子宫灌注中药消囊散治疗奶牛卵泡囊肿的效果及相关影像学研究

程波，李云章

（内蒙古农业大学兽医学院，呼和浩特 010018）

子宫灌注中药消囊散治疗奶牛卵泡囊肿的效果及相关影像学研究

程波，李云章

（内蒙古农业大学兽医学院，呼和浩特 010018）

本试验研究子宫灌注中药消囊散对奶牛卵泡囊肿的治疗效果及对子宫形态变化的影响。结果显示，35头囊肿奶牛子宫灌注消囊散后，有效头数为30头，无效头数为5头，有效率为85.7%，无效率为14.2%。囊肿卵泡直径从用药开始就持续降低，用药结束后第6天的卵泡直径与用药前相比，差异显著（P＜0.05）。子宫角在停药后第10～16天与灌药前比较，差异显著（P＜0.05），第18、20天与灌药前比较，差异极显著（P＜0.01）。结果表明，通过子宫灌注中药消囊散，可使卵巢子宫形态恢复正常，对治疗奶牛卵泡囊肿有明显疗效。

奶牛；卵泡囊肿；消囊散；影像学

卵泡囊肿发现于1831年，至今科研工作者已经从内分泌、组织形态、细胞与基因水平等方面对其进行了大量研究。卵泡囊肿是指卵巢里的卵泡直径大于25mm，并且持续时间超过10d，结构上与卵泡相似，同时卵巢上无正常黄体结构的一种病理状态[1]，临床上，多发生于4～6胎产奶高峰期的奶牛。目前，卵泡囊肿已成为制约奶牛业发展的一个重要影响因素。奶牛卵泡囊肿发病率占卵巢囊肿发病的75%左右，同时，导致胎间距延长13～33d，平均配次增加0.8次[2～4]。据祁生旺等对内蒙古地区2 980头泌乳牛进行的不孕症调查表明，卵泡囊肿发病率为17.2%[5]。据肖银霞等[6]报道，卵巢囊肿的治疗方法有激素及手术疗法、中药及中西医结合疗法等。临床上该病多用激素治疗。激素治疗具有周期短、用量小、见效快等优势，但由于计量操作等临床实际问题，易导致激素残留，危害人类健康。同时激素治疗也会导致奶牛内分泌紊乱。而中药治疗有残留小、副作用小等特点，现代研究也证明，中药对卵巢性不孕有较好的治疗效果。中兽医学认为卵巢疾病性不孕多为气滞血瘀或肾气虚、肾阳虚症。而卵巢囊肿多为冲任不调之气血瘀滞所致[7]，所以常选用具有活血化瘀、补肾壮阳、促进母牛发情和调节卵巢功能作用的中药进行治疗。麻延峰等[8]用仙灵脾、阳起石、当归、赤芍、白芍、川芎、三菱、莪术、香附、青皮等10味中药组成的“复方藿阳促孕汤”为基础方进行加减治疗卵巢囊肿，患牛发情排卵有效率为75.0%，配种受胎率为42.9%。梁光华、邓敏等[9]用口服理囊散治疗奶牛卵泡囊肿，结果显示，对患牛的E2、FSH、LH、P4激素分泌具有显著调节作用和诱导发情的作用。高树等[10]用女贞子、熟地黄、附子等17味中药复方治疗卵巢囊肿，并且B超影像学检测结果显示，对卵泡囊肿奶牛的卵巢和子宫形态变化具有一定作用，治疗效果明显，其中有效率为87.5%。以上均是通过口服中药进行治疗。由于口服中药需通过肠胃，吸收有限，并且有人员操作不方便、计量大的问题。因此，笔者选取具有活血化瘀、补肾壮阳的15味中药，运用子宫灌注的方法进行治疗。此方法具有的优势是直达病灶，用量小，方便操作，有效成分高，并且运用B超影像学进行确诊和动态监控，可为今后中药子宫灌注治疗卵泡囊肿疾病提供参考。

1 材料与方法

1.1 仪器

Tringa Linear VET型兽用便携式B超扫描仪，配备6.0/8.0MHz线阵双频探头，Ni-MHz12V充电电池，产地荷兰，由北京东方联鸣科技发展有限公司经销。鼎历YJ20/3+1型煎药机，购于温州顶历医疗器械有限公司。法兰特TRQ型超声波清洗机，购于杭州法兰特超声波科技有限公司。

1.2 试验药物及药物制作

消囊散子宫灌注液：由黄芪、党参、赤芍等10味复方中药组成。中药材料均购于呼和浩特市国药控股有限公司国大药房金宇文苑店。

药材首先在35～38℃、75%乙醇中回流萃取2h得到醇提液，再将过滤得到的药渣在108℃水煎1h得到水提液，然后把醇提液和水提液混合，浓缩到每毫升溶液含生药5～8g，旋转离心去上清液，高压灭菌得到成品药液。

1.3 试验动物

试验奶牛来自内蒙古呼和浩特市和林县内蒙古内大圣牧高科牧业有限公司的第六牧场、第七牧场。品种为荷斯坦牛，共35头。饲养方式为散栏饲养。试验牛场无结核、布氏杆菌病等传染病，采用全混合日粮饲养。

1.4 子宫灌注方法

每日上午8～9点，运用输精抢把子宫灌注液注入子宫角给药。每天灌注一次，连用5d，每次30mL。

1.5 卵泡囊肿的诊断方法

1.5.1 外部表现观察

病牛大多数表现为肥胖，膘情好，表皮毛有光泽。站立时，有明显尾根抬高的表现，卧地时阴门略涨偶有排气。常从阴道流出透明样分泌物，但相比正常发情牛量少，黏稠性低，常常表现为无规律的持续性发情[11]。1.5.2 直肠检查

患病牛卵巢一侧有突出的类似“乒乓球”样的卵泡，直径大于25mm，并且持续超过10d不排卵。卵泡表现为，表面光滑壁薄易破，指压有液体波动感，触之有微弹性，卵巢质地变硬，子宫相对松驰肥厚且下垂[12,13]。

1.5.3 B超影像学探查

卵巢上呈现圆形或椭圆形的无回声液性暗区，边界整齐。暗区卵泡直径明显大于成熟卵泡，存在一个或数个直径大于25mm的病理性卵泡，卵泡壁厚度不超过3mm[14～16]（图1）。

图1 卵泡囊肿的B超图像A图，T55140号牛，直径为30.8mm的囊肿卵泡B超图像；B图：81444号牛，直径为32.5mm的囊肿卵泡B超图像；C图：12183号牛，直径为31.8mm的囊肿卵泡B超图像；D图：74532号牛，直径为29.7mm的囊肿卵泡B超图像。

1.6 B超影像学检查

1.6.1 检测方法

在灌注前3d、灌注第3次及灌注结束后每隔2d运用B超对卵巢和子宫各项指标进行测量。当卵泡、卵巢、子宫角、子宫颈的图像清晰地显示后，冻结画面进行图像分析。

1.6.2 形态学检测指标

囊肿卵泡：以切面图像显示卵泡最大直径时测量开始。子宫颈纵径：B超探头放到子宫颈中间位置图像显示纵向直径时测量开始。子宫角纵径：在子宫角的中心位置时探头开始测量纵向直径。卵巢长度：以卵巢的最长切面来测量卵巢长度直径最大值。卵巢宽度：以卵巢的最长横切面来测量卵巢宽度最大直径[10]。

1.7 疗效判定

子宫灌注停药后，直肠检查囊肿奶牛的卵巢，B超检查卵泡是否恢复到正常直径。若病牛出现发情并排卵，通过人工输精受孕，则判定为有效。若病牛出现发情持续期和排卵期都延长，则判定为无效。

1.8 统计分析

应用SPSS 22.0软件对数据进行单因素方差分析，试验数据用均数±标准差表示。

2 试验结果

2.1 消囊散灌注治疗卵泡囊肿奶牛的有效率

表1 子宫灌注消囊散治疗卵泡囊肿的有效率

子宫灌注消囊散治疗卵泡囊肿的有效率见表1。由表1可知，通过子宫灌注的治疗方法，有效数为30头，有效率为85.7%，无效数为5头，无效率为14.3%。

2.2 消囊散治疗卵泡囊肿奶牛其卵巢和子宫形态学变化情况

通过表2可知，囊肿卵泡直径第2天、第4天与灌药前相比，差异不显著（P＞0.05）；第6～20天与灌注药前相比，差异显著（P＜0.05）；卵巢长度只有第14天与灌药前相比差异显著（P＜0.05）；卵巢宽度与灌药前相比差异不显著（P＞0.05）。

由图2可知，囊肿卵泡直径从用药开始就持续降低，在用药结束后第6天卵泡直径恢复到正常水平，并且开始大幅降低，从第14天后降低缓慢。卵巢长度没有明显下降，趋势趋于平衡。卵巢宽度在用药结束后第4天开始平稳降低，下降到第18天后有回升。

通过表3可知，子宫颈纵径与灌药前相比差异不显著（P＞0.05）。子宫角纵径第10、12及16天与灌药前相比，差异显著（P＜0.05），第14、19及20天与灌药前相比差异极显著（P＜0.01）。

由图3可知，子宫颈纵径在停药后第6天开始降低，到第12天开始升高，之后变化幅度不大。子宫角纵径在第2天开始降低，到第16天上升，第18天子宫角最小，之后回升。

图2 子宫灌注消囊散前后卵巢测量指标变化曲线

图3 子宫灌注消囊散前后子宫测量指标变化曲线

表2 子宫灌注消囊散前后卵巢测量结果 单位：mm

表3 子宫灌注消囊散前后子宫测量结果 单位：mm

注：同行数据肩标“*”表示灌药前后差异显著（P＜0.05），同行数据肩标“**”表示灌药前后差异极显著（P＜0.01）。

2.3 子宫灌注消囊散后B超图像

图4 T55140号奶牛子宫灌注消囊散后B超图像A1～A10：停药后第2、4、6、8、10、12、14、16、18、20天的卵泡B超图像。

图5 81444号奶牛子宫灌注消囊散后B超图像B1～B10：停药后第2、4、6、8、10、12、14、16、18、20天的卵泡B超图像。

图4A1～A10为T55140号奶牛停药后B超图像，由图像可知，囊肿卵泡于停药后第2天直径开始降低，A7图显示停药后第14天形成有腔黄体，该牛于2016 年7月14日发情配种，28d后孕检显示受孕，日产奶量为30.66kg，产1胎，配种次数为3次。图5B1～B10为81444号奶牛停药后的B超图像，该牛产胎两次，体况评分3.5分，配种次数为3次。2016年6月22日开始子宫灌注消囊散，2016年6月30号卵泡直径开始恢复正常，停药后的第14天开始形成有腔黄体，于7月11日发情配种。

3 讨论

3.1 卵泡囊肿奶牛的B超影像学诊断

囊肿卵泡是存在于卵巢上超过10d含有一个或多个并且不排卵的病理性卵泡，该病患牛常常表现为频繁发情、发情时间长或者长期不发情。在奶牛临床上，一般采用直肠检查诊断是否患病。患卵泡囊肿奶牛直肠检查表现为子宫颈游离性大，子宫紧张，卵泡壁坚硬且光滑，弹性弱。但由于直肠检查受人为因素影响大，存在误诊率高的问题，很难区分病理性卵泡和正常卵泡，因此利用B超进行检查可提高确诊率。对同侧患有卵泡囊肿的卵泡进行连续多次的B超探查，囊肿卵泡呈圆形或椭圆形的无回声液性暗区，囊壁整齐且光滑，反射强。当卵泡直径大于正常卵泡，一般超过25mm，卵泡壁厚度不超过3mm，就可以判定为卵泡囊肿。

3.2 子宫灌注中药消囊散对子宫及卵巢形态学的影响

子宫灌注中药后，运用B超对卵巢和子宫进行动态监控，发现用药后第3天卵泡直径就开始下降，B超图像为圆形规则的无回声液性暗区，且暗区逐渐缩小。在用药后第6天，囊肿卵泡直径就恢复到正常水平。试验中的T55140号奶牛在停药后第14天形成有腔黄体，该牛于2016年7月14日发情配种，配后第7、10天用B超进行动态检测，黄体直径为33.9mm和34.6mm，28d后孕检显示怀孕。此过程结果与赵兴绪报道的相符。表明消囊散可以有效治疗卵泡囊肿疾病。消囊散对于子宫颈作用效果不是很明显，用药前后无明显变化。作用于子宫角效果显著，用药后一直到用药停止后20d，子宫角纵径一直在降低，停药后第18天达到最低点，为16.51±1.96mm。说明消囊散作用于卵巢具有促进卵泡发育和排卵，促进血液循环，改善子宫环境的作用。

3.3 中药消囊散的中兽医辩证理论

中兽医认为卵巢疾病性不孕，大多数属于气滞血瘀或肾气虚，肾阳虚症，卵巢囊肿则多为气血瘀滞所致。同时，卵泡囊肿多发生于产后，奶牛产犊时消耗元气，肾气虚衰，导致气血瘀滞，中药治疗时常选用具有活血化瘀、补肾壮阳的中药。消囊散中的川芎、桃仁、赤芍、三棱、莪术均为活血祛瘀药，具有活血化瘀、活血行气、清热凉血及散淤止痛等功效。茯苓、薏苡仁具有渗湿利水、排脓等功能。青皮、香附具有舒胆肝破滞气、散结消痰、消积化滞等功效。党参、黄芪、当归均为补气升阳、意卫固表、补中益气药[7,17]。故中药消囊散具有活血化瘀、调理气血之疗效，对卵泡囊肿有明显的治疗效果。

4 结论

本试验运用直肠检查和B超影像学检查，诊断出卵泡囊肿奶牛，通过子宫灌注中药消囊散来治疗卵泡囊肿奶牛，并对用药前后卵巢及子宫实施动态监测。结果表明，子宫灌注中药消囊散后囊肿卵泡直径降低，恢复到正常水平，有发情表现并且受孕。说明通过子宫灌注中药这种方式来治疗奶牛卵泡囊肿有效。

[1] 田允波.奶牛卵巢囊肿研究最新进展[J].内蒙古畜牧科学, 1992,2:17-23.

[2] Wiltbank M C,Gumen A, Sartori R. Physiological classifica-tion of anovulatory conditions in cattle[J].Theriogenology,2002,57(1):21－52.

[3] Garverick H A. Ovarian follicular cysts in dairy cows[J]. Dairy Sci, 1997, 80:995-1004.

[4] Gumen A,Wiltbank MC. An alteration in the hypothalamic action of estradiol due to lack of progesterone exposure can cause follicular cysts in cattle[J]. Biol Reprod, 2002, 66:1689-1695.

[5] 祁生旺,刘俊平,田志,等.内蒙古部分地区奶牛不孕症的调查[J].内蒙古畜牧科学,1992,1:40-42.

[6] 肖银霞,许晓玲,白佳桦,等.奶牛卵巢囊肿发病机制及治疗的研究进展[J].黑龙江畜牧兽医,2015,05:73-76.

[7] 罗瑞卿,谷新利.中药治疗奶牛不孕症[J].中国奶牛, 2008,10:67-69.

[8] 麻延峰,王宏艳,周文仙,等.中药治疗奶牛卵泡囊肿效果研究[J].浙江农业科学,2009,6:1204-1206.

[9] 梁华光,邓敏,等.理囊散对卵泡囊肿和排卵延迟奶牛血清生殖激素的影响[J].江苏农业科学,2013,41(1):202-205.

[10] 高树,杨恒,胡路锋,等.口服理囊散治疗卵泡囊肿奶牛B超影像学研究[J].西北农业学报,2013,22(1):28-33.

[11] 李助南.不同方法治疗奶牛卵泡囊肿的效果比较[J].养殖与饲料,2008,4:5-7.

[12] Alexandra Rauch,Lars Kruger, Akio Miyamoto, et al. Color Doppler Sonography of Cystic Ovarian Follicles in Cows[J].Journal of Reproduction and Development, 2008,54(6):447-453.

[13] Nakak T,Sigihashi A,Sage N, et al. Use of milk progesterone enzyme immunoassay for differential diagnosis of follicular cyst,luteal cyst, and cystic corpus luteum in cows[J].Vet Res, 1983,44:888-89.

[14] 高树,刘贤侠,王少华,等.奶牛疾病性不孕的B型超声影像学研究[J].黑龙江畜牧兽医,2011, 11:35-38.

[15] 马会明,陈静波.母牛卵巢囊肿的B超诊断与治疗[J].黄牛杂志, 2005,31(5):26-28.

[16] 王少华,王亮亮,谢富强.运用兽用B超仪检查奶牛卵泡、黄体和诊断卵巢疾病的体会[J].中国奶牛,2007,9:27-29.

[17] 王东升,严作庭,等.治疗奶牛卵巢疾病性不孕症中药制剂研究进展[J].中国奶牛,2011,22:35-37.

Imaging Studies of Traditional Chinese Medicine Follicular Cusy
conditioning Powder Perfusion of Uterus in Treating Cows Follicular Cyst

CHENG Bo, LI Yun-zhang ( College of Veterinary Medicine, Inner Mongolia Agricultural University, Hohhot 010018)

The purposes of this paper are to investigate the effects of traditional Chinese medicine follicular cusyconditioning powder perfusion of uterus on treating follicular cyst of cow ovaries and morphological changes in uterus, and to preliminarily investigate the mechanism of drug action of traditional Chinese medicine follicular cusyconditioning powder in treating follicular cyst of cows. Scientific diagnosis was made through observation, rectal examination and imaging. Follicular cusy-conditioning powder perfusion was performed on diagnosed cow uterus. B-mode was utilized to measure follicles, ovary and uterus every two days, and were compared to pre-perfusion. As the result showed totally, 35 cows with follicular cyst were undergone follicular cusy-conditioning powder perfusion of the uterus, and 30 of them were valid, with a valid rate of 85.7%. The invalid number was 5, and invalid rate 14.3%. Diameters of follicular cyst kept decreasing since the beginning of administration, and the differences of follicular diameters between at 6d and pre-administration were significant after treatment (P＜0.05). Differences of ovary and cervix before and after treatment were not significant (P＞0.05), but the actual diameters were all lower than pre-perfusion. Differences of uterine horn were significant from 10d to 16d after withdrawal(P＜0.05), and the differences were extremely significant by comparing 18d and 20d to pre-perfusion(P＜0.01). As the results illustrated, the administration route of traditional Chinese medicine follicular cusy-conditioning powder perfusion of the uterus has a certain effect on the ovary and uterus morphological changes, and has obvious efficacy in treating cows with follicular cyst.

Dairy cattle; Follicular cyst; Follicular cyst-conditioning powder; Iconography

S858.23

A

1004-4264（2017）04-0029-05

10.19305/j.cnki.11-3009/s.2017.04.008

2016-09-29

内蒙古科技计划项目；奶牛不孕症的病因调查及中西医综合治疗集成（20130224）。

程波（1992-），男，蒙古族，硕士研究生，研究方向为奶牛不孕症研究。

李云章（1956-），男，蒙古族，教授，博士生导师，研究方向为赛马肢蹄病与奶牛不孕症疾病。