胡雄贵,蔡文杰,邓 缘,张 星,3,陈 晨,张翠永(.湖南省畜牧兽医研究所,湖南 长沙 403;2.湖南三和生物科技有限公司,湖南 长沙 4025;3.湖南鑫广安农牧股份有限公司,湖南 长沙 4000)
玉屏风散多糖对仔猪免疫力和猪瘟抗体水平的影响
胡雄贵1,2,蔡文杰1,2,邓 缘1,张 星1,3,陈 晨1,张翠永1
(1.湖南省畜牧兽医研究所,湖南 长沙 410131;2.湖南三和生物科技有限公司,湖南 长沙 410125;3.湖南鑫广安农牧股份有限公司,湖南 长沙 410100)
试验旨在研究玉屏风散多糖对仔猪猪瘟免疫效果和血清免疫力的影响。试验选用初始体重相近的杜长大三元仔猪60头,随机分为5个处理组,每个处理组4个重复,每个重复3头猪,试验期21 d。试验Ⅰ组为对照组,饲喂基础饲粮,试验Ⅱ组至试验Ⅴ组分别在饲粮中添加100、200、400、600 mg/kg的玉屏风散多糖。结果表明:1)免疫后添加200 mg/kg以上的玉屏风散多糖的试验Ⅲ至Ⅴ组与对照组相比猪瘟平均阻断率有显著差异(P<0.05),添加剂量为400 mg/kg的试验Ⅳ组的猪瘟平均阻断率最高,离散度最低。2)随着玉屏风散多糖添加量的提高,仔猪血清免疫球蛋白IgA、IgG、IgM含量逐渐提高。IgA含量在添加200 mg/kg时即可达到显著差异(P<0.05),IgG和IgM达到显著性差异的浓度分别为400和600 mg/kg。结果表明,饲粮中添加玉屏风散多糖可增强仔猪对猪瘟的免疫效果,添加量以400 mg/kg效果最好。同时可提高仔猪血清的免疫球蛋白含量,增强机体免疫力,添加量以600 mg/kg效果最好。
玉屏风散;仔猪;猪瘟抗体;免疫球蛋白
玉屏风散在医学临床上应用非常广泛,涉及免疫系统、血液病以及消化系统、皮肤病等等,具有提高机体免疫力,增强抗氧化力的作用[1]。药方由防风30 g、黄芪60 g(蜜炙)、白术60 g组成一剂。玉屏风提取物中的玉屏风散多糖含黄芪多糖、白术多糖和防风多糖等,具有广泛的免疫增强作用[2]。在动物研究中,可加强动物机体的免疫功能、提高机体的抗氧化力,对生长性能具有促进作用[3],但在动物生产中的应用较少。本研究以断奶仔猪为试验对象,探索玉屏风散多糖对仔猪免疫指标和猪瘟抗体的影响,旨在为玉屏风散多糖在畜牧生产中,特别是新型绿色饲料添加剂在仔猪饲养上的应用提供参考。
1.1 试验材料
试验猪为杜长大三元杂种断奶仔猪。玉屏风散多糖由湖南三和生物科技有限公司提供,经实验室检测,玉屏风散多糖中总还原糖为35.13%、粗蛋白质为17.70%、粗脂肪为0.92%、粗灰分为9.36%、水分为5.03%、粗纤维为0.67%,纯度约为80%。
1.2 试验动物及设计
采用单因素完全随机化试验设计,将体重相近(7.7±0.51)kg、遗传基础一致的60头杜长大三元仔猪随机分为5个处理组,每个处理组4个重复,每个重复3头猪,预试期为3 d,均饲喂基础饲粮,正试期为21 d。试验Ⅰ为对照组,饲喂基础饲粮,试验Ⅱ至试验Ⅴ组分别在基础饲粮中添加玉屏风散多糖100、200、400、600 mg/kg。
1.3 饲养试验
试验在湖南鑫广安农牧股份有限公司的猪场进行,正试期开始于2016年9月1日,结束于2016年9月21日,试验期为21 d。仔猪舍为半开放式,自由饮水,粉料饲喂,自由采食。舍内温度控制在28~32℃,湿度控制在60%~80%。试验前对猪舍进行全面消毒,按照猪场常规管理对仔猪进行驱虫与免疫接种。
1.4 猪瘟抗体和血清免疫力测定
试验开始第1天对每头仔猪进行猪瘟疫苗免疫,接种剂量为2头份/头。在试验开始(免疫前)和试验结束后的第2天清早进行前腔静脉采血,试验前采血5 mL,用于检测猪瘟抗体水平,试验后采血10 mL,用于猪瘟抗体和免疫球蛋白检测。血液于4℃、3 500 r/min离心10 min,分离出血清,分装于EP管中,-20℃保存。血清免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)的含量测定采用全自动生化分析仪,检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所,猪瘟病毒抗体检测使用ELISA试剂盒,检测试剂盒购自美国爱德士生物科技有限公司。
1.5 数据处理及统计分析
试验采用Excel进行前期数据统计,计算结果以平均数±标准差表示,使用SPSS 19.0软件进行数据差异性分析,采用单因素方差分析和Duncan法进行多重比较。
2.1 玉屏风散多糖对猪瘟抗体水平的影响
由表1可见,免疫前猪瘟阻断率无显著性差异(P>0.05),离散度均值为30.3。免疫21 d后检测猪瘟阻断率最高为试验Ⅳ组的(92.12±12.2)%,最低为对照组的(67.32±11.0)%,离散度最低为试验Ⅳ组的13.87,最高为试验Ⅰ组的23.57,均值为17.3。免疫后试验Ⅲ至Ⅴ与试验Ⅰ、Ⅱ组的猪瘟阻断率有显著差异(P<0.05)。从以上数据分析说明,添加玉屏风散多糖400 mg/kg对提高仔猪猪瘟抗体水平效果最好。
表1 添加不同剂量的玉屏风散多糖对仔猪猪瘟抗体水平的影响
2.2 玉屏风散多糖对仔猪血清免疫力的影响
玉屏风散多糖对仔猪免疫力的影响见表2。IgA、IgG、IgM值均随玉屏风散多糖含量的增加而提高,且以试验Ⅴ组最高,其中试验Ⅲ至Ⅴ组的IgA值与试验Ⅰ组有显著差异(P<0.05),试验Ⅳ组和试验Ⅴ组的IgG值与试验Ⅰ组和试验Ⅱ组有显著差异(P<0.05),试验Ⅴ组的IgM值与试验Ⅰ组有显著差异(P<0.05)。
表2 添加不同剂量的玉屏风散多糖对仔猪血清免疫力的影响
3.1 玉屏风散多糖对仔猪猪瘟抗体水平的影响
玉屏风散的主要成分为黄芪多糖、白术多糖和防风多糖,均具有较强的免疫增强作用[4],可有效提高仔猪机体对猪瘟、蓝耳病等疫病的抗体免疫水平。杨建平[5]研究表明,在仔猪饲料中添加玉屏风散超微粉,猪瘟抗体水平在免疫后7 d开始逐渐上升,在免疫后21 d达到最高,然后缓慢下降,以添加0.5%玉屏风散超微粉组对提高猪瘟抗体水平效果最好。姚敬明等[6]研究发现用黄芪多糖直接稀释猪瘟活疫苗可显著提高猪瘟疫苗抗体水平,同时还可提高体内干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度,降低猪白细胞介素-4(IL-4)浓度,证明了在使用猪瘟疫苗免疫时添加黄芪多糖可增强仔猪免疫力,提高猪瘟免疫效果。本研究中,添加200 mg/kg以上的玉屏风散多糖即可起到显著增强平均阻断率,降低离散度的作用,实际应用中添加量为400 mg/kg效果最好。
3.2 玉屏风散多糖对仔猪血清免疫力水平的影响免疫球蛋白是具有抗体活性的动物蛋白,主要参与体液免疫调节[7]。现代药理学研究表明[8],玉屏风散对机体IgA、IgG、IgM能起免疫促进作用。特别对呼吸道患者的血清IgA水平有明显增加作用。动物试验研究表明,玉屏风散多糖可显著促进小鼠脾淋巴细胞增殖和刀豆蛋白A诱导脾淋巴细胞的转化,并促进小鼠腹腔巨噬细胞的活化吞噬能力和增殖功能,从而增强机体的体液免疫效果[9-10]并可促进免疫抑制模型小鼠在病毒感染时sIgA的分泌[11],也可提高正常小鼠机体的IgA水平[12]。本研究中,免疫球蛋白中IgA、IgG、IgM的浓度均随玉屏风散多糖添加量的增加而提高,其中对IgA的影响最为显著,添加200 mg/kg即可达到显著影响,IgG和IgM达到显著影响的浓度分别为400和600 mg/kg,从以上数据分析,添加600 mg/kg的玉屏风散多糖对提高仔猪免疫力水平效果最好。
饲粮中添加玉屏风散多糖可增强仔猪对猪瘟的免疫效果,添加量以400 mg/kg效果最好。同时可提高仔猪血清的免疫球蛋白含量,增强机体免疫力,添加量以600 mg/kg效果最好。
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(编辑:郭玉翠)
Effect of Yupingfeng San Polysaccharide on Serum Immunity Index and CSFV Antibod of Piglets
HU Xionggui1,2,CAI Wenjie1,2,DENG Yuan1,ZHANG Xing1,3,CHEN Chen1,ZHANG Cuiyong1
(1.Hu'nan Institute of Animal and Veterinary Science,Changsha 410131,China;2.Hu'nan Sanhe Biotechnology Co.,Ltd.,Changsha410125,China;3.Hu'nanXinguang'anAgriculturalHusbandryCo.,Ltd.,Changsha410100,China)
The purpose of this study was to investigate the effects of Yupingfeng san polysaccharide on serum immunity index and CSFV Antibod of piglets.The initial test of similar weight of 60 D×L×Y piglets were randomly divided into 5 treatment groups,each treatment consisted of 4 replications of 3 pigs per replicate.The test period is 21 d.GroupⅠwas the control group with basal diet,Yupingfeng san polysaccharide test groupⅡtoⅤwere supplemented with 100,200,400,600 mg/kg in the diet.The results show that:1)Add above 200 mg/kg Yupingfeng san polysaccharide compared with the control group,the average blocking rate of CSFV Antibod had significant difference(P<0.05),the additive amount was 400 mg/kg groupⅣhave highest CSFV Antibod average blocking and the lowest dispersion.2)With the increase of the amount of Yupingfeng san polysaccharide,the contents of serum immunoglobulin IgA,IgG and IgM were gradually increased.IgA content was significantly increased when the addition of 200 mg/kg(P<0.05),IgG and IgM reached a significant effect of the concentration is 400 and 600 mg/kg(P<0.05).The results show that the addition of Yupingfeng san polysaccharide can enhance the immune effect of piglets of CSFV Antibod,the diets of 400 mg/kg has the best effect.At the same time,it can improve the immune globulin content and enhance the immunity of piglets,and the diets of 600 mg/kg has the best effect.
Yupingfeng san;piglet;CSFV Antibod;immunoglobulin
S816.7
A
1002-1957(2017)02-0121-03
2017-01-19
湖南省科技计划项目(2016NK3001)
胡雄贵(1975-),男,湖南双峰人,副研究员,硕士,主要从事动物遗传育种与繁殖研究工作.E-mail:59601723@qq.com