结核病的荧光定量核酸扩增技术诊断及肺功能与炎性因子测定

张忠原

（菏泽市立医院，山东菏泽274031）

结核病的荧光定量核酸扩增技术诊断及肺功能与炎性因子测定

张忠原

（菏泽市立医院，山东菏泽274031）

目的探讨结核病的荧光定量核酸扩增技术检验及肺功能和炎性因子的变化。方法疑似结核病261例，均进行荧光定量核酸扩增技术和痰涂片检查，以影像学检查联合细菌学检查进行确诊。应用SPSS21.0软件，所获数据采用方差分析和t检验。结果确诊结核病患者197例，占75.48%；非结核病患者64例，占24.52%。荧光定量核酸扩增技术检查结核病正确诊断197例，其中结核病诊断136例，占69.03%；阴性诊断61例，占30.96%。非结核病64例，荧光定量核酸扩增技术检查阳性2例，占3.12%；阴性62例，占96.87%。确诊结核病患者197例中痰涂片检查结核病正确诊断106例，占53.81%。阴性96例，占48.73%。非结核病64例，其中阳性5例，占7.81%，阴性59例，占92.19%。荧光定量核酸扩增技术检查结核病阳性率比较,P＜0.005；肺结核阳性率比较P＞0.05。荧光定量核酸扩增技术检查的灵敏度为69.04%，特异度为96.88%、约登指数0.659、阳性预测值为98.55%和阴性预测值为50.41%，均高于痰涂片检查灵敏度为51.27%、特异度为92.19%、约登指数0.435、阳性预测值为95.28%和阴性预测值为38.06%。非结核病组与结核病组比较FEV1%、FEV1/ FEC%、FEF25%、FEF50%比较，P＜0.0005。非结核病组与结核病组比较IL-6、IL-8、TNF-α、TGF-1比较，P＜0.0005。结论荧光定量核酸扩增技术检查方法对结核病诊断具有较高价值，肺功能与炎性因子也有一定的辅助诊断作用。

荧光定量核酸扩增技术/诊断应用；结核病/诊断；肺功能；炎性因子

结核病是由结核杆菌感染引起的传染病，对患者的身心健康和生命安全危害较大，随着患病率的提高，其已经成为严重的公共卫生问题，在我国也是重大传染病之一[1]。实验室检查对于诊断结核具有重要意义，目前结核病常使用痰涂片法进行诊断，但是检查结果并不十分理想，随着分子生物技术的进展，在结核病诊断中发挥着重要作用，其中利福平耐药实时荧光定量核酸扩增技术（Xpert Mtb/RIF）是近年来诊断结核病的新型方法，可为早期诊断提供帮助[2,3]。为此，我们自2014年10月—2015年9月间对疑似结核病患者进行涂片诊断和荧光定量核酸扩增技术诊断，并对肺功能和炎性因子的变化进行检测。现报道如下。

1 临床资料

1.1 一般资料疑似结核病患者261例，其中男性140例，女性121例，年龄7～72岁，平均年龄（46.82± 8.69）岁，均伴有不同程度的发热、咳嗽、胸膜积液或者腹水等临床症状。同时检测肺功能FEV1、FEV1/ FEC%、FEF25%、FEF50%及炎性因子白介素-6（IL-6）、白介素-8（IL-8）、肿瘤坏死因子（TNF-α）、转化生长因子-1（TGF-1）的水平。所有研究对象均知情同意，并签署知情同意书。

1.2 检查方法所有研究对象清晨漱口3次后用力咳痰，取痰液进行荧光定量核酸扩增技术和痰涂片实验室检查：（1）荧光定量核酸扩增技术检查，痰液与前处理液按照1∶2的比例旋涡震荡混匀，室温静置15 min后转移至反应盒中，然后将反应盒置于Gene Xpert仪器中进行全自动检测（美国Cepheid公司），反应结束后观察检查结果[4]。（2）痰涂片检查，将采集的痰液在玻璃片上涂片，抗酸染色后在显微镜下观察以进行诊断。以影像学检查联合细菌学检查进行确诊。

1.3 统计学处理应用SPSS 21.0软件。所获数据采用方差分析和t检验。

2 结果

2.1 两种实验室检查诊断准确率的比较确诊结核病患者197例，占75.48%，非结核病患者64例，占24.52%，其中荧光定量核酸扩增技术检查正确诊断197例（结核病诊断136例，非结核病诊断61例），痰涂片检查正确诊断160例（结核病诊断101例，非结核病诊断96例），荧光定量核酸扩增技术检查准确率为75.86%，明显高于痰涂片检查为61.30%，两组比较，P＜0.05。荧光定量核酸扩增技术检查结核病阳性率比较，P＜0.005；肺结核阳性率比较，P＞0.05。

2.2 两种实验室检查诊断价值的比较荧光定量核酸扩增技术检查的灵敏度为69.04%、特异度为96.88%、约登指数为0.659、阳性预测值为98.55%和阴性预测值为50.41%，痰涂片检查灵敏度为51.27%、特异度为92.19%、约登指数为0.435、阳性预测值为95.28%和阴性预测值为38.06%。

2.3 结核病与非结核病肺功能见表1。

表1 结核病与非结核病呼吸功能指标比较

表1 结核病与非结核病呼吸功能指标比较

两组FEV1%、FEV1/FEC%、FEF25%、FEF50%比较，t=26.510、23.970、6.0581、10.230，P＜0.0005。

2.4 结核病与非结核病炎性因子检测比较见表2。

表2 结核病与非结核病炎性因子检测比较

表2 结核病与非结核病炎性因子检测比较

两组IL-6、IL-8、TNF-α、TGF-1比较，t=42.065、90.680、56.537、20.844，P＜0.0005。

3 讨论

早期发现和治疗结核病是防治工作的重要内容，传统痰涂片实验室检查虽然操作简单，但检查结果容易受到检验人员的技术水平以及收集痰液标本的质量的影响，常出现漏诊和误诊情况，很难满足临床诊治的需要，导致病情延误[5]。临床应用荧光定量核酸扩增技术技术诊断肺结核已趋于成熟，有效避免其他因素的感染，敏感性较高[6,7]，同时荧光定量核酸扩增技术具有自动化、时间短、生物安全性等优点，较易应用于临床结核病的诊断[8]。

本研究发现荧光定量核酸扩增技术检查正确诊断198例（结核病诊断136例，非结核病诊断62例），痰涂片检查正确诊断160例（结核病诊断101例，非结核病诊断59例），荧光定量核酸扩增技术检查准确率（75.86%）明显高于痰涂片检查（61.30%），并且荧光定量核酸扩增技术检查的灵敏度（69.04%）、特异度（96.88%）、约登指数（0.659）、阳性预测值（98.55%）和阴性预测值（50.41%）均高于痰涂片检查（分别为51.27%、92.19%、0.435、95.28%和38.06%），这与以往研究结果一致[9,10]，说明荧光定量核酸扩增技术检查方法较传统痰涂片具有较高的灵敏度和特异度，对结核病的诊断价值更高，并且也较为方便快速，有助于结核病的早期诊断和治疗。

非结核病组与结核病组比较FEV1%、FEV1/FEC%、FEF25%、FEF50%比较，P＜0.0005,有非常显著性差异，说明在结核病没有明确诊断之前肺功能已有影响。非结核病组与结核病组比较IL-6、IL-8、TNF-α、TGF-1比较，P＜0.0005，有非常显著性差异，说明结核病没有明确诊断之前炎性因子已经有了变化。与文献报道一致[11，12]。

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[11]韩丹，段慧楠，饶有益.纤维支气管镜灌洗液Xpert MTB/RIF检测对肺结核诊断和利福平耐药菌株筛选的临床价值[J].医学综述, 2016,22(16)：3243-3246.

[12]邹琳琳，黎友伦.γ-干扰素释放试验在免疫损伤并肺结核患者中的应用[J].中国免疫学杂志，2016，32(6)：878-881.

Fluorescence Quantitative Techniques for Nucleic Acid Amplification Diagnosis of Tuberculosis and Pulmonary Function and Inflammatory Factor Determination

Zhang Zhongyuan
(The Municipal Hospital of Heze City,Heze 274031,Shandong)

ObjectiveTo study the fluorescence quantitative nucleic acid amplification techniques for TB diagnosis value.Methods261 cases with suspected tuberculosis(TB),fluorescence quantitative techniques for nucleic acid amplification and sputum smear examination,confirmed with imaging examination combined bacteriology examination. SPSS21.0 application software,the data obtained using analysis of variance andttest.ResultsThe diagnosis of TB patients 197 cases,accounting for 75.48%,than 64 cases of patients with tuberculosis,accounting for 24.52%.Which Mtb/ RIF check TB correct diagnosis of 197 cases with tuberculosis diagnosis in 136 cases,accounting for 69.03%.Negative in the diagnosis of 61 cases,accounting for 30.96%.Of 64 cases of tuberculosis,fluorescence quantitative techniques for nucleic acid amplification check positive in 2 cases,accounting for 3.12%.Negative 62 cases,accounting for 96.87%. Confirmed 197 cases of patients with tuberculosis in sputum smears correct diagnosis of 106 cases of tuberculosis,accounting for 53.81%.Negative 96 cases,accounting for 48.73%.Of tuberculosis in 64 cases,of which the positive in 5 cases,accounted for 7.81%,negative 59 cases,accounting for 92.19%.Fluorescence quantitative techniques for nucleic acid amplification testing TB positive rate comparisons,P＜0.005.Tuberculosis positive rate comparisons,P＞0.05.Fluorescence quantitative technical inspection for nucleic acid amplification sensitivity of 69.04%,96.88%,and an index of 0.659,the positive predictive value was 98.55%and negative predictive value was 98.55%,were higher than in sputum smear examination sensitivity was 51.27%,92.19%,and an index of 0.435,the positive predictive value was 95.28%and negative predictive value was 95.28%.Non tuberculosis and tuberculosis group comparison FEV1%,FEV1/FEC, FEF25%,FEF50%,P＜0.0005.Non tuberculosis and tuberculosis(TB)group is IL-6,IL-8,TNF-αcompared to de-cide a and TGF-1,P＜0.0005.ConclusionThe fluorescence quantitative inspection method for nucleic acid amplification of TB diagnosis with high value,pulmonary function and inflammatory factor also to have certain auxiliary diagnosis function.

Fluorescence quantitative nucleic acid amplification technique/diagnosis;TB/diagnosis;Lung function; Inflammatory cytokines

R725.1

：A

：1008-4118（2017）01-0025-03

10.3969/j.issn.1008-4118.2017.01.008

2016-10-09