当归藤的化学成分研究

阙祖亮+刘鼎+陈勇+张昕+魏江存+庞丹清

【摘要】目的： 研究广西壮族和瑶族民间常用药材当归藤的化学成分，为开发利用当归藤药材资源提供实验支持。方法：乙醇回流提取当归藤药材，浓缩成浸膏，用系统溶剂分离法萃取得到不同极性的当归藤提取部位，然后用硅胶柱层析法对石油醚部位进行分离纯化，得到的单体成分通过波谱方法进行鉴定。结果：从石油醚部位分离得到4个化合物，经结构鉴定其中的两个分别是豆甾醇（II）、维生素E（III）。结论：这两个化合物均为首次从当归藤中分离得到。

【关键词】当归藤；化学成分；壮药；瑶药

【中图分类号】R284【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2017）05-0005-05

当归藤为紫金牛科酸藤子属植物当归藤Embelia parviflora Wall ex A DC的根与老藤[1]，又名小花酸藤子、土当归、筛箕蔃等。药性温和，具有补血活血、益精壮阳、强腰膝的功效。民间常用于治疗血虚诸症、月经不调、产后虚弱、腰腿酸痛、跌打骨折等症[1-3]。壮医认为，其具有补血益精、通谷道水道、祛湿毒的功效，可用于治发旺（风湿骨痛）、勒内（血虚）、京瑟（闭经）、心头痛（胃痛）等症状[4]。当归藤是是广西壮族和瑶族民间常用药材，也是广西特色中成药（桂龙药膏和桂龙药酒）的主要药材[1]。瑶族医药是我国传统医药的重要组成部分，历史悠久，明清时代就有“入山采药、沿寨行医”、“负药入城、医治颇效”的瑶医队伍；长期以来，瑶族的民间医药资源十分丰富，根据八十年代初对广西大瑶山自然资源的综合考察报告，发现区域植物约有2335种，且还有不少稀有科类[5-6]。

随着国内对当归藤的应用越来越广泛，为了更安全有效地利用该药材，对当归藤药材进行化学成分研究显得非常重要。但目前国内在化学成分方面仅对该药材乙醇提取物的石油醚部位进行了少量研究，卢文杰等[7]从该药材根的乙醇提取物中分离到了四个单体化合物，其中三个化合物鉴定成功，分别为正三十烷酸乙酯、α-菠甾醇及正三十烷酸。当归藤药材资源丰富，民间使用广泛，为了更好地开发利用当归藤药材资源做好前期准备，本实验采用现代分离分析技术，对当归藤的化学成分进行系统研究。

1仪器与材料

11药材当归藤药材于2012年6月购自广西靖西县，经广西中医药大学郭敏副教授鉴定为紫金牛科酸藤子属当归藤Embelia parviflora Wallex A DC干燥全株。标本存于广西中医药大学药物分析教研室。

12仪器6890-5973N 气质联用仪（美国安捷伦公司）；HP-5MS UI弹性石英毛细管色谱柱（025um×025mm×30m），G1701DA MSD化学工作站，NIST8谱库；Agilent8453紫外-可见分光光度仪（美国Agilent科技公司）；WDF型多功能提取浓缩机组（温州中祥轻工机械厂）；OSB-2100型旋转蒸发仪（东京理化仪器株式会社）；BP-211D型电子天平（德国赛多利斯公司）；SQP电子天平（德国赛多利斯公司）；各种不同规格口径的普通玻璃层析柱。

13材料柱层析硅胶（200～300目、100～200目，西陇化工化学试剂有限公司）；薄层层析硅胶G、薄层层析硅胶H（青岛海洋化工有限公司）； 提取用乙醇为食用酒精（95%乙醇），南宁军正酒厂；石油醚（60～90℃）、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、甲醇和95%乙醇均为西陇化工化学试剂有限公司提供，均为分析纯。

2当归藤化学成分的提取、分离与纯化

21提取分离与纯化取当归藤干药材23kg，适当粉碎，用8倍量乙醇加热回流提取三次，每次2h，减压回收溶剂，得乙醇提取物浸膏234kg（得膏率约10%）。取2kg浸膏，依次用石油醚（60～90℃）、乙酸乙酯和正丁醇溶剂萃取，分别得到石油醚部位浸膏130g，乙酸乙酯部位浸膏330g以及正丁醇部位浸膏685g、水部位浸膏155g和不溶物680g。

在石油醚-乙酸乙酯（8∶1）第15至20瓶的大柱馏分中得到一个粗结晶，该样品能溶于甲醇，拌硅胶（硅胶H）上小柱，用石油醚-乙酸乙酯（15∶1～5∶1）梯度洗脫，在石油醚-乙酸乙酯（8∶1）的馏分中有片状结晶化合物I析出，约17mg。

在石油醚-乙酸乙酯（5∶1）的大柱馏分中有白色结晶析出，拌硅胶（硅胶H）上小柱，然后用石油醚-乙酸乙酯（10∶1→1∶1）梯度洗脱，在石油醚-乙酸乙酯（8∶1）的馏分低9～14瓶中得到白色粉末结晶化合物II，约30mg。

在石油醚-乙酸乙酯（5∶1）的大柱馏分第18～27瓶中淡黄色结晶析出，拌硅胶（硅胶H）上小柱，然后用石油醚-乙酸乙酯（10∶1→1∶1）梯度洗脱，在石油醚-乙酸乙酯（5∶1）的馏分中得到淡黄色粉末化合物III，约22mg。

取石油醚部位浸膏60g，经硅胶柱色谱（100～200目）进行分离纯化，石油醚-乙酸乙酯（100∶0→0∶100）梯度洗脱。在石油醚-乙酸乙酯（10∶1）的大柱馏分中有油状物析出，拌硅胶（硅胶H）上小柱，然后用石油醚-乙酸乙酯（20∶1→5∶1）梯度洗脱，在石油醚-乙酸乙酯（5∶1）的馏分中得到微黄色油状化合物IV，约20mg。

22提取、分离与纯化流程图

3单体化合物的结构鉴定

31化合物II的结构鉴定

311物理性质无色结晶性粉末，溶于氯仿、乙酸乙酯、乙醇、丙酮，不溶于水。

312GC-MS鉴定经仪器NIST08谱库检索得到该化合物：英文名：Stigmasterol。中文名：豆甾醇，条目号：199250，CAS 编号：000083-48-7，分子式：C29H48O。匹配度：99%。

313综合解析综合理化鉴别、气质联用图谱和文献数据，确定化合物II其为豆甾醇（Stigmasterol）。

化合物II ：为白色针晶 （甲醇 ）， m p 166～ 168℃， Liberman-Burchard 反应呈阳性。IR（cm-1）：3 410，2 950， 2 920， 2 860， 1 640， 1 455， 1 435， 1 374， 1 068， 800 1 H-NM R（CDCl3， TM S）： W 5 35（1H， d， J = 4 8Hz）、 5 14（1H， q， J = 24 0 Hz）、 5 00（1H， q， J = 23 6 Hz）、 350（1H， m ） 13 C-NMR： 37 2（C-1）， 31 5（C-2）， 71 8（C-3）， 42 1（C-4）， 140 6（C-5）， 121 7（C-6）， 31 8（C-7）， 31 8（C-8）， 50 1（C-9）， 37 2（C-10）， 21 0（C-11）， 40 5（C-12）， 42 2（C-13）， 56 8（C-14）， 24 3（C-15）， 29 7（C-16）， 55 9（C-17）， 12 0（C-18）， 19 3（C-19）， 42 1（C-20）， 21 2（C-21）， 138 3（C-22）， 129 2（C-23）， 51 2（C-24）， 31 8（C-25）， 21 1（C-26）， 18 9（C-27）， 25 4（C-28）， 12 2（C-29）。

32化合物III的结构鉴定

321物理性质蜡油状偏黄，易溶于甲醇等有机溶剂，不溶于水，溶于乙醇，可与丙酮、氯仿、乙醚和植物油混溶。322GC-MS鉴定经仪器NJST08谱库检索得到该化合物英文名：Vitamin E。中文名：维生素E。条目号：203745。CAS 编号：000059-02-9。分子式：C29H50O2。匹配度：97%。

323综合解析综合物理性质和气质联用图谱与文献资料，确定化合物III为维生素E（Vitamin E），化学结构式见图7。

从气相色谱图中可以看出，化合物III并不是单个成分，而是混合物，采用气质联用鉴别，得到表1，成分1，2，6，匹配度超过90%，除去维生素E外，其他两个成分可以确定其为

成分1

英文名：1，2-Benzenedicarboxylic acid

中文名：邻苯二甲酸

成分2

英文名：9-Octadecenamide， （Z）-

中文名：油酸酰胺；油酰胺； （Z）-9-十八烯酸酰胺

化合物III：黄色油状，分子式为 C29H50O2；EI-MS m/z： 430 [M]+， 431 [M+H]+， 205。 1H-NMR （400MHz， CDCl3） δ： 427 （1H， s， -OH）， 262 （2H， t， J = 67Hz， H-4）， 218 （3H， s， H-7a）， 213 （6H， s， H-5a， 8a），180 （2H， m， H-3）， 125 （3H， s， H-2a）； 13C-NMR （100MHz， CDCl3） δ： 1457 （C-8a）， 1447 （C-6）， 1227（C-8）， 1212 （C-7）， 1187 （C-5）， 1175 （C-4a）， 746（C-2）， 399 （C-1′）， 395 （C-11′）， 376 （C-3′， 5′， 7′）， 374（C-9′）， 329 （C-4′）， 328 （C-8′）， 317 （C-3）， 281 （C-12′），250 （C-10′）， 246 （C-6′）， 239 （C-2a）， 229 （C-12′a），228 （C-13′）， 212 （C-2′）， 209 （C-4）， 199 （C-4′a）， 198（C-8′a）， 124 （C-7a）， 119 （C-8a）， 114 （C-5a）。

4讨论

当归藤是广西少数民族民间常用藥，也是生产中成药的原料药，具有活血补血、强腰膝、益精壮阳的功效，用于治疗血虚诸症、闭经、月经不调、腰腿酸痛、产后虚弱、跌打骨折等症[1，3]。本实验对广西民族药当归藤进行了化学成分的分析研究。从石油醚部位分离纯化得到四个单体，通过理化性质和波谱解析等方法确定其中2个化合物结构，分别是豆甾醇和维生素E。维生素E是脂溶性维生素，又称生育酚，是最主要的抗氧化剂之一。其可促进性激素分泌，使男子精子活力和数量增加；使女子雌性激素浓度增高，提高生育能力，预防流产，烧伤、冻伤、毛细血管出血、更年期综合症、美容等[8]。从当归藤中分离出维生素E印证了当归藤的药效。

本研究从当归藤中分离得到两个化合物，为阐明当归藤药理作用提供资料支撑，但其化学成分及药理活性作用还有待进一步研究。

参考文献

[1]广西壮族自治区卫生厅.广西中药材标准（1990版）[M].南宁：广西科学技术出版社， 1992：44.

[2] 杨菁，张燕.不孕症研究概况[J]. 国外医学妇幼保健分册， 2005，16（4）：232-234.

[3] 国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草[M].上海：上海科学技术出版社， 1999，6：76-77.

[4] 广西壮族自治区食品药品监督管理局. 广西壮族自治区壮药质量标准第一卷[M].南宁：广西科学技术出版社，2008：93.

[5] 戴斌，丘翠嫦. 瑶药资源及其开发利用研究进展[J]. 中国民族民间医药，2003，06：314-318.

[6] 中国科学院中国植物志编委会. 中国植物志[M].北京：科学出版社， 1979， 58： 113.

[7] 陈家源，卢文杰，王雪芬，等.小花酸藤子化学成分的研究[J].华西药学，1998，13（2）： 95-96.

[8]吴虎平，张芳芳.维生素E的临床用途[J].中国乡村医药，2003（10）：45-46.