高效液相色谱法测定蒲地蓝消炎片中 R，S－告依春含量

姜雪敏，杨立志

（黑龙江省鸡西市食品药品检验检测中心，黑龙江 鸡西 158100）

·检验检测·

高效液相色谱法测定蒲地蓝消炎片中 R，S－告依春含量

姜雪敏，杨立志

（黑龙江省鸡西市食品药品检验检测中心，黑龙江 鸡西 158100）

目的建立测定蒲地蓝消炎片中 R，S－告依春含量的高效液相色谱（HPLC）法。方法 色谱柱采用Agilent Extend－C18柱(250 mm× 4.6 mm，5 μm)，流动相为甲醇－0.04%磷酸溶液（8∶92），检测波长为245 nm，流速为1.0 mL／min。结果R，S－告依春进样量在0.010 9～0.218 9 g范围内与峰面积积分值线性关系良好(r＝0.999 9)；R，S－告依春的平均回收率为98.01%，RSD为0.56% (n＝6)。结论 该法操作简便，重复性好，结果准确，可作为蒲地蓝消炎片的质量控制方法。

R，S－告依春；蒲地蓝消炎片；高效液相色谱法；含量测定

蒲地蓝消炎片是由黄芩、蒲公英、苦地丁、板蓝根制成的中成药，具有清热解毒、抗炎消肿的功效，用于治疗疖肿、腮腺炎、淋巴腺炎、扁桃体炎等症。其质量标准[1]收载于卫生部药品标准，标准中无含量测定项，不能有效控制产品的质量和疗效。板蓝根为方中主药，R，S－告依春是其主要成分。为完善质量控制标准，参考文献[2－16]，采用高效液相色谱（HPLC）法测定蒲地蓝消炎片中 R，S－告依春的含量。现报道如下。

1 仪器与试药

1.1 仪器

2010A型高效液相色谱仪（岛津紫外检测器，LC solution色谱工作站，日本岛津公司）；AG285型电子分析天平(瑞士梅特勒托利多公司)；KQ－400KDE型超声波清洗器(江苏省昆山市超声仪器有限公司)。

1.2 试药

R，S－告依春对照品（中国药品生物制品检定所，批号为111753－201103）；蒲地蓝消炎片（伊春五加参药业有限责任公司，批号为20141101，吉林道君药业股份有限公司，批号为130902，140802）；水为屈臣氏蒸馏水，甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：Agilent Extend－C18柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流动相：甲醇－0.04%磷酸溶液（8∶92）；流速：1.0 mL／min；检测波长：245 nm；柱温30℃；进样量：10 μL。理论板数按 R，S－告依春峰计算不低于5 000，分离度大于1.5。

2.2 溶液制备

对照品溶液：称取 R，S－告依春对照品（含量为99.5%）11.00 mg，精密称定，加甲醇制成 1 mL含10.94 μg／mL对照品的溶液，即得。

供试品溶液：称取本品粉末2.055 2 g（规格为每片0.302 8 mg），精密称定，置圆底烧瓶中，加50%甲醇50 mL，称定质量，加热回流2 h，取出，放冷，再称定质量，用50%甲醇补足减失的质量，用0.45 μm微孔滤膜滤过，即得。

阴性对照品溶液：按处方比例以相同工艺制成不含板蓝根的阴性对照样品，按供试品溶液的制备方法制备阴性对照品溶液。

2.3 方法学考察

阴性干扰试验：取2.2项下3种溶液，按拟订色谱条件进样测定。结果阴性对照品溶液色谱中，在 R，S－告依春色谱峰相应位置无干扰峰出现，表明阴性样品的其他组分对 R，S－告依春的测定无干扰（图1）。

图1 高效液相色谱图

线性关系考察：分别精密吸取 R，S－告依春对照品溶液2，5，10，15，20，25 μL，注入液相色谱仪，记录峰面积，以对照品进样量为横坐标（X，μg）、峰面积积分值为纵坐标（Y），进行线性回归，得回归方程 Y＝1.000 0× 107X－1.487 3×104，r＝0.999 9（n＝6），结果表明，R，S－告依春进样量在0.010 9～0.218 9 μg范围内与峰面积积分值线性关系良好。

精密度试验：精密吸取同一对照品溶液10 μL，连续进样6次，计算峰面积。结果 R，S－告依春的平均峰面积值为1 087 324，RSD为0.72%（n＝6），表明仪器精密度良好。

稳定性试验：精密吸取同一供试品溶液（批号为20141101），分别于0，2，4，8，12，24 h时进样10 μL，记录峰面积。结果6次进样 R，S－告依春峰面积的平均值为745 301，RSD为0.96%（n＝6），表明供试品溶液在24 h内稳定性良好。

重复性试验：取同一批（批号为20141101）样品，依法制备6份供试品溶液并进样测定。结果 R，S－告依春平均含量为每片0.055 mg，RSD为0.96%（n＝6），表明方法重复性较好。

加样回收试验：称取已知含量的同一批（批号为20141101，含量为每片 0.055 mg）样品 6份，每份约1.0 g，精密称定，置圆底烧瓶中，分别精密加入 R，S－告依春对照品溶液(109 μg／mL)2 mL，再精密加入50%甲醇48 mL，依法制备供试品溶液，并按拟订色谱条件进样测定，计算回收率。结果见表1。

表1 R，S－告依春加样回收试验结果（n＝6）

2.4 样品含量测定

取蒲地蓝消炎片3批，依法制备供试品溶液，按拟订色谱条件测定本品中 R，S－告依春含量。结果批号为20141101，130902，140802的样品中 R，S－告依春的含量分别为每片0.055，0.051，0.062 mg。

3 讨论

3.1 流动相选择

分别以乙腈－水、甲醇－0.5%甲酸溶液、甲醇－0.04%磷酸溶液为流动相进行试验，结果以甲醇 －0.04%磷酸溶液为流动相时分离效果较好，基线平稳，出峰时间缩短。故选择甲醇－0.04%磷酸溶液作为流动相。

3.2 提取条件选择

分别考察了以水、甲醇、50%甲醇作为溶剂，结果50%甲醇提取效果好，故以50%甲醇为溶剂；分别超声提取20，40 min及加热回流2 h，结果加热回流2 h提取较完全，故采用加热回流2 h。

3.3 检测波长选择

对 R，S－告依春于200～400 nm波长范围内进行紫外扫描，结果245 nm波长处有最大吸收，故选择该波长作为检测波长。

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Content Determinating of R,S－Epigoitrin in Pudilanxiaoyan Tablets by HPLC

Jiang Xuemin,Yang Lizhi
(Jixi Inspection and Testing Center for Food and Drug,Jixi,Heilongjiang,China 158100)

Objective To develop an HPLC method for the content determination ofR,S－epigoitrin in Pudilanxiaoyan Tablets by HPLC.M ethods The separation was performed on a Agilent Extend－C18column(250 mm×4.6 mm，5 μm)using Methanol－0.04% Phosphoric acid solution(8∶92),The detection wave length was 245 nm and the flow rate was 1.0 mL／min.Results There was good linearity between the peak area and injection volume in the ranges of 0.010 9－0.218 9 μg(r＝0.999 9).The average recovery of R,S－epigoitrin was 98.01%,RSD＝0.56%(n＝6).Conclusion The method is simple,reproducidility and accurate,which can be used for the content determination of Pudilanxiaoyan Tablets.

R,S－epigoitrin;Pudilanxiaoyan Tablets;HPLC;content determination

R284.1；R286.0

A

1006－4931(2017)05－0035－03

2016－11－23；

2016－12－23)

10.3969／j.issn.1006－4931.2017.05.009

姜雪敏（1979－），女，大学本科，副主任药师，主要从事食品药品检验检测工作，（电子信箱）jiangxuemin88＠163.com。