辽宁本溪部分地区犬狂犬病免疫情况的调查

王志强 （辽宁省本溪市动物疫病预防控制中心 117000）

辽宁本溪部分地区犬狂犬病免疫情况的调查

王志强 （辽宁省本溪市动物疫病预防控制中心 117000）

狂犬病是一种严重的人兽共患传染病，被感染的人或动物一旦发病，死亡率100%。被携带狂犬病病毒的动物咬伤、抓伤是感染该病的主要途径，特别是近年来宠物养殖量增加，人感染狂犬病的发病数量有所上升，据中国疾控中心统计，2013年、2014年和2015年全国狂犬病发病分别为1172人、924人和801人，2016年截至8月份，全国报告发病63人[1]。控制人感染狂犬病的发生，大规模的犬类接种疫苗是控制犬狂犬病的最有效措施，只要某一地区超过70%的犬进行持续和有效的免疫，就可以切断狂犬病的传播[2]，能有效预防人感染狂犬病。

本次针对辽宁本溪部分地区城市宠物犬和农村家养犬的狂犬病疫苗免疫开展情况进行调查，目的是为全市开展狂犬病强制免疫提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 采集血清 在本溪市选取市区3家动物门诊收集全血，收集78份，在本溪市某区选择2个村采集犬全血，采集50份。此次调查共采集128份犬血清。血清采回后在室温静置2～3h，以2000转/min离心3min，用单道移液器吸出血清置于EP管中，-20℃冷冻保存。检测前在室温下解冻。

1.2 检测试剂 犬狂犬病毒ELISA抗体检测试剂盒(北京世纪元亨动物防疫技术有限公司生产)，洗板用洗涤液按试剂盒说明书配制，单道移液器、多道移液器，酶标仪。

1.3 检测方法与步骤 （1）试剂盒放置室温平衡20～30min，将浓缩洗涤液用蒸馏水配制10倍稀释备用；（2）将已分离好的血清用样品稀释液做1∶100稀释，即取10μl血清加入到1ml样品稀释液中，混匀；（3）在包被好的微孔板内加入稀释好的样品，100μl/孔，将阳性、阴性对照各加1孔，临界对照加3孔，100μl/孔，留一孔不加样品作为空白对照；（4）加样后，轻微震荡，置37℃恒温箱孵育30min；（5）孵育结束后，甩干孔中液体，拍干，用稀释好的洗涤液加满每孔，停留1min后甩净、拍干，反复洗板3次；（6）洗板后加酶，除空白对照外，其余各孔加入酶标记物50μl，置37℃恒温箱孵育30min；（7）显色，按1.3.5操作方法洗板3次，拍干后每孔加入显色液A、B各50μl，置避光显色15min；（8）终止，每孔加入终止液50μl，混匀后用酶标仪450nm波长测定A值。

1.4 结果判定 阴性对照A值≤0.15，临界对照A值平均值大于等于0.20小于等于0.80，临界对照A值平均值/阴性对照A值平均值≥2.0，阴性对照A值＞临界对照A值平均值，则实验成立。样品孔A值≥临界对照A值平均值判定为阳性，否则为阴性。

2 结果

2.1 全部样品抗体 试验结果表明，128份犬血清试验全部成立，其中59份样品检测结果为阳性，69份检测结果为阴性，阳性率46.1%。在阳性样品中，57份样品来自城区动物门诊，阳性率73.1%(57/78)，只有2份样品来自农村犬，阳性率4%；阴性样品中有48份来自农村犬，21份样品来自城区动物门诊(见表1)。

表1 全部样品抗体监测结果 (%)

2.2 城区和农村犬的抗体 （1）从城区动物门诊收集到的样品分布情况看，中心城区动物门诊的样品阳性率较高，即DM、PS动物门诊，阳性率分别为78.6%和87.1%，说明中心城区动物门诊对狂犬病免疫推广的较好，宠物养殖者也对狂犬病免疫认识比较到位，都能主动为犬注射疫苗。而CT动物门诊位置较偏，采集到的样品抗体阳性率不高，可能与宠物养殖者的防疫意识不高有关。（2）农村家养犬的情况更能说明问题，在两个远离市区的行政村抽取了50只犬，只有2只犬抗体阳性，这2只犬还都是当地村动物防疫员家养的犬，村防疫员为其注射了狂犬病疫苗，其他农民从来没有给犬注射狂犬病疫苗的意识(见表2、表3)。

表2 城区动物门诊抗体监测结果 (%)

表3 农村家养犬抗体监测结果 (%)

2.3 养犬者年龄与免疫率关系 通过在城区动物医院收集全血时的简单调查，发现宠物养殖者的年龄因素对狂犬病免疫情况有一定影响，20～30岁是饲养宠物的主力人群，为犬注射疫苗也较为主动，并且一般都是选择进口疫苗，在经济上没有太多考虑。一般都是通过微博、微信等渠道了解的防疫知识，对前沿的防疫、饲养、训练等知识都能快速接受，这说明新媒体对宣传推广动物防疫和养殖知识非常有效。而50岁以上的人群也是宠物养殖的主要群体，但对防疫知识了解的不多，动物医生反复讲解也往往不能接受，选择注射疫苗的不多，特别是对进口疫苗的价格较为敏感，一般注射疫苗也选择国产疫苗(见表4)。

2.4 不同疫苗的应用 在选择疫苗上，选择进口灭活苗的较多，选择国产活疫苗的其次，国产灭活疫苗因为推广原因，本地动物医院都没有引进，农村2个村防疫员注射的国产灭活疫苗是当地动物防疫机构用来推广试验的。目前本溪动物医院用的狂犬疫苗只有进口灭活苗和国产五联活疫苗，从对动物医院调查了解来看，选择用进口苗的较多，价格也能接受，免疫效果好，免疫副反应较少，宠物养殖者已经普遍接受。而国产苗价格较便宜，一般狗场选择较多，但时常有免疫副反应发生(见表5)。

一些宠物养殖者到动物医院都说自己的犬在买回家之前进行了狂犬病的免疫，但通过试验发现，一些狗场根本没有做免疫，却告诉购买者已经免疫了，这也是造成本来没免疫，但宠物养殖者认为已经免疫了，给疫情传播埋下了隐患。

表5 应用疫苗情况统计表 (%)

3 讨论

（1）从抗体监测情况看，本溪市市区动物门诊采集的犬血清抗体较高，阳性率在70%以上，而农村抗体阳性率极低，基本没有注射狂犬病疫苗的意识，这种情况说明开展犬的狂犬病强制免疫迫在眉睫，国内大部分城市都已经开展了狂犬病的强制免疫工作，都取得了很好的效果[3,4]。建议在本市立即开展家养动物狂犬病免疫工作，并将免疫、注册、健康检查等纳入犬的综合管理措施当中，使全市养犬活动在规范的框架下运转，保障公共卫生安全。（2）关于疫苗使用：WHO建议进行大面积犬免疫接种时应使用灭活苗，因为灭活苗更安全，不存在毒力返强的现象，而且灭活苗对温度的变化不敏感，更易于保存。进口灭活苗在免疫效果上也比活疫苗好，周桂兰等[5]研究发现，兽用狂犬病活疫苗免疫犬，连续免疫3次(每次间隔1个月)，3免2个月后血清抗体滴度达标率100%，7个月后血清抗体滴度达标率下降至25%，而进口狂犬病灭活疫苗连续免疫3次(免疫间隔1年)，3免后1～3年血清抗体滴度达标率100%。相对而言，兽用狂犬病活疫苗免疫犬血清抗体滴度下降快，持久力差。目前国内生产的灭活疫苗的免疫效果和安全性也得到了印证，如辽宁成大生产的维瑞成狂犬病灭活苗免疫效果都得到了印证[6]，并且价格还比进口灭活苗便宜。因此，建议开展狂犬病免疫时应引进国产灭活苗。（3）对于狂犬病的防治，应着重加强对犬的免疫，只有做好了犬的免疫，才能从源头上控制人感染狂犬病。各级政府应将狂犬病的免疫纳入本级财政预算，对该工作给予高度重视，才能切实防控好狂犬病，维护公共卫生安全。

[1] 全国法定传染病疫情概况. 中国疾控中心网站. http∶//www. hinacdc. cn/. 2016. 2. 18

[2] 夏咸柱. 加强动物狂犬病防控研究从源头上防控人类狂犬病[C]. 2010.

[3] 北京市动物狂犬病的防控. 2012年中国狂犬病年会论文集[C]. 2012∶ 101-104.

[4] 刘佩红, 屠益平, 赵洪进. 上海市犬类狂犬病防控现状、问题及对策[J]. 上海畜牧兽医通讯, 2014, 4∶ 85-87.

[5] 周桂兰, 赵德明, 祝俊杰等. 兽用狂犬病疫苗免疫犬的效果评价[J]. 中国兽医杂志, 2007, 4∶ 50-53.

[6] 张晓华, 杨琪, 王庆波等. 狂犬病灭活疫苗PV2061株的免疫原性试验[J]. 中国兽医杂志, 2014, 2∶ 30-31.

S858.292

A

1007-1733(2017)04-0050-02

2016–12–23）