colloidal gold method and TRUST joint test group in three methods of latency，one and three stage and TPPA of control group.But the results of 56 cases of latent syphilis cases group after the actual 54 cases of positive control group，and the positive rates were equal.For the 78 cases of primary syphilis，102 cases of secondary syphilis and 66 cases of three stage syphilis，the positive detection rates of joint test results and control group were 100%.There was no statistical difference between the two groups in the detection of syphilis in the three stage （P>0.05）. Conclusion The effect of specific antibody test ELISA method，colloidal gold method and non-specific antibody test TRUST method in joint detection of diagnosis of syphilis is good.

[Key words] Specificity；Antibody；Union；Syphilis；Detection

梅毒为乙类性传播传染病，近年发病率呈上升趋势。因较多梅毒病例临床表现呈现复杂性、不典型性的特点，临床诊断工作难度较大，从而使得血清学检测试验对梅毒的诊断，以及判定病程的发展、痊愈和药物疗效工作的意义更为突显[1]。为提升临床

实验室对不同期梅毒病例的实验诊断效果，自2013年10月起联组运用特异性抗体检测试验酶联免疫吸附试验（ELISA法）、胶体金法和非特异性抗体检测试验甲苯胺红不加热血清试验（TRUST法）联组检测诊断梅毒，获得了较好的效果，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

2013年10月～2016年10月接诊的潜伏期梅毒56例、一期梅毒78例、二期梅毒102例和三期梅毒66例等302例不同期梅毒病例。所有病例的诊断严格依照《梅毒诊断标准》（WS273-2007），其中56例潜伏期梅毒病例均为血清梅毒螺旋体抗原试验阳性而脑脊液检测无异常者；78例一期梅毒病例中皮肤黏膜损害样本暗视野显微镜检出梅毒螺旋体23例、血清梅毒螺旋体抗原试验阳性55例；102例二期梅毒病例中皮肤黏膜损害样本暗视野显微镜检出梅毒螺旋体64例、血清梅毒螺旋体抗原试验阳性38例；66例三期梅毒病例中，脑脊液荧光螺旋體抗体吸收试验（FTA-ABS）阳性18例、血清梅毒螺旋体抗原试验阳性38例、病损组织病理学检测阳性10例。全部病例中男169例、女133例，平均年龄（45.2±12.3）岁。

1.2 检测方法

联组运用特异性抗体检测试验ELISA法、胶体金法和非特异性抗体检测试验TRUST法对302例不同期梅毒病例进行检测，以其中两种及以上试验结果阳性判定为联组检测试验阳性，同时对全部样本用梅毒明胶颗粒凝聚试验（TPPA法）作对照检测。试验所需试剂盒均为国家食品药品监督管理局批准上市的体外诊断试剂，并在有效期内使用，其中ELISA法试剂盒由英科新创（厦门）生物公司提供、胶体金法试剂盒由万泰生物（北京）药业有限公司提供、TRUST法试剂盒由荣盛科技（上海）有限公司提供、TPPA法试剂盒由日本富士株式会社提供。各种试验具体操作依试剂盒说明书。试验所用DRW320洗板机和DR200Bc酶标仪由华卫德朗（无锡）仪器有限公司提供，经质监检校正常状态运行。

1.3 数据分析方法

检测完成后，运用Microsoft Excel2010软件分析计算联组检测试验组和对照试验组中四种检测方法各自对各期梅毒的阳性检出率，采用SPSS 17.0统计软件进行统计分析，采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 四种方法检测302例不同期梅毒病例结果

56例潜伏期梅毒病例ELISA法检出51例、胶体金法检出53例、TRUST法检出42例、TPPA法检出54例，阳性检出率分别为91.1%、94.6%、75.0%和96.4%；78例一期梅毒四种方法分别检出76、76、75和78例，阳性率分别为97.4%、97.4%、96.2%和100.0%；102例二期梅毒四种方法阳性检出率均为100%；66例三期梅毒四种方法分别检出66、62、44和66例，阳性率分别为100.0%、93.9%、66.7%和100.0%。见表1。

2.2 联组检测试验和对照试验结果比较

56例潜伏期梅毒病例ELISA法、胶体金法和TRUST法三种试验共同阳性32例、ELISA法和胶体金法共同阳性12例、ELISA法和TRUST法共同

阳性7例、胶体金法和TRUST法共同阳性3例，依联组试验阳性判别规则实际阳性54例，与对照组阳性率相等，差异无统计学意义（P>0.05）；78例一期、102例二期和66例三期梅毒病例，联组试验结果和对照组阳性检出率均为100%，二者对此三期梅毒检出结果比较差异无统计学意义（P>0.05）。见表2。

3 讨论

人体感染梅毒苍白密螺旋体后，机体可产生特异性抗梅毒螺旋体抗体和非特异性抗体，相应地梅毒的血清免疫学实验检测方法也分为针对性检测特异性抗体和检测非特异性抗体两类。特异性梅毒抗体检测试验中ELISA法、胶体金法和TPPA法使用较多，尤以前两者使用更为普遍。其中ELISA法运用纯化处理的梅毒螺旋体重组蛋白特异抗原包被固相板条，加上梅毒血清和辣根过氧化酶标记的抗人IgG抗体，利用酶免疫法检测患者血清中的抗梅毒螺旋体特异性抗体，胶体金法采用纯化的单克隆梅毒螺旋体基因工程抗原检测梅毒螺旋体抗体，TPPA法则用梅毒螺旋体致敏明胶颗粒，通过产生肉眼可见的凝集反应来检测患者血清中的抗梅毒螺旋体抗体，是公认的梅毒确认实验[2]。非特异性梅毒抗体检测试验中TRUST法最为常用，采用从牛心脏中提取的心磷脂、胆固醇、卵磷脂作为抗原重悬于甲苯胺红溶液中，检测患者血清中非特异性抗类脂质抗体。

目前临床试验室在检测诊断梅毒时，通常采用两种策略，一是以非梅毒螺旋体特异抗体检测试验过筛，再以特异性抗体检测试验进行确认，二是先进行特异性抗体检测试验，阳性时再进行非特异性抗体检测试验[3]。由于特异性抗体和非特异性抗体两类检测试验各有优缺点[4-5]，在诊断梅毒过程中将两类方法进行联合检测就显得尤为必要[6-13]。此次运用特异性抗体和非特异性抗体试验联组检测302例不同期梅毒病例血清结果显示，56例潜伏期梅毒病例ELISA法、胶体金法、TRUST法和TPPA法法阳性检出率分别为91.1%、94.6%、75.0%和96.4%；78例一期梅毒病例阳性检出率分别为97.4%、97.4%、96.2%和100.0%；102例二期梅毒阳性检出率均为100%；66例三期梅毒阳性检出率分别为100.0%、93.9%、66.7%和100.0%。ELISA法、胶体金法、TRUST法和TPPA法对一期、二期梅毒病例阳性检出率各自比较，差异无统计学意义（P>0.05）。胶体金法对潜伏期病例和ELISA法对三期梅毒病例诊断，与TPPA法检出结果亦无显著性差异；TRUST法对潜伏期和三期梅毒阳性检出率虽稍低于TPPA法，但其与ELISA法和胶体金法联组后检测潜伏期、一期、二期和三期梅毒病例阳性率与TPPA法比较差异无统计学意义（P>0.05），表明TRUST法与ELISA法、胶体金法之间存在一定的互补性，不能完全为ELISA法和胶体金法所取代[14]。