我院14 287例孕妇的不规则抗体结果分析和临床意义

张京+卢新+刘晓红+宜小如

[摘要] 目的 分析孕妇不规则抗体阳性结果，了解不规则抗体的临床意义。 方法 采用戴安娜微柱凝胶抗人球蛋白检测卡，对2015年10月～2016年9月于北京市海淀区妇幼保健院建卡就诊的14 287例孕妇血清中不规则抗体进行检测，对阳性结果者进一步鉴定其特性。 结果 14 287例孕妇中检出不规则抗体阳性63例，21例为RH阴性孕妇，在产前注射过免疫球蛋白，实际不规则抗体阳性孕妇42例，阳性率为0.294%，14 287例孕妇中9246例为多次妊娠的孕妇。不规则抗体的类型有抗D 2例，抗E 8例，抗C 7例，抗CD 1例，抗Ce 6例，抗cE 6例，抗M 4例，抗S 1例，抗Fyb 4例；抗Lea 3例。 结论 围生期孕妇产前不规则抗体筛检具有临床应用价值，应将其列入产前血清学检查常规项目。

[关键词] 不规则抗体；围生期；免疫球蛋白；临床意义

[中图分类号] R714 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2017）03（b）-0096-03

Result analysis and clinical significance of irregular antibody about 14 287 pregnancies

ZHANG Jing LU Xin LIU Xiaohong YI Xiaoru

Department of Clinical Laboratory， Maternal and Child Health Care Hospital of Haidian District， Beijing 100081， China

[Abstract] Objective To analyze positive results of irregular antibody about pregnancy， and to understand clinical significance of irregular antibody. Methods Diana micro column gel anti globulin test card was used in irregular antibody. Irregular antibodies of 14 287 pregnancies from October 2015 to September 2016 were detected in Maternal and Child Health Care Hospital of Haidian District， Beijing. Positive result characteristic was further identified. Results There were 63 positive irregular antibody cases in 14 287 pregnancies. 21 cases were RH negative pregnancies， who had injected immunoglobulin before delivery. Irregular antibody positive cases were 42 actually. Positive rate was 0.294%， there were 9246 cases of multiple pregnant women in 14 287 cases. The types of irregular antibody were anti D 2， anti E 8， anti C 7， anti CD 1， anti Ce 6， anti cE 6， anti M 4， anti S 1， anti Fyb 4， anti Lea 3. Conclusion Screening prenatal irrgular antibody has clinical application value， it should be included in the routine prenatal serological examination project.

[Key words] Irregular antibody； Perinatal period； Immunoglobulin； Clinical significance

人類血型不规则抗体是指除外ABO血型系统以外的所有抗体[1]，检测不规则抗体有着非常重要的临床意义。如果不做不规则抗体筛查，输注含有某抗体相应抗原的血液，会引起溶血性输血反应。孕妇进行血型不规则抗体筛查，还可以尽早发现不规则抗体，在孕期进行新生儿溶血病的有效预防和治疗，减少不规则抗体对胎儿或新生儿带来的伤害，降低新生儿溶血病的发病率[2]。2016年国家的二孩政策全面放开，第二胎的高龄经产妇明显增加，产后出血率显著高于初产妇。在北京市海淀区妇幼保健院（以下简称“我院”）孕妇不规则抗体筛检是产前必须检查的项目，为临床输血工作提供了极大帮助。

1 资料与方法

1.1 一般资料

2015年10月～2016年9月于我院就诊的孕妇14 287例，年龄18～45岁，9246例为多次妊娠的孕妇，平均孕龄38+2周。

1.2 方法

用真空采血EDTA抗凝管抽取孕妇血液2 mL，分离孕妇血浆。不规则抗体筛查应用戴安娜微柱凝胶抗人球蛋白检测卡，每个标本对应3个孔，做好标记，分别加入50 μL戴安娜Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ号抗筛细胞，每孔再分别加入患者的血浆25 μL。37℃孵育15 min，使用戴安娜专用离心机，转速1500 r/min，离心9 min。若红细胞均沉入管底则为阴性，若浮于管顶或分散在凝胶中则为阳性。初筛阳性结果全部送检北京市红十字血液中心。

2 结果

14 287例孕妇中，9246例为多次妊娠的孕妇，占64.7%。检出不规则抗体阳性63例，21例为RH阴性孕妇经产前注射免疫球蛋白后的检测阳性，实际阳性人数42例，占0.294%，63例不规则抗体阳性孕妇中第一次妊娠的为26例，占41.2%。42例阳性的不规则抗体中Rh系统共30例：其中抗D 2例，抗E 8例，抗C 7例，抗CD 1例，抗Ce 6例，抗cE 6例；MNS系统共5例：抗M 4例，抗S 1例；Duffy系统4例：抗Fyb 4例；Lewis系统3例：抗Lea 3例。

3 讨论

在产科抢救中，输血治疗是现今不可替代的重要治疗手段，而血库的首要任务就是保证输血的安全，为临床提供安全有效的血液制品[3]。

近年来，输血技术飞速发展，由于输注ABO同型的成分血是常规的输血治疗方法，所以由ABO血型不合引起的溶血反应已比较少见。引起溶血性输血反应的主要原因是不规则抗体，在刘达庄等[4]临床调查中，免疫性输血反应中检测的抗体，红细胞的不规则抗体占抗体种类约20%。对进行血型不规则抗体筛查，可以利用充分的时间选择合适的血液，选择不含有针对某抗体的相应抗原的血液，这样可以防止因为输注含有某抗体相应抗原的血液后，引起的溶血性输血反应，从而保证输血的安全。例如患者体内检出抗E，就应该选择RhE抗原阴性的血液进行输注。

不规则抗体产生的原因很多，绝大多数是通过输血或妊娠免疫产生的[5]，这类抗体多为IgG类抗体，可通过胎盘进入胎儿体内引起胎儿或新生儿溶血病。我院在孕妇进行常规产科检查时就进行血型不规则抗体筛查，可以尽早发现不规则抗体，在孕期进行新生儿溶血病的有效预防和治疗，减少不规则抗体对胎儿或新生儿带来的伤害，降低新生儿溶血病的发病率。

不规则抗体在一般人群中检出率为0.3%～2.0%[6]。它的阳性率高低与多种因素有关，我院是专科医院，病种单一，基本只做孕妇的不规则抗体筛查，大多是健康人，也是导致不规则抗体阳性率低的原因。虽然不规则抗体检出率低，但是阳性患者如果输入具有相应抗原的红细胞，当抗原抗体发生免疫结合，就可引起溶血性输血反应，反应严重时能够危及生命。所以，检测有重要的临床意义。

2016年1月1日正式实施了计划生育二孩新政策，也就是，2016年元旦以后出生的二孩，都是合法的。在我院2015年10月～2016年9月中14 287例孕妇中就有9246例是多次妊娠的。多次妊娠同种免疫产生不规则抗体的频率要明显高于首次妊娠[7]，这也造成临床不规则抗体的种类日趋复杂和多样化，对实验室的检测技术要求更高。最早检测不规则抗体筛查使用的手工抗人球的方法，操作复杂，检出率低。前几年改进了试验方法使用国产的抗筛细胞和凝胶卡，灵敏度大大提高，但阳性率偏低。2015年开始使用了Diana公司的抗筛细胞和抗筛卡，大大地提高了检出率。目前，凝胶凝集卡的方法因为用量少，操作方便，已经广泛应用于临床不规则抗体筛查的检验中[8]。

在2015年10月～2016年9月检测出的不规则抗体的结果，63例不规则抗体有30例为RH系统抗体，占71.4%。RH系统抗体是引起免疫性溶血性输血反应最常见的不规则抗体[9-10]。在我国人群中D抗原阴性占0.2%～0.5%，因为抗D抗体引起的溶血反应在临床上非常凶险而难以控制，所以现在已经普遍推广和熟练应用RhD血型配合性输血，也使抗D抗体产生明显减少。孕妇的RhD同种免疫反应往往发生于第二胎及以后。RhD抗原阴性和RhD抗原阳性的丈夫在生育第一胎时，RhD抗原阳性的胎儿红细胞经胎盘进入RhD抗原阴性母亲的血液，母体得到初次免疫刺激，当她再次妊娠时，曾经进入母体的胎儿红细胞上存在的RhD抗原会刺激母体免疫系统的回忆反应，产生抗D抗体。这些抗体有可能会通过胎盘进入到胎儿的血液循环，与胎儿红细胞发生抗原抗体反应，导致胎儿红细胞凝集和受到破坏，发生胎儿或新生儿的免疫性溶血。RhD抗原阴性出现这类Rh同种免疫，在妊娠的早期可能会出现流产，妊娠中晚期可能出现早产，分娩时有可能因为胎盘过大而引起产后出血。少数病例新生儿出生后出现智力发育不全等后遗症，甚至死亡[11]。由于Rh系统多种抗原中，D抗原的抗原性最强，并且常在孕22周后使胎儿的器官受累，所以引起死胎和新生儿溶血病也最多[12]。注射抗D免疫球蛋白是一种有效的方法，可以避免发生同种免疫，产生抗D抗体，使Rh同种免疫的发生率下降为0.1%。本文中一年有21例RH陰性经过了抗免疫球蛋白的注射，说明RH阴性血型的群体，已经有较强风险意识，提前进行免疫的注射，势必会减少抗D抗体的产生，降低新生儿溶血的发生率。现在国内，仍然没有在正规医疗机构开展抗免疫球蛋白的注射[13]。RhE是RH系统中除RhD抗原外抗原性最强的抗原（D>E>c>C>e），RhE抗原阴性者约占50%，但RhE还不是医院检验科常规检测的项目，所以如果夫妻双方E抗原不和，女方可能会产生抗E抗体，同时有些RhE阴性患者因为输血，接受了RhE抗原阳性血液的刺激后产生抗E抗体病，以上的情况越来越多。据报道，我国汉族人Rh抗原中存在RhE抗原阳性（47.88%）比RhD抗原阳性（99.66%）低的分布特点。所以相对RhE抗原不合的免疫在临床出现的概率比RhD抗原高，也就是产生抗E比抗D的概率大[14]，因此Rh血型中RhE抗原阳性的患者输血应引起重视[15]。另外，向东等[16]报道，抗D引起的新生儿溶血病平均发现时间是9.1 d，抗E引起的平均发现时间是16.6 d，由此可以反映出产前诊断存在的问题，如果能够早期地从实验数据中预测和早期治疗，新生儿溶血的诊断和治疗应该有更好的效果。还有报道称，现有的产前检测，还没有对Rh系统中除外RhD抗原的其他抗原进行具体的检测，这就很容易造成同种免疫，给临床输血的工作带来一定的危险。因此，非常有必要进行RH系统中常见抗原的检测，这样可以减少因反复输血引起的同种免疫反应[17]。本次检测还发现患者体内同时存在两种不规则抗体，抗c在西方国家是临床上仅次于抗D的Rh抗体[18]，而我国以抗Ec联合抗体较为多见，这可能与亚洲人血型系统的抗原分布情况有关[19]，这种联合不规则抗体的情况共13例，占30.95%，这类患者如果不进行抗体鉴定而直接交叉配血，难度将会比较大，需要在献血员标本中盲筛，势必耗费临床宝贵的救治时间，例如对于抗Ce的患者遇到匹配的ccDEE表型红细胞的概率为1.2%，如果用盲配的办法进行交叉配血，要耗费大量的患者血清和献血员血液。

在全年的数据分析中，检出抗M抗体共4例，占9.5%。MNSs系统的抗体是以抗M最为常见的，其次是抗N抗体，在目前的研究数据显示，这两类抗体大多为自然发生，一般在体内不能引起溶血性反应，只有在37℃或抗球蛋白试验出现阳性时才具有临床意义。如果患者在手术过程中，出现低温麻醉状态，这一类抗体可能激活补体，发生溶血反应，应该引起医生和输血人员的注意。在MNS系统中抗S抗体是同种免疫产生的抗体，能够引起溶血性输血反应和新生儿溶血等严重后果。以前没有抗人球蛋白、微柱凝胶卡的应用，检出率低，现在抗人球蛋白、微柱凝胶卡的应用广泛，大大提高了MNSs系统抗体的检出率，这些抗体的临床意义也越来越受到重视。近期有一篇报道不规则抗体检出率占据第一位的就是抗M抗体[20]。Duffy血型系统的抗Fyb抗体是少见抗体，大多因妊娠和输血免疫而产生。抗Fyb抗体通常是IgG抗体，在抗球蛋白试验中反应良好。一般蛋白酶均会破坏Fy抗原性，故用酶法检测抗Fyb抗体无反应。有报道称，抗Fyb抗体可以造成致命性的溶血性输血反应和迟发性输血反应[21]。在检验报告里，抗Le抗体越来越多，以往都认为抗Le抗体是自然发生的，以IgM抗体为主，多数在37℃没有活性，很少能够引起新生儿溶血病和溶血性输血反应。抗Lea和抗Leb抗体都非常少见，但近年国外和国内都有抗Leb抗体引起溶血性输血反应和新生儿溶血病的报道[22]。

总之，由于血型抗原的多元化，不规则抗体产生的复杂性，以及同种免疫的溶血性输血反应严重危害性，我们对孕妇，特别是有多次妊娠史的孕妇，进行不规则抗体检测能够有效预防输血不良反应的发生，围产期孕妇产前不规则抗体筛检具有重要的临床应用价值。

[参考文献]

[1] 田兆嵩.临床输血进展[M].成都：四川出版集团，2010：309.

[2] 顾红.输血前不规则抗体筛查对输血安全的影响[J].河北医学，2012，18（8）：1178-1180.

[3] 李春华，任艳丽，陈金美，等.加强临床输血管理确保输血安全[J].中华医院管理杂志，2007，23（5）：358-359.

[4] 刘达庄，朱俊，朱自严，等.免疫性输血反应的调查及预防研究[J].中国输血杂志，2002，15（3）：159-161.

[5] 肖倩，辛荣传，周益强，等.妊娠和输血两种免疫因素产生不规则抗体的检测分析[J].重庆医学，2009，38（21）：2714.

[6] 王桂英.输血前开展抗体筛选试验的重要性[J].北京医学，2009，31（12）：754.

[7] 董永，李延年，孙波，等.微柱凝集法筛检不规则抗体的临床应用[J].中国输血杂志，2003，16（5）：326-327.

[8] 周建月，杨海燕.RH阴性孕妇血型不规则抗体检测的临床意义[J].广西医学，2010，32（10）：1221-1222.

[9] 张仲新，魏中南.10 769例孕妇不规则抗体筛查分析[J].临床血液学杂志，2011，24（8）：418-419.

[10] 杨晓明，李明强，蒋晓玲.8207例孕产妇不规则抗体筛查结果分析及临床意义[J].中国当代医药，2015，22（33）：121-124.

[11] 张晨光，贺志安，赵庆伟，等.RH血型系统不规则抗体与新生儿溶血病的相关性[J].现代预防医学，2007，34（11）：2036-2038.

[12] 杨玲竹，史惠蓉，邵宝亭，等.新生儿溶血病21例分析[J].实用妇产科杂志，2001，17（4）：231-232.

[13] 李彤彤，劉晗，董峥.抗-D免疫球蛋白与RH新生儿溶血病2例[J].临床输血与检验，2012，14（4）：355-356.

[14] 孙光伟，王厚照.RH血型系列抗原检测在输血中的应用[J].检验医学与临床，2010，7（19）：2123-2124.

[15] 吴远军，周皓云，刘兴玲，等.孕妇血型不规则抗体检测的临床意义[J].中国实验诊断学，2005，9（4）：518-520.

[16] 向东，刘曦，王健莲，等.患者血型不规则抗体的分析[J].中国输血杂志，2005，18（1）：22-23.

[17] 孙光伟，王厚照.RH血型系列抗原检测在输血中的应用[J].检验医学与临床，2010，7（19）：2123-2124.

[18] 李勇，杨贵贞.人类红细胞血型学[M].北京：中国科学技术出版社，2004：91.

[19] 吕鹏.最新输血技术学[M].北京：人民卫生出版社，2007： 63.

[20] 吴远军，刘彦慧，刘兴玲，等.汉族患者（30 800例）及孕妇（4200例）红细胞血型不规则抗体分布的调查[J].第四军医大学学报，2007，28（10）：922-924.

[21] 刘婧婧，白连钧，甘佳.罕见的Duffy血型系统抗-Fyb抗体1例报告[J].北京医学，2011，33（10）：864-865.

[22] 陶翠华，涂茹.检出IgG性质抗-Lea不规则抗体1例[J].临床输血与检验，2012，14（3）：273-274.